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病原生物学教研室.ppt

1、病原生物学教研室Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University,医学微生物学Medical Microbiology,第二十一章 肠道病毒 (enterovirus),Enterovirus是小RNA病毒科 的一个属。它们在人类消化道细胞繁殖,然后通过血液侵犯其他器官,引起各种临床综合病症。 人类肠道病毒有: 1、脊髓灰质炎病毒,3个血清型 2、Coxsackie 病毒,A组23个血清型,B组6个血清型 3、ECHO 病毒,31个血清型 4、新型肠道病毒,68、69、70、71,肠道病毒的共同特性:病毒体呈球形,27n

2、m,为20面体对称结构,无包膜。基因组为单股正链RNA。在宿主细胞浆内增殖,迅速引起细胞病变。耐乙醚,耐酸,5630min可使病毒灭,对紫外线、干燥敏感。主要经粪口途径传播,临床表现多样。,脊髓灰质炎病毒 (poliovirus),脊髓灰质炎病毒是脊髓灰质炎病原体,引起小儿麻痹症。1840年德国的Heiner描述了脊髓灰质炎。1909年Landsteiner和Popper首次感染猴子获得成功,1949年Enders等用组织培养法分离脊髓灰质炎病毒,确定有三个血清型。1953年第六次国际微生物大会上病毒委员会推荐正式命名为脊髓灰质炎病毒。1955年Salk灭活疫苗(IPV),1961年Sabin

3、减毒活疫苗(OPV),一、生物学特性,(一)形态结构(图) 1、病毒体呈球形,无包膜。2730nm,20面体立体对称。 2、外壳由3242个壳微粒(VP1、VP2、VP3、VP4)组成,VP1、VP2、VP3位于病毒衣壳表面(中和抗原),VP4位于衣壳的内部。 3、基因组为单股正链RNA,其5端的Vpg与RNA合成与基因组装配有关; 3端带有polyA尾,加强其感染性。,病毒RNA为感染性核酸 Polyprotein 结构蛋白 功能蛋白 ( VP1-VP4) (酶及其它) 降解真核细胞核糖体帽 结合蛋白,封闭细胞 mRNA的翻译,(二)培养特性肠道病毒在灵长类上皮样细胞中生长最好。常用的有猴肾

4、、人胚肾、人胚肺、人羊膜和HeLa细胞等。病毒在胞浆内复制,迅速(24小时)引起细胞病变,致使细胞变圆、坏死、脱落。,(三)抗原组成与血清型 脊髓灰质炎病毒有三个血清型(I、II、III)。用补体结合试验查出病毒有两种抗原,一种称为D(致密)抗原,存在于成熟的、有感染性的病毒颗粒中,是该病毒的中和抗原,具型的特异性。另一种称为C(无核心)抗原,存在于经过56灭活或未成熟的空心病毒颗粒,与三型病毒的抗血清均呈补体结合阳性反应。,(四)抵抗力 病毒对理化因素的抵抗力较强,在胃肠道能耐受胃酸、蛋白酶和胆汁的作用,在室温下可存活数日,但50可迅速破坏病毒。,二、致病性与免疫性,人是脊髓灰质炎病毒的唯一

5、天然宿主。这是因为在人细胞膜表面有一种受体(免疫球蛋白超家族的细胞粘附分子),与病毒衣壳上的结构蛋白VP1具有特异的亲和力,使病毒得以吸附到细胞上。,(一)传染源与传播途径 传染源:患者或无症状带毒者,感染后病毒在咽喉部持续存在13周,通过粪便排毒118周 粪-口途径是主要的传播方式 流行季节主要在夏、秋季,一般呈散发流行或地区性暴发流行。,(二)发病过程,Polio,咽、肠道淋巴组织中初步增殖,粪口,机体免疫力较强,可表现为轻症或隐性感染,第一次病毒血症,至单核吞噬细胞系统增殖,大量病毒再次入血,第二次病毒血症,神经系统感染,病毒数量和毒力与机体免疫力的强弱显著影响其结局,(三)临床表现 绝

