升解通瘀颗粒主要药理作用的研究.doc

1、升解通瘀颗粒主要药理作用的研究【摘要】 目的 验证升解通瘀颗粒 “益气活血、解毒升清”的药理作用。方法 试验选择 SD 大鼠，建立大鼠血瘀症模型、心肌缺血模型。观察升解通瘀颗粒对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响；对心肌缺血模型动物 ST-T 位移变化和对肌酸激酶（CK） 、乳酸脱氢酶（LDH-L）含量的影响；以 ADP 为诱导剂,进行血小板聚集活性测定。结果 大鼠灌胃给予升解通瘀颗粒，对注射肾上腺素加冰水游泳造成的血瘀症有一定的改善作用，降低全血粘度，与模型组比较差异有显著性（P0.05） ，能够缓解垂体后叶引起的大鼠急性心肌缺血，减轻 S-T 段抬高程度、降低乳酸脱氢酶（LDH-L）的活性（

2、P0.05） ；可明显抑制 ADP 诱导的大鼠血小板聚集（P0.05） 。结论 升解通瘀颗粒对急性血瘀模型大鼠血液流变学有一定的改善作用，抑制血小板聚集率，对大鼠实验性急性心肌缺血有一定保护作用。 【关键词】 升解通瘀颗粒；大鼠血瘀症模型； 心肌缺血模型升解通瘀颗粒是以天麻、黄芪、党参、莪术、益母草等多味中药为主要成分，临床上用于寒热郁痰等血瘀所致胸中大气下陷，胸闷、胸痛、气短、乏力等症治疗的中药复方制剂。为验证其“益气活血, 解毒生清”的药理作用,我们以补心气口服液、复方丹参片为阳性对照药,选择 SD 大鼠，建立大鼠血瘀症模型、心肌缺血模型，观察生解通瘀颗粒对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响

3、；对心肌缺血模型动物 ST-T 位移变化和对肌酸激酶（CK） 、乳酸脱氢酶（LDH-L）含量的影响。试验结果如下。1 材料1.1 动物 大鼠：SD 品系 等级：SPF（清洁级）小鼠：ICR 品系 SPF（清洁级）由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。1.2 药物 升解通瘀颗粒 （浸膏粉） 含量：每 1g 浸膏粉相当5.556g 生药，产品批号：20050810，由中日友好医院提供；补心气口服液，产品批号：20050420，湖北福人金身药业有限公司；复方丹参片 产品批号：070503，北京大恒倍生制药厂有限公司。临用时均用去离子水配成所需浓度。1.3 仪器与试剂 仪器： LG-R-80 型血液

4、黏度仪，北京世帝科学仪器公司生产； LG-PABER 血小板聚集凝血因子分析仪，北京世帝科学仪器公司生产； Lisa 300 Dlus 全自动生化仪，法国制造 ；MEK-6318K全自动血球计数仪 、 ECG-9020K 型心电图机，日本光电工业株式会社。试剂：盐酸肾上腺素注射液，批号：05100141，北京市永康药业有限公司生产；垂体后叶注射液，批号：050903，上海第一生化药业有限公司；ADP 血小板聚集诱导剂，批号：050802，北京世帝科学仪器公司生产；肌酸激酶试剂盒（CK） ，批号：090281；乳酸脱氢酶试剂盒（LDH-L） ，批号：130031，北京中生生物工程高技术公司生产。

5、2 统计学方法以 SPSS 统计软件，进行统计学处理。实验结果用平均值标准差（xs ）表示，组间差异用 t 检验。3 试验方法3.1 升解通瘀颗粒对急性血瘀模型大鼠血液流变学的改善作用1取上述健康大鼠，按性别、体重随机分成 6 组（分组、给药剂量见表 1） ，每组 10 只。雌雄各半。口服灌胃给药，给药体积均为 1ml/100g体重；模型组、空白对照组给等体积去离子水。每日给药 1 次，连续给药 20 天。于给药的第 19 天，除空白对照组外，各组大鼠皮下注射肾上腺素 1.5mg/kg，共 2 次，每次间隔 4h，在第 1 次注射后 2h 将大鼠置冰水中浸泡 5min，造成大鼠血瘀症模型。试验

