茶叶中六六六、滴滴涕、三氯杀螨醇残留量的测定.doc

1、1茶叶中六六六、滴滴涕、三氯杀螨醇残留量的测定摘要：采用配有电子捕获检测器（ECD）的 Agilent 7890B气相色谱仪同时测定茶叶中六六六（-HCH、-HCH、-HCH、-HCH） 、滴滴涕（p，p-滴滴伊、p，p-滴滴滴、o，p-滴滴涕、p，p-滴滴涕） 、三氯杀螨醇农药残留量。9 种农残均能在 DB-5（30m*0.32mm*0.25m 毛细管柱上得到很好的分离。方法的线性范围六六六、滴滴涕为：0.010.2g/ml，三氯杀螨醇为：0.020.4g/ml；方法检出限为0.0030.015mg/kg；加标回收率为：86.5%110.5%；相对标准偏差为：1.00%6.13%。该方法简便

2、、快速、准确、重现性好、灵敏度高，适用于实际检测。 关键词：茶叶；气相色谱；六六六；滴滴涕；三氯杀螨醇；农药残留 中图分类号：TB 文献标识码：Adoi：10.19311/ki.16723198.2016.19.098 福建省是我国产茶大省，制茶、饮茶、贩茶历史悠久，其种质资源丰富，茶叶种类繁多，茶园面积、茶叶总产量均居我国前茅，所以茶叶安全问题备受关注。六六六、滴滴涕在十几年前就是禁用农药，其性质稳定，非常难以降解，容易存在于土壤中；三氯杀螨醇为茶树生长过程中禁用农药。目前茶叶中有三氯杀螨醇超标，六六六、滴滴涕检出的情况，一方面是六六六、滴滴涕土壤中的存在，另一方面不排除在茶叶的2生长过程中

3、有施用三氯螨醇的情况。因此建立快速准确的方法监测茶叶中三个参数，九个农残是本文研究的方向。 1 材料与方法 1.1 主要仪器和药品试剂 1.1.1 仪器 Agilent 7890B气相色谱仪，配 ECD，DB-5 （30 m*0.32 mm*0.25 m）色谱柱；旋转蒸发器；循环水真空泵；超声波清洗器；组织捣碎机；旋窝振荡器。 1.1.2 药品试剂 正己烷、丙酮、石油醚（30-60）均为色谱纯、氯化钠（分析纯） 、浓硫酸（优级纯） ；9 种农药标准溶液（100 g/mL，均购自农业部环境保护科研监测所：-HCH、-HCH、-HCH、-HCH、p，p-滴滴伊、p，p-滴滴滴、o，p-滴滴涕、p，

4、p-滴滴涕、三氯杀螨醇） ，按需要用正己烷配成不同浓度的混标储存于冰箱中备用。 1.2 试样前处理和色谱分析 1.2.1 样品的提取与净化 准确称取已磨碎的茶叶 2.0g（精确到 0.01g）于 50ml离心管中，加入 6ml水，浸泡 30min，加入 20.0ml正己烷+丙酮（2+1，体积比） ，超生15min，加入一定量氯化钠使其饱和，剧烈振摇，离心 5min，吸取上清液于 100ml茄形瓶中，残渣再用 20ml正己烷+丙酮（2+1，体积比）重复提取一次，合并上清液于 35水浴上减压浓缩至近干，加入 5ml正己烷转移至 10ml离心管中，加 0.5ml浓硫酸净化，振荡旋窝 0.5min，于

5、33000r/min离心 5min。取上清液进行 GC分析。 1.2.2 色谱条件 色谱柱：DB-5（30 m*0.32mm*0.25m） ；进样口温度：250；检测器温度：300。 柱温升温程序：80（2min）-20/min-200（3min）-3/min-250（4min） ；载气：高纯 N2（纯度99.999%） ；进样方式：不分流进样（0.75min 后开启分流阀） ；载气流速：1.0ml/min；尾吹气：60ml/min；进样量：1.0l。在此条件下的色谱图见图 1。 1-HCH、2-HCH、3-HCH、4-HCH、5-三氯杀螨醇、6-p，p-滴滴伊、7-p，p-滴滴滴、8-o，p