6、大多数人(9095%)呈隐型感染 轻型:病症似流感 非麻痹型(无菌性脑膜炎型) 麻痹型:暂时性肌肉麻痹、永久性肢体麻痹、延髓麻痹 上述临床表现的严重程度取决于多种因素,如毒株的毒力、感染病毒的相对数量、机体免疫功能状态等。,(四)免疫性 1、感染后对同型病毒产生持久牢固免疫力,对异型病毒有交叉免疫作用。 2、保护性免疫以体液免疫为主。SIgA,血液中的IgM、IgA、IgG抗体 3、六个月内婴儿有母体抗体的保护而较少感染。,三、微生物学检查,(一)病毒分离与鉴定 可以从患者鼻咽部、血、脑脊液及粪便中分离病毒(二)血清学试验 用发病早期和恢复期双份血清进行中各试验,若血清抗体有4倍或以上增长,则

7、有诊断意义。(三)快速诊断 核酸杂交、PCR、ELISA、IFA等。,四、防治原则,(一)主动免疫 Sabin疫苗是减毒活疫苗,口服 接种对象:2个月7岁儿童 用法:2月龄开始连服三次OPV,每次间隔一个月,4岁时加强一次的免疫程序可保持持久免疫力。 Salk疫苗为灭活疫苗,肌肉注射 目前世界上大多数国家(包括我国)采用三价活疫苗免疫法,(二)被动免疫 人免疫球蛋白,免疫效果保持35周。,1、脊髓灰质炎病毒致病特点和免疫学特点? 2、脊髓灰质炎Salk疫苗及Sabin疫苗的来源及优缺点?,柯萨奇病毒 埃可病毒 新型肠道病毒,一、病毒型别与抗原性,(一)柯萨奇病毒(Coxsakievirus)柯

8、萨奇病毒可以分为A、B两组。A组有23型病毒,B组有6型病毒。(二)埃可病毒(ECHO virus)埃可病毒最早在脊髓灰质炎流行期间从人的粪便中分离,目前共有31个血清型。 (三)新型肠道病毒新分离的肠道病毒不再归属于柯萨奇病毒或埃可病毒,从68号开始编号命名,目前已编号到72型,第72型是甲型肝炎病毒。,二、临 床 表 现,柯萨奇病毒、埃可病毒、新型肠道病毒的流行病学特点和致病机理与脊髓灰质炎病毒相似,但各自攻击的靶器官不同。柯萨奇病毒、埃可病毒和新型肠道病毒感染组织更为广泛,致病特点是病毒在肠道增殖却很少引起肠道疾病。人体受感染后,约60%呈隐性感染。出现临床症状时,由于侵犯的器官组织不同

9、而表现各异。,(一)无菌性脑膜炎(二)麻痹(三)疱疹性咽峡炎(四)心肌炎和心包炎(五)肌痛或肌无力(六)急性出血性结膜炎,肠道病毒血清型别繁多,不同型别病毒可以引起相同的病症,而同样型别的病毒在不同条件下也可引起不同的临床病症,因此确定任何一个型别作为某种病症的病原是困难的。,三、防治原则,无特效的预防和治疗方法,对有感染性的病人应当隔离。,第二节 轮 状 病 毒 (Rotavirus),人类轮状病毒归类于呼肠孤病毒科 (Reoviridae) 轮状病毒属,是婴幼儿腹泻的主要病原体。,一、生物学性状,(一)形态结构病毒体呈圆球形,有双层衣壳,每层衣壳呈二十面体对称。内衣壳的壳微粒沿着病毒体边缘

