沙利度胺联合VAD方案化疗对多发性骨髓瘤病人细胞因子影响.doc

1、沙利度胺联合 VAD 方案化疗对多发性骨髓瘤病人细胞因子影响作者：刘竹珍 杨颉 汪洪毅 崔中光 【摘要】 目的 了解多发性骨髓瘤（MM）病人血清白细胞介素-6（IL-6） 、肿瘤坏死因子 （TNF-）的表达情况，并探讨沙利度胺联合化疗对 MM病人血清 IL-6、TNF- 的影响。方法 用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法测定 30例正常人与 79例 MM病人血清 IL-6、TNF- 的水平，并对 MM病人不同临床分期，沙利度胺联合化疗前、后检测结果进行比较。结果 MM病人血清 IL-6、TNF- 的水平明显高于正常对照组，差异有显著性（t=8.117、11.525，P0.001） 。、期病人血

2、清 IL-6、TNF- 的表达水平明显高于期病人（F=4.233、10.273，q=3.0126.294,P0.05） 。55 例治疗有效的 MM病人血清 IL-6、TNF- 的水平治疗后较治疗前明显下降（t=3.153、4.361，P0.01） ；治疗无效的 22例 MM病人治疗前、后血清 IL-6、TNF- 水平无明显差异（t=0.850、0.913,P0.05） 。结论 血清 IL-6、TNF- 的水平在 MM病人中呈高表达，且与其临床分期有关；沙利度胺联合化疗可显著降低 MM病人血清 IL-6、TNF- 的水平；检测血清 IL-6、TNF- 的水平可作为判断 MM疗效及病情的辅助指标。

3、 【关键词】 多发性骨髓瘤；白细胞介素 6；肿瘤坏死因子 ；沙利度胺；药物疗法，联合 ABSTRACTObjectiveTo observe the serum levels of IL-6 and TNF- in patients with multiple myeloma （MM）, and explore the effects of thalidomide-combination chemotherapy on IL-6 and TNF-. MethodsThe serum IL-6 and TNF- in 79 MM patients and 30 normal controls w

4、ere determined by ELISA, and the results of the patients in different stages as well as before and after therapy were compared.Results The concentrations of IL-6 and TNF- in MM group were significantly higher than those in the control （t=8.117,11.525;P0.001）. The levels of IL-6 and TNF- in stage and

5、 stage patients were higher than those of stage（F=4.233, 10.273;q=3.0126.294;P0.05）. Of 55 patients responding well to the therapy, levels of IL-6 and TNF- declined significantly compared with before treatment （t=3.153,4.361;P0.01）, for 22 patients who showed poor response to the therapy, the serum

6、parameters did not reveal significant difference from that of before medication （t=0.850,0.913;P0.05）. Conclusion The concentrations of IL-6 and TNF- are high in MM patients, and associated with the clinical stages of the disease. The thalidomide-combined chemotherapy can significantly reduce the se

7、rum levels of IL-6 and TNF-, a detection of this two items can be used as an auxiliary index in estimating the therapeutic efficacy and the condition of patients with MM. KEY WORDSMultiple myeloma; Interleukin-6; Tumor necrosis factor-alpha; Thalidomide; Drug therapy, combination 多发性骨髓瘤（MM）是造血系统常见恶性

8、肿瘤之一，是以浆细胞恶性增生，分泌单克隆免疫球蛋白，并伴有正常免疫球蛋白减少以及广泛溶骨病变和（或）骨质疏松为特征的肿瘤。白细胞介素-6（IL-6） 、肿瘤坏死因子 （TNF-）等细胞因子与骨髓瘤细胞的生长和存活有关1 。本研究观察了 79例 MM病人通过沙利度胺联合 VAD方案化疗前后血清 IL-6、TNF- 的水平的变化，以探讨其在 MM病程及预后判断中的意义。 1 对象与方法 1.1 研究对象 2003年 12月2008 年 6月在我院住院的初治 MM病人 79例，男 43例，女 36例；年龄 3581 岁，中位年龄 59.9岁。所有病人均经过外周血细胞计数、骨髓常规、骨骼 X线、免疫球

