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“双固一通”针法对糖尿病大鼠血清IL-6的影响.doc

1、“双固一通”针法对糖尿病大鼠血清 IL-6的影响【摘要】 目的 观测“双固一通”针刺法对糖尿病大鼠血清 IL-6 的影响。方法 180220 g Wistar 大鼠 73 只,13 只为正常对照(A 组),另60 只行链脲左菌素腹腔注射造模,造模成功的大鼠随机分为模型组(B 组)、“一通”治疗组(C 组)、 “双固一通”针刺治疗组(D 组)和常规针刺治疗组(E 组)。治疗 2 个疗程后运用放射免疫分析法检测各组血清白细胞介素-6(IL-6),运用血糖仪检测各组血糖。结果 C 组糖尿病大鼠血糖水平有降低趋势,IL-6 水平下降,但与模型组比较,差异无显著性意义(P0.05)。D 组和 E 组均明

2、显降低糖尿病大鼠的血糖水平(P0.05),使糖尿病大鼠升高的血清 IL-6 水平降低(P0.05),在降低 IL-6 水平方面,D 组效果更好(P0.05)。结论 “双固一通”针法使糖尿病大鼠升高的炎症细胞因子 IL-6 降低,这可能是其抑制糖尿病炎症反应、改善胰岛素抵抗、保护胰岛 细胞的功能并防治糖尿病血管并发症的重要机制之一。 【关键词】 实验性糖尿病;“双固一通”针法;白细胞介素-6;胰岛素抵抗Abstract:Objective To investigate the effect of “Shuangguyitong acupuncture therapy on serum inter

3、leukin-6 of streptozotocin (STZ) induced diabetic rats. Methods Among seventy-three 180220 g Wistar rats, thirteen were assigned as normal control group (group A) and sixty were induced diabetes by injecting STZ into celiac cavity. The diabetic rats were randomly divided into model group(group B), “

4、Yitong” treatment group (group C), “Shuangguyitong” acupuncture group (group D) and common acupuncture group (group E). After two courses of treatment, serum IL-6 was tested by radioimmunoassay (RIA) . The blood glucose was measured by sugar equipment. Results The high blood glucose of the diabetic

5、rats were lowered significantly in group D and E (P0.05). Group D had better effect on lowering IL-6 than group E (P0.05). Conclusion “Shuangguyitong” acupuncture therapy reduces the high level of inflammation cytokine IL-6, which can restrain the infammation reaction of the DM, improve insulin resi

6、stance condition and protect pancreas cells function.Key words:diabetes;acupuncture therapy;interleukin-6;insulin resistance炎症细胞因子白细胞介素-6(IL-6)参与糖尿病炎症反应,在糖尿病的发生发展过程中发挥重要作用,而 IL-6 通过瘦素(Leptin)与糖尿病的发生相关联。研究发现,IL-6 与 Leptin 有相同的信号传导通路,可能与Leptin 竞争信号传导和转录激活因子(STAT)结合位点,从而导致 Leptin不能发挥作用,形成 Leptin 抵抗。有证据

7、表明 Leptin 与胰岛素信号通路之间有交叉联系1-2,因而 Leptin 的外周组织效应可能与胰岛素抵抗有关。为观测“双固一通”针法对糖尿病大鼠血清 IL-6 的影响,探讨其对糖尿病炎症反应和胰岛素抵抗的影响机制,我们进行了以下研究。1 材料与方法1.1 糖尿病大鼠造模选择体重为 180220 g Wistar 大鼠 60 只(购于华中科技大学同济医学院实验动物中心),大鼠禁食 12 h 后,左下腹腔内注射链脲左菌素(STZ,用 pH 值为 4.2 的 0.1 mol/L 柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液,在冰浴中新鲜配制 10 mg/mL 的 STZ 溶液),剂量为 50 mg/kg 体重。72