6、当日（给药第 20 天）各组大鼠于给药后 1h，自腹主动脉取血，以肝素抗凝制备抗凝血液，在 LG-R-80 型血液粘度仪上测定各组大鼠全血及血浆粘度，与模型组比较进行统计学计算。 3.2 升解通瘀颗粒对大鼠血小板聚集的影响2 选用健康 SD大鼠，按性别、体重随机分为 5 组（分组、给药剂量见表 2）,每组 10 只。雌雄各半。口服灌胃给药，给药体积均为 1ml/100g 体重；模型组、空白对照组给等体积去离子水。每日给药 1 次，连续给药 20 天。 于末次给药后 1h,大鼠腹主动脉取血, 3.28%枸橼酸钠抗凝（血与抗凝剂之比9：1） 。以 800r/min 离心 5min，制备富血小板血浆

7、（PRP） ，以3000r/min 离心 10min，制备贫血小板血浆（PPP）,血小板数调至2.51094.0109 个/L,以 ADP 为诱导剂，在 LG-PABER 血小板聚集凝血因子分析仪上测定 60、120、180、240 秒内血小板聚集百分率和血小板最大聚集率。按下列公式计算血小板聚集抑制百分率，与空白对照组比较进行统计学计算。 血小板聚集抑制率（%）= 对照组聚集%实验组聚集% 对照组聚集% 100%3.3 升解通瘀颗粒对大鼠急性心肌缺血的影响35 选用健康 SD 大鼠，按性别、体重随机分为 5 组（分组见表 3、给药剂量同试验3.1） ，每组 8 只。雌雄各半。口服灌胃给药，给

8、药体积均为 1ml/100g 体重；模型组、空白对照组给等体积去离子水。每日给药 1 次，连续给药10 天,于末次给药后 1h 用 20%乌拉坦腹腔麻醉大鼠，连接和记录标准导联心电图，然后经大鼠舌下静脉注射垂体后叶素 0.08U/kg，分别记录注射前和注射后 5s、15s、30s、2min、5min 、7min、9min 心电图，每个时间点测 5 个波型，取其平均值，观察 ST-T 段位移情况。其后从大鼠腹主静脉取血，在 Lisa 300 Dlus 全自动生化仪上测定血清肌酸激酶（CK） 、乳酸脱氢酶（LDH-L）含量，结果与模型组比较进行统计学计算。4 试验结果4.1 升解通瘀颗粒对急性血瘀

9、模型大鼠血液流变学的改善作用 试验结果表明：大鼠皮下注射肾上腺素及在冰水中游泳造成急性血瘀症模型。其模型稳定，大鼠血流呈、浓、凝状态，模型组动物全血粘度及血浆粘度与空白对照组相比差异有显著性（P0.05） 。升解通瘀颗粒给药组连续给药 20 天，在 26.02g 生药/kg 剂量下，降低 30s-1、1s-1 下的全血粘度，在 13.01g 生药/kg 剂量下降低 100s-1、30s-1 下的全血粘度，与模型组比较差异有显著性（P0.05） 。对血浆粘度未见明显影响。结果见表 1。 表 1 升解通瘀颗粒对血瘀症大鼠血液流变学的影响注：与模型对照组比较*P0.05， 与空白对照组比较P0.05

10、。4.2 升解通瘀颗粒对大鼠血小板聚集的影响 试验结果表明：大鼠灌胃升解通瘀颗粒 20 天后，在 26.02g 生药/kg 剂量对各时间点的血小板聚集率有明显影响，13.01g 生药/kg 剂量下对 60 秒、80 秒时间点有明显影响，同时对最大聚集率有明显影响，大、中、小剂量组的血小板最大聚集抑制率分别为 49.05%、41.56%、26.55%，说明升解通瘀颗粒对ADP 诱导的大鼠血小板聚集有一定的抑制作用。结果见表 2。4.3 对垂体后叶素引起大鼠急性心肌缺血模型的影响 试验结果表明：大鼠静脉注射垂体后叶素后，ST-T 均出现典型的改变：第一期，520s，T 波显著高耸，ST 段抬高；第