9、蛋白、尿轻链等指标的检测，诊断及分型符合张之南等2主编的血液病诊断及疗效标准 ；并按Durie-salmon（DS）分期法分期。其中 IgG型 38例，IgA 型 27例,轻链型 8例，不分泌型 6例；期 45例，期 25例，期 9例。对照组为30例健康查体者，男 18例，女 12例；年龄 3676 岁，中位年龄 62岁。均排除肿瘤、心脑血管疾病、肝肾疾病、糖尿病，均无吸烟嗜好。 1.2 实验方法 1.2.1 标本采集 空腹采集静脉血 5 mL,分离血清,置于-20 冰箱冻存待测。 1.2.2 血清 IL-6、TNF- 水平检测 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测。试剂盒由北京莱

10、博生物科技有限公司提供。试剂配制、样本处理及测定步骤均严格按照试剂盒说明书操作。 1.3 治疗方法 79例初治 MM病人均采用沙利度胺联合 VAD方案化疗。沙利度胺口服起始量 100200 mg/d，根据病人耐受情况每 2周增加剂量 200 mg/d直至 600 mg/d，每晚顿服或分早晚给药,并按此量维持治疗；同时联合标准VAD方案化疗，化疗 4疗程结束后评价疗效。评价疗效分为完全缓解（CR） 、部分缓解（PR） 、进步、无效（NR） 2 。 1.4 统计学处理 数据处理采用 PPMS 1.5统计软件3 ，两组样本均数比较采用 t检验，治疗前后比较采用配对 t检验；多组数据间比较采用方差分析

11、，组间两两比较采用 q检验。 2 结果 2.1 两组血清 IL-6、TNF- 水平检测 79例初诊 MM病人血清 IL-6、TNF- 水平均明显高于正常对照组,差异均有显著性（t=8.117，11.525，P0.001） 。见表 1。表 1 两组血清 IL-6、TNF- 测定结果比较（略） 2.2 不同临床分期 MM病人血清 IL-6、TNF- 水平比较 、期 MM病人的血清 IL-6、TNF- 水平均明显高于正常对照组，差异有显著性（F=7.033，13.172，q=2.91011.211,P0.05） ；、期 MM病人血清 IL-6、TNF- 水平明显高于期 MM病人（F=4.233、10

12、.273，q=3.0126.294,P0.05） 。见表 2。表 2 MM 病人不同临床分期血清 IL-6、TNF- 水平比较（略） 2.3 MM 病人治疗前、后血清 IL-6、TNF- 水平的变化 经治疗 79例 MM病人中有 14例达 CR，25 例 PR，16 例进步，24 例NR（包括 2例死亡病人） ，治疗有效率为 69.62%。55 例治疗有效组 MM病人与 24例治疗无效组在治疗前血清 IL-6、TNF- 水平差异无显著性（t=0.860、1.020,P0.05） 。治疗有效组治疗后血清 IL-6、TNF-水平与治疗前相比均明显下降，差异有显著意义（t=3.153、4.361,P

13、0.01） ；同时治疗后血清 IL-6、TNF- 水平与正常对照组比较，差异无显著意义（t=1.985、1.869，P0.05） 。22例治疗无效组病人治疗前、后血清 IL-6、TNF- 水平比较差异均无显著性（t=0.850、0.913，P0.05） 。见表 3。表 3 治疗有效与无效组 MM病人治疗前、后血清 IL-6、TNF- 水平比较（略） 3 讨论 MM是以骨髓克隆浆细胞增多为特征的 B细胞恶性血液疾病。IL-6 是具有多种效应的细胞因子，其既具有刺激肿瘤细胞生长的作用，又具有抗肿瘤作用。一方面，IL-6 是骨髓瘤细胞生长的重要因子，其可通过激活 Ras依赖的有丝分裂原活化的蛋白激酶

14、（MAPK）途径促进骨髓瘤细胞的增殖4 ，并抑制 MM细胞的凋亡；另一方面 IL-6可通过诱导 IL-2受体的表达和刺激 T淋巴细胞的增殖来增强细胞毒性 T细胞的细胞毒作用，通过促进自然杀伤（NK）细胞的增殖、上调其表面黏附分子的表达及拮抗转化生长因子 的抑制作用来增强 NK细胞的杀伤活性5 。所以，IL-6被认为是 MM发病中重要细胞因子。本文检测结果显示，初治 MM病人血清 IL-6 水平较正常对照组明显升高；不同临床分期的 MM病人血清IL-6水平差异也有显著性，临床分期越晚，血清 IL-6水平越高。MM 病人治疗有效组血清 IL-6水平在治疗后明显下降，而治疗无效组则其水平无明显变化，