8、h 后开始测血糖,凡血糖水平在 16.7 mmol/L 以上者列为糖尿病造模成功。随即进行分组和治疗。1.2 分组和治疗正常对照组(A 组)13 只。造模成功的糖尿病大鼠随机分为 4 组。模型组(B 组);“一通”针刺组(C 组):造模成功后,参照文献3取双侧“胰俞”,用普通 28 号 1 寸不锈钢毫针针刺,接 G6805-2 型电针治疗仪(双侧胰俞为一对电极);“双固一通”针刺治疗组(D 组):取“关元” 、双侧“后三里” 、 “胰俞”,“关元”,用普通 28 号 1 寸不锈钢毫针向上斜刺 0.20.3 mm,“后三里” 、 “胰俞”用普通 28 号 1 寸不锈钢毫针针刺,接 G6805-2

9、 型电针治疗仪(双侧足三里为一对电极,双侧“胰俞”一对电极);常规取穴针刺组(E 组):取双侧“曲池” 、 “肺俞” 、 “胰俞”,用普通28 号 1 寸不锈钢毫针针刺,接 G6805-2 型电针治疗仪,同侧“曲池” 、 “肺俞”为一对电极,双侧“胰俞”为一对电极。均选连续波,频率 100 Hz,强度以大鼠肢体轻微抖动为度,留针 15 min。对 C、D、E 组进行 2 个疗程的治疗,每个疗程 6 d,疗程间隔 2 d。造模及治疗过程中,因高血糖等原因 B 组死亡 4 只、C 组 3 只、D 组 3 只、E 组 2 只,溶血样本除外,检测样本数如表 1 中所示。1.3 观测指标血糖采用美国 L

10、ifescan 公司生产的 Surestep 血糖仪及其配套试纸条测试。摘取眼球取血 2 mL 于干燥的试管中,室温放置 30 min,3 500 r/min 离心 15 min,取血清检测 IL-6。采用放射免疫分析法(RIA),放免试剂盒(IL-6 RIA KIT:125I-IL-6)购自海军放免技术中心,具体步骤按照放免试剂盒说明书操作。在华中科技大学同济医学院附属协和医院同位素室检测,运用 SN-695B 型智能放免 测量仪(上海原子核研究所日环仪器一厂生产)。1.4 统计学方法计量资料均采用 xs 表示,数据运用 SPSS10.0 统计软件进行处理,组间比较运用单因素方差分析(ONE

11、-ANOVA,显著水平设为 0.05)。2 结果(见表 1)表 1 各组大鼠治疗前后血糖及血清 IL-6 水平变化(略)注:与 A 组比较,P0.05;与 B 组比较,P0.05;与 C 组比较,P0.05,与 D 组比较,#P0.05。3 讨论近年来,糖尿病的炎症学说备受推崇,认为糖尿病是一种自然免疫和低度炎症性疾病。IL-6 参与炎症反应,在糖尿病的发生发展过程中发挥重要作用,其具体病理机制可概括为两方面。一方面,升高的 IL-6 可能通过抑制胰岛素信号传导阻碍胰岛素的作用。在体研究发现,过多的 IL-6 选择性地损害肝脏胰岛素信号,IL-6 在肝脏胰岛素抵抗中起作用4。慢性IL-6 灌注

12、导致肝脏中 STAT3 磷酸化增多,减少了肝脏中胰岛素受体自身磷酸化和 IRS-1、IRS-2 的酪氨酸磷酸化,胰岛素耐受试验显示胰岛素敏感性降低5。IL-6 处理的脂肪细胞中,IR- 亚单位和 IRS-1 蛋白表达减少,胰岛素所致的 IR-、Akt/PKB 和 ERK1/2 的激活受到抑制,并且,IL-6抑制胰岛素所致的脂肪生成和葡萄糖转运,伴随 GLUT4 表达下降。IL-6 还可导致胰岛素信号的抑制因子 SOCS-3 的表达6。IL-6 抑制胰岛素信号导致多种组织器官的胰岛素抵抗,使胰岛素不能发挥正常功能,同样阻碍胰岛素的抗炎效应,反过来加重炎症。另一方面,IL-6 的细胞毒作用引起胰岛