6、-滴滴涕、9-p，p-滴滴涕 采用自动进样器进样，在相同的气相色谱条件下，分别将 9种农药的混合标液和净化后的样品等体积穿插进样，以保留时间定性，以样品峰面积与标准峰面积比较定量。 2 结果与分析 2.1 茶叶是否加水与提取溶剂的选择 对于茶叶是否加水做两组实验。第一组实验：茶叶不加水，添加一定浓度混标，分别用正己烷+丙酮（2+1，体积比） 、石油醚按上述提取方法处理上机分析，计算回收率；第二组实验：茶叶加水浸泡 30min，添加一定浓度混标，处理方法同组一，计算回收率。 通过比较组一、组二回收率结果，发现组二的结果优于组一，特别是 o，p-滴滴涕、p，p-滴滴涕回收率有明显的提高，所以本实验

7、在4提取过程中选择先用水浸泡 30min。 通过比较同组之间回收率结果，发现使用正己烷+丙酮（2+1，体积比）效果更好，虽然使用石油醚提取回收率能够满足实验要求，但是使用正己烷+丙酮（2+1，体积比）提取回收率更优，具有更高的精确性，所以本实验选择正己烷+丙酮（2+1，体积比）作为提取溶剂。 2.2 净化条件的选择 茶叶中组分复杂，色素干扰严重，如何净化茶叶中的杂质，保留有效组分是茶叶前处理中的关键问题。浓硫酸能够有效去除茶叶中的杂质、色素，净化后液体澄清，并且六六六、滴滴涕、三氯杀螨醇在浓硫酸环境中不会变质、变性，测试回收率结果均能满足实验要求。所以本实验采用浓硫酸净化茶叶中的杂质。 2.3

8、 线性范围及检出限 将混合标准溶液配制成六六六、滴滴涕（0.01、002、005、0.1、0.2g/ml） 、三氯杀螨醇（002、004、01、0.2、0.4g/ml）的标准工作液，在 1.2.3色谱条件下进行测定，以色谱峰面积为纵坐标，浓度为横坐标作标准曲线，得 9种农药的线性方程和相关系数，以 3倍噪音计算方法检出限，10 倍噪音计算方法定量限，结果见表 1。 取茶叶空白样品，分别加入三个浓度的农药标准混合标液（有机氯：0.025、1.25、5.0mg/kg；菊酯类：005、2.5、10.0mg/kg） ，按本方法的操作步骤重复测定 3次，计算 9种农药的加标回收率和精密度，结果见表 2。

9、由表 2可见，本方法能满足六六六、滴滴涕及三氯杀螨醇的检测要5求。表 29种农药在茶叶中的添加浓度、回收率试验结果和精密度 有效去除杂质，保留检测组分是农药残留前处理的关键，本方法对茶叶检测是否加水、不同溶剂的提取进行了摸索，利用浓硫酸去除茶叶中的杂质、色素，达到理想的净化效果。回收率和重现性均能满足定量分析的要求，可很好的用于茶叶中六六六、滴滴涕和三氯杀螨醇的检测要求。 参考文献 1冯洁，汤桦，陈大舟等.茶叶中 9种有机氯和拟除虫菊酯农药残留的前处理方法研究J.分析测试学报，2010，29（10）：10411047. 2刘小文，吴国星，高熹等.几种新技术在茶叶农药分析样品前处理中的应用J.云南大学学报：自然科学版，2008，30（SI）：210214. 3胡贝贞，沈国军，邵铁锋等.加速溶剂萃取-气相色谱-负化学源质谱法测定茶叶有机氯和拟除虫菊酯类农药残留量J.分析试验室，2009，28（1）：8083. 4傅水玉，陈晓生，王明等.气相色谱法测定茶叶有机氯农药残留的前处理方法研究J.杭州师范学院学报：自然科学版，2006，5（2）：118122. 5食品中有机氯农药多组分残留量的测定（GB/T 5009.19-2008）S. 6茶叶、水果、食用植物油中三氯杀螨醇残留量的测定（GB/T 5009.176-2003）S.