15、这与文献报道的结果相符6 。DANKBAR 等7认为 MM病人过度表达的 IL-6是由骨髓瘤细胞自分泌或骨髓中基质细胞旁分泌产生。提示 IL-6增高与高肿瘤细胞负荷和病情活动有关；IL-6 水平升高预示疾病预后不良。因此，MM 病人血清 IL-6水平变化可以作为观察病情、治疗反应及判断预后的辅助指标。 TNF- 是一种多活性的细胞因子，当患有感染、创伤、烧伤、自身免疫性、某些肿瘤尤其是晚期肿瘤等疾病时，血清水平可有不同程度的增高，且 TNF- 参与机体的免疫、炎症等病理、生理过程的调节。本文结果显示，MM 初诊病人血清 TNF- 水平明显高于正常对照组，并与临床分期有关，治疗有效者血清 TNF

16、- 水平明显下降。MM 病人血清 TNF-水平增高的机制尚未明了，有学者认为 MM病人血清 TNF- 水平增高与肿瘤 B细胞以自分泌的方式产生 TNF- 有关8 ；DAVIES 等9研究表明，MM 的发生可能与 TNF基因启动子多态性有关。这表明 TNF- 可能参与了 MM 的发生，监测 MM病人血清 TNF- 水平也可作为判断 MM病人治疗效果的指标。 本文通过动态观察沙利度胺联合 VAD方案治疗 MM病人前、后血清IL-6、TNF- 水平的变化显示,治疗有效的 MM病人体内 IL-6、TNF- 水平明显降低，可能与以下因素有关：沙利度胺通过减少骨髓基质细胞IL-6 mRNA的表达来减少 I

17、L-6的分泌，且在体内直接抑制骨髓瘤细胞的生长10 ；化疗药物直接杀伤骨髓瘤细胞，使骨髓瘤细胞数目减少，IL-6、TNF- 的分泌减少；沙利度胺可以通过抑制骨髓瘤细胞血管内皮生长因子（VEGF）的过度分泌，阻断 IL-6与 VEGF之间的旁分泌环11 。治疗有效者在缓解期血清 IL-6、TNF- 水平仍略高于正常组，这说明缓解后体内仍可能残存部分恶性骨髓瘤细胞，这些残存的骨髓瘤细胞仍可释放 IL-6、INF-，同时残存的 IL-6、INF- 可能是导致 MM病人病情缓解后迅速复发的因素。因此，进一步研究 MM病人血清 IL-6、TNF- 水平有助于判断疾病的预后和转归，为调整治疗方案及预后判断

18、提供有力的依据。 总之， MM目前仍被认为是一种难以治愈的疾病。本文结果显示，血清 IL-6、TNF- 水平与 MM发病及病情变化有关；沙利度胺联合 VAD方案治疗有效 MM病人血清 IL-6、TNF- 水平可明显降低。因此，检测 MM病人血清 IL-6、TNF- 水平可有助于了解 MM病人的病情及预后。 【参考文献】 1KLEIN B, TARTE K, JOURDAN M, et al. Survival and proliferation factors of normal and malignant plasma cellsJ. Int J Hematol, 2003,78:106-1

19、13. 张之南,沈悌. 血液病诊断及疗效标准M. 第 2版.北京：科学技术出版社, 1998：373-379. 周晓彬,纪新强,徐莉. 医用统计学软件 PPMS 1.5的特点及其在医学科学研究中的应用J. 齐鲁医学杂志, 2009,24（1）:29-32. 4ATSUSHI O, DHARMINDER C, GERRARD T, et al. IL-6 treggers cell growth via the ras-dependent mitogen-activated protein kinase cascadeJ. J Immunol, 1997,159:2212-2221. 5HSIA

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22、s of tumor necrosis factor alpha and lymphotoxin alpha are associated with an increased risk of myeloma and have an improved progression-free survival after treatmentJ. J Clin Oncol, 2000,18:2843-2851. 10杨云,张王刚,陈银霞,等. 沙利度胺对多发性骨髓瘤病人细胞因子影响的临床研究J. 临床血液学杂志, 2007,20（5）:272-274. 11PODAR K, TAI Y T, DAVIES P E, et al. Vascular endothelial growth factor triggered signsling cascades mediating multiple myeloma cell growth and migrationJ. Blood, 2001,98:428-435.