13、 细胞死亡,导致胰岛素合成和分泌障碍,使糖尿病处于恶性循环状态。IL-6 受血糖的调节,高血糖时可促进胰岛细胞分泌 IL-6,而 IL-6 可促进 细胞分化,产生大量 IgG,进而促进杀伤性 T 淋巴细胞克隆的过度激活,此作用与其他细胞因子和效应分子产生的细胞毒作用共同引起 细胞死亡7。中医针灸“治未病”以正气为本,固护先天和后天是其基础和关键,通过“治”达到“防”的目的,以疗疾防变、调节机能。 “双固”即固护人体先天之本和后天之本,“一通”即通泻病邪。足三里为胃经合穴,胃腑之下合穴,针之可调理脾胃,补益气血生化之源,固护后天之本;关元为任脉腧穴,也是足三阴经与任脉交会穴,为元阴、元阳关藏出入

14、之所,针之可益精补气,扶助人体先天之本。足三里、关元配合,兼顾先天和后天,补益正气,再与治疗消渴的效穴胰俞相配伍,则可达到以治为防、防微杜渐的目的。 “双固一通”针法可显著降低糖尿病大鼠血浆 IL-6 水平,减轻IL-6 参与的炎症反应,则至少可能从以下两个方面阻遏糖尿病的进展:缓解 IL-6 对胰岛素信号的抑制作用,改善肝脏、脂肪等多个器官组织的胰岛素抵抗状态;减轻 IL-6 及其相关效应分子对胰岛 细胞的细胞毒作用,阻止剩余的有限 细胞继续受损死亡的恶性循环。针刺的这种效应可能与改善糖尿病大鼠的高血糖状态有关,是血糖的降低使 IL-6 的分泌减少,则改善胰岛素信号传导使葡萄糖利用增强,血糖

15、进一步下降,抑或 IL-6 水平降低在先而血糖下降在后,还是效应同时发生?这些还需要更深层次的研究探讨。“双固一通”针法使糖尿病大鼠升高的炎症细胞因子 IL-6 降低,可能是其抑制糖尿病炎症反应、改善胰岛素抵抗、保护胰岛 细胞功能并防治糖尿病血管并发症的重要机制之一。【参考文献】1 Szanto I, Kahn CR. Selective interaction between leptin and insulin signaling pathways in a hepatic cell lineJ. Proc Natl Acad Sci USA,2000,97(5):23552360.2 K

16、im YB, Uotani S, Pierroz DD, et al. In vivo administration of leptin activates signal transduction directly in insulin-sensitive tissues:overlapping but distinct pathways from insulinJ. Endocrinology,2000,141(7):23282339.3 华兴邦,周浩良.大鼠穴位图谱的研制J.实验动物与动物实验, 1991,3(1):15.4 Dandona P, Aljada A, Bandyopadhy

17、ay A. Inflammation: the link between insulin resistance, obesity and diabetesJ.Trends Immunol,2004,25(1):47.5 Aso Y, Okumura K, Yoshida N, et al. Plasma interleukin-6 is associated with coagulation in poorly controlled patients with Type 2 diabetesJ.Diabet Med,2003,20(11):930934.6 Lagathu C, Bastard

18、 JP, Auclair M, et al. Chronic interleukin-6 (IL-6) treatment increased IL-6 secretion and induced insulin resistance in adipocyte: prevention by rosiglitazoneJ. Biochem Biophys Res Commun,2003,311(2):372379.7 Esposito K, Nappo F, Marfella R, et al. Inflammation cytokine concentration are acutely increased by hyperglycemia in human:role of oxidative stressJ.Circulation,2002,106(16):20672072.

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