美味猕猴桃茎醋酸乙酯部位化学成分的研究.doc

1、美味猕猴桃茎醋酸乙酯部位化学成分的研究作者：梁洁 甄汉深 梁臣艳 钟振国 韦汉燕【摘要】 目的研究美味猕猴桃茎醋酸乙酯部位的化学成分。方法用色谱法分离，用波谱方法及理化性质鉴定结构。结果从美味猕猴桃茎醋酸乙酯部位中分离鉴定了 3 个化合物：分别鉴定为 谷甾醇（） ，胡萝卜苷（） ，2，3，24 三羟基12 ，20（30） 二烯28 乌苏酸（） 。结论 化合物，均为首次从该植物中分离得到。 【关键词】 美味猕猴桃茎； 醋酸乙酯部位； 谷甾醇； 胡萝卜苷； 2，3，24 三羟基-12，20（30） 二烯28 乌苏酸Abstract:ObjectiveTo study the chemical co

2、nstituents of ethyl acetate extract from the stems of Actinidia deliciosa C.F.Liang et A.R.Ferguson.MethodsChromatographic methods were used to isolate compounds from ethyl acetate extract in the stems of Actinidia deliciosa C.F.Liang et A.R.Ferguson and chemical and spectral methods were used to el

3、ucidate the structures of the isolated compounds. ResultsThree compounds were identified as -sitosterol()，Daucosterol()，2,3,24trihydroxy12,20(30)ursadien28oicacid (). Conclusion, and were obtained from the plant for the first time.Key words:Actinidia deliciosa C.F.Liang et A.R.Ferguson； Ethyl acetat

4、e extract； sitosterol ； Daucosterol； 2,3,24trihydroxy12,20(30)ursadien28oicacid美味猕猴桃 Acitinidia deliciosa C.F.liang et A.R.Ferguson 为猕猴桃科猕猴桃植物。本品酸微甘、凉，有小毒，具有清热、利尿、活血、消肿的功效，适用于治疗肝炎、水肿、跌打损伤、风湿关节痛、淋浊、带下、疮疖等诸症1 。有实验表明，美味猕猴桃根提取物具有抗肿瘤作用2 。美味猕猴桃分布地区较广，在湖南、广西、江西、陕西等地资源丰富。对于美味猕猴桃化学成分的研究除作者的有关化学成分实验报道外3 ，未见有其

5、他公开报道。作者对广西产美味猕猴桃茎醋酸乙酯部位的化学成分进行了研究，从中分离得到 3 个化合物，通过理化性质及波谱分析，鉴定其结构分别为 谷甾醇（） ，胡萝卜苷（） ，2，3，24 三羟基12 ，20（30） 二烯28 乌苏酸（） 。化合物，均为首次从该植物中分离得到。1 器材XT4-100A 显微熔点测定仪； INOVA 500NB 超导核磁共振谱仪；ZABHS 双聚焦磁质谱仪；Agilent8453 紫外 可见分光光度仪；NEXUS470 型（FTIR ）傅立叶红外分光光度计。柱层析用硅胶（100200 目） 、薄层层析用硅胶 G（200300 目）由青岛海洋化工厂生产，Sephadex

6、 LH20 购于 Pharmacia 公司，试剂均为分析纯。 谷甾醇对照品和胡萝卜苷对照品均购于中国药品生物制品检定所。美味猕猴桃 200312 采于广西桂林地区，经中国科学院广西植物研究所植物分类室鉴定为猕猴桃科猕猴桃属植物美味猕猴桃（Actinidia deliciosa C.F.Liang et A.R.Ferguson） 。标本存于广西中医学院药物分析教研室。2 方法与结果2.1 提取与分离美味猕猴桃茎粗粉（19 kg） ， 95%乙醇渗漉提取，渗漉液减压回收乙醇，浓缩，拌于硅胶中，依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇、甲醇回流提取，回收溶剂，浓缩得到石油醚部分干膏、醋酸乙酯部分干膏、正丁醇

7、部分干膏、甲醇部分干膏。取醋酸乙酯部分（30 g）经硅胶柱色谱，石油醚丙酮(100001)梯度洗脱，共收集 500 流分，每流分收集约 250 ml。Fr 4095 流分析出白色针状结晶，得化合物（446.5 mg） ； Fr 378432流分析出白色颗粒状结晶，得化合物（161.3 mg） ；Fr 435458 流分析出白色粉末状结晶，得化合物（208.6 mg） 。2.2 结构鉴定2.2.1 化合物白色针晶（氯仿） ，mp140140.5。LiebermannBurchard 反应阳性，氯仿 浓硫酸反应阳性。MS m/z：414（M+） 。IR（KBr）cm-1：3 404，2 963，2