11、二期，30s 至数分钟，T 波降低、平坦、双相或倒置。大鼠灌胃升解通瘀颗粒 10 天后，在 26.02g 生药/kg、13.01g 生药/kg 剂量下对垂体后叶素引起的第一期 ST 段位移有一定的保护作用，可对抗 5s,15s 时点 ST-T 的抬高，与模型组比较差异有显著性（P0.05） 。结果见表 3。 表 2 升解通瘀颗粒对大鼠血小板聚集的影响注：与空白对照组比较* P0.05 表 3 升解通瘀颗粒对垂体后叶素所致大鼠心肌缺血的保护作用注：与模型对照组比较 *P0.05。大鼠灌胃升解通瘀颗粒 10 天后，在 26.02g 生药/kg、13.01g 生药/kg、6.51g 生药/kg 剂量

12、下对心肌缺血大鼠血清乳酸脱氢酶（LDH-L）活性升高有一定的降低作用，与模型组比较差异有显著性（P0.05） 。在 26.02g 生药/kg 剂量下对心肌缺血大鼠血清肌酸激酶（CK）活性亦有一定程度的降低，与模型组比较差异有显著性（P0.05） 。但在13.01g 生药/kg、6.51g 生药/kg 剂量下未见明显影响。结果见表 4。表 4 升解通瘀颗粒对模型大鼠血清肌酸激酶、乳酸脱氢酶活性的影响 注：与模型组比较*P0.05。5 小结升解通瘀颗粒是以天麻、黄芪、党参、莪术、柴胡、益母草等多味中药为主要成分，具有益气活血, 解毒生清等功效，临床上用于寒热郁痰等血瘀所致胸中大气下陷，胸闷、胸痛、

13、气短、乏力等症治疗的中药复方制剂。动物试验表明：升解通瘀颗粒具有一定的益气活血作用。（1）通瘀颗粒给药组连续给药 20 天，在 26.02g 生药/kg 剂量下，降低 30s-1、1s-1 下全血粘度，在 13.01g 生药/kg 剂量下降低 100s-1、30s-1 下全血粘度，与模型组比较差异有显著性（P0.05） 。对血浆粘度未见明显影响，与模型组比较差异有显著性（P0.05） 。提示本品对大鼠血流呈粘、浓、凝状态有一定的改善作用。（2）大鼠灌胃升解通瘀颗粒 20 天后，在 26.02g 生药/kg 剂量对各时间点的血小板聚集率有明显影响，13.01g 生药/kg 剂量下对 60 秒、8

14、0 秒时间点有明显影响，同时对最大聚集率有明显影响，大、中、小剂量组的血小板最大聚集抑制率分别为 49.05%、41.56%、26.55%，说明升解通瘀颗粒对 ADP 诱导的大鼠血小板聚集有一定的抑制作用。（3） 大鼠灌胃升解通瘀颗粒 10 天后，在 26.02g 生药/kg、13.01g 生药/kg 剂量下，对垂体后叶素引起的心肌缺血第一期 ST段位移有一定的保护作用，可对抗 5s,15s 时间点 ST-T 的抬高（P0.05） 。与模型组比较差异有显著性（P0.05） 。大鼠灌胃升解通瘀颗粒 10 天后，在 26.02g 生药/kg、13.01g 生药/kg、6.51g 生药/kg 剂量下

15、对心肌缺血大鼠血清乳酸脱氢酶（LDH-L）活性升高有一定的降低作用，与模型组比较差异有显著性（P0.05） 。在 26.02g 生药/kg 剂量下对心肌缺血大鼠血清肌酸激酶（CK）活性亦有一定程度的降低，但在 13.01g 生药/kg、6.51g 生药/kg 剂量下，未见明显影响，与模型组比较差异无显著性（P0.05） 。综上所述，升解通瘀颗粒具有一定益气活血、解毒升清的药理作用。与临床的药理作用相吻合。【参考文献】1 陈奇. 中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993，564-565.2 徐淑云，卞如濂，陈修.药理实验方法学，第 2 版.北京：人民卫生出版社，1991，1121-1123.3 李仪奎.中药药理实验方法.上海：上海科学技术出版社，1991,110-129.4 施新献.医学动物实验方法.北京：人民卫生出版社，1980,293-314. 5 高广猷，宋晓亮，叶丽红.山麦冬总氨基酸对大鼠实验性心肌缺血的保护作用.中国药理学通报，1993，6（4）：281-283.