“通督调神固本”电针法对血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力和血浆内皮素含量的影响.doc

1、“通督调神固本”电针法对血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力和血浆内皮素含量的影响作者：邵瑛， 宫育卓， 唐纯志， 赖新生 【摘要】 【目的】观察“通督调神固本”电针法对血管性痴呆（）模型大鼠学习记忆能力和血浆内皮素（）含量的影响。 【方法】将成年健康大鼠（级）随机分为假手术组只、电针组只（电针治疗，取百会、大椎、脾俞、肾俞穴） 、西药组只（尼莫通治疗，剂量为 12mg/kg）和模型组只（不作治疗） 。采用改良的四血管阻断法复制模型,Morris 水迷宫法测定大鼠学习记忆能力，放射免疫法测定血浆含量。 【结果】模型大鼠血浆含量显著性升高（.） ，其学习记忆能力表现出明显的障碍，在水迷宫实验中，其逃避

2、潜伏期显著性延长（.） ，在原平台象限跨越平台次数与其他个象限比较无显著性差异（.） 。而电针组、西药组大鼠逃避潜伏期显著性缩短（.） ，相同时间内跨越原平台次数显著性多于其他个象限（.） ，并可使血浆含量显著性降低（.） ，与假手术组比较无显著性差异（.） 。【结论】 “通督调神固本”电针法治疗的作用可能与其调节血浆含量，有效提高大鼠学习记忆能力有关。 【关键词】 血管性痴呆针灸疗法； 内皮素血液； 通督调神固本；疾病模型，动物； 大鼠 针灸治疗血管性痴呆（vascular dementia,VD）具有多系统、多水平、多层次、多靶点的特点。本课题组在长期的临床和科研实践中，总结出“通督调神固

3、本”之法，选取精而少的穴位（百会、大椎、脾俞、肾俞）治疗，取得了肯定的临床疗效 ，并通过对氧自由基、脑神经递质及脑细胞超微结构等的观察加以证实- 。大量的临床和实验研究表明，内皮素（endothelin,ET）不仅可促使脑缺血的进一步加重，并通过脑神经元或胶质细胞的直接影响参与发生和发展的全过程- 。本文观察了“通督调神固本”电针法治疗对痴呆大