8、 934，2 869，1 667，1 463，1 377。13CNMR （500 MHz,DMSOd6 ）中有 29 个碳的吸收峰，其中在 11.2,11.3,18.2,18.6,19.2,19.4 有 6 个甲基碳的吸收。与对照品 谷甾醇共薄层 Rf 一致，混合熔点不降故鉴定为 谷甾醇。2.2.2 化合物 白色粉末（甲醇） ，mp291292。Liebermann-Burchard 反应阳性，氯仿-浓硫酸反应阳性，Molish 反应阳性。MS m/z：414（M+glc） ，399，396，381，329，303，161，275。IR（KBr）cm-1：3 405，2 959，2 933，2

9、 868，1 630，1 463，1 381，1 047，1 023。13CNMR （500MHz，C5D5N）中有 35 个碳的吸收峰，其中在12.0,12.2,19.1,19.3,19.4,20.0 有 6 个甲基碳的吸收。与对照品胡萝卜苷共薄层 Rf 一致，混合熔点不降故鉴定为胡萝卜苷。2.2.3 化合物白色粉末（甲醇） ，mp283284。Liebermann-Burchard 反应阳性，Molish 反应阳性。XMEOHmaxnm：208。IR（KBr）cm-1：3431，2929，1690，1640，1548，1400，1034。FAB+-MS m/z：487（M+H） ，451，

10、247，239，202，187，133。其中 m/z 487 为准分子离子峰（M+H） ，故分子量为 486。1H-NMR(500MHz, C5D5N) 在0.82.5 之间出现多重峰似的甾体或三萜母核特征峰，信号相互重叠，提示有较多化学环境相似的CH ，CH2 和CH3 ；5.4（1H，d） ，为环内双键C=CH ；4.79（2H，d）为环外双键C=CH2 ，4.454.6 可能为与-OH 相连的CH 。13CNMR(500MHz, C5D5N) ：179.9(C28) ，153.8(C20) ，139.2(C13) ，125.5(C12) ，105.1(C30) ，74.2(C3) ，66

11、.2(C2) ，65.2(C24) ，53.5(C18) ，49.4(C5) ，48.1(C17) ，48.0(C-9)，45.2(C-4) ，43.2(C1) ，42.5(C14) ，39.6(C8) ，38.6(C22) ，38.5(C10) ，37.4(C19) ，32.7(C7) ，31.0(C21) ，28.2(C15) ，24.8(C16) ，23.9(C23) ，23.8(C11) ，23.6(C27) ，18.8(C-6)，17.2(C25) ，17.0(C26) ，16.5(C29) 。以上数据与文献报道 2，3，24-三羟基-12，20（30） 二烯28 乌苏酸（2，3，2

12、4Trihydroxy12,20(30)ursadien-28-oic acid）基本一致4 ，故确定化合物为2，3，24 三羟基-12，20（30） 二烯28 乌苏酸，其结构如图 1 所示。图 1 化合物的结构式（略）3 讨论3.1 从美味猕猴桃茎的醋酸乙酯部位中分离鉴定了 3 个化合物：化合物为 谷甾醇；化合物为胡萝卜苷；化合物为 2，3，24三羟基12 ，20（30） 二烯28 乌苏酸。这 3 个化合物均为首次从美味猕猴桃的茎中分得，而化合物为首次从该属植物中分得。3.2 化合物为 2，3，24 三羟基12 ，20（30） 二烯28乌苏酸，查阅近年来国内外的文献，还没有发现对该化合物进行

13、过药理活性的研究。至于其是否有抗抗癌活性或具有其他药理作用，有待进一步的药理实验研究来证实。3.3 通过本实验的研究，填补了美味猕猴桃单体化合物研究的空白，为下一步的药理实验研究，揭示美味猕猴桃抗癌成分的构效关系提供物质基础，并为寻找的抗癌药物提供科学的依据。本研究对充分挖掘利用广西中草药资源、合理开发利用美味猕猴桃有着实际意义。【参考文献】1 江苏新医学院.中药大辞典，下册M.上海：上海科学技术出版社，1997：2211.2 钟振国，张凤芬，甄汉深，等.美味猕猴桃根提取物抗肿瘤作用的实验研究J.中医药学刊，2004，9（22）：70.3 甄汉深，粱 洁，粱臣艳，等.广西美味猕猴桃茎化学鉴别的初步研究J.广西中医药,2006,29(5)：49.4 Hisashi Kojima,Hideo Tominaga,and Haruo Ogura. Pentacyclic trierpenoids from prunenlla ulgarisJ.Phytochemistry,1987,26（4）：1107.