10、呈放射状排列,形同车轮辐条呈车轮状(如图) 。具双层衣壳的病毒体有传染性。病毒体的核心为双股RNA,由11个基因片段组成。,结构蛋白(VP1、 VP2、 VP3、 VP4、 VP6、 VP7): VP1- VP3位于核心, VP6 位于内衣壳,VP4 与VP7位于外衣壳; VP7 是中和抗原、决定其血清型;VP4为病毒血凝素(吸附),亦是中和抗原。 非结构蛋白(NSP1NSP5) 为病毒酶或调节蛋白,复制中起作用。,(二)分型 轮状病毒据VP6的抗原性分为7个组(AG)。A-C组能引起动物与人类腹泻,D-G组只引起动物腹泻。A组最为常见。 A组据VP4与VP7可分19个P 血清型 和14个G血

11、清型,(三)病毒培养需选用特殊的细胞株培养(如恒河猴胚肾细胞MA104株和非洲绿猴肾传代细胞CV-1株)(四)抵抗力 对理化因子的作用有较强的抵抗力,在粪便中可存活数天/数周。 病毒经乙醚、氯仿、酸、碱、反复冻融、超声、371小时或室温(25)24小时等处理,仍具有感染性。95%的乙醇是最有效的病毒灭活剂,56加热30分钟也可灭活病毒,二、致病性与免疫性,(一)流行环节 传染源是病人和无症状带毒者 主要通过粪-口途径传播,呼吸道传播 主要在冬季流行,(二)发病机制 1、病毒侵犯小肠细胞的绒毛,病毒在胞浆内增殖,造成肠微绒毛萎缩、变短、脱落,导致机体吸收功能障碍 2、腺窝细胞增生,分泌增多 3、

12、对双糖酶的破坏,致乳糖及其他双糖吸收不良,引起渗透性腹泻 4、NSP4具毒素样作用,影响钙离子通道而影响水的吸收,(三)临床表现,1、A组轮状病毒:是引起6个月2岁婴幼儿严重胃肠炎的主要病原体,潜伏期24天。病人最主要的症状是腹泻,一般为自限性,也可危及生命。 2、B组轮状病毒:引起年长儿童和成人腹泻,可暴发性流行 3、C组轮状病毒:致病性类似A组(四)免疫性 分泌型IgA 、IgM、IgG抗体,对同型病毒感染有作用,对异型只有部分保护作用,三、微 生 物 学 诊 断,(一)检测病毒或病毒抗原 腹泻粪便液直接作电镜或免疫电镜检查 ELISA双抗体夹心法(检测病毒抗 体)(二)分子生物学技术 聚

13、丙烯酰胺凝胶电泳法和核酸杂交技术,重视饮用水卫生,并注意防止医源性传播。目前尚无特异有效治疗药物,主要是补液,维持机体电解质平衡。特异性减毒活疫苗正在研制之中,四、 防 治 原 则,第三节 其它(肠道腺病毒) (enteric adenovirus, EAD),肠道腺病毒(enteric adenovirus, EAD) 40、41、42三型是引起病毒性腹泻的病原体。主要经粪-口传播,以夏秋季多见,主要侵犯5岁以下小儿,引起腹泻,少有发热或呼吸道症状。,第三节 其它(杯 状 病 毒)(calicivirus),杯状病毒(calicivirus)包括小圆形结构化病毒(SRSV)和典型杯状病毒。杯状病毒的形态特点是球形,无包膜,其表面有杯状凹陷,棱高低不平。基因组为单股正链RNA,只有一种衣壳蛋白。,SRSV是引起非细菌性胃肠炎暴发流行最重要的病原体,流行季节为冬季,任何年龄经粪-口传播(呼吸道)。其感染引起小肠绒毛轻度萎缩和粘膜上皮细胞破坏,致恶心、腹泻等消化道症状,呈自限性。,第三节 其它(星 状 病 毒)(astrovirus),星状病毒(astrovirus),球形,无包膜,电镜下表面结构呈星状,核酸为单股正链RNA。粪-口传播,冬季流行,侵十二指肠粘膜细胞,并在其内大量增殖至细胞死亡,引起发热及消化道症状。,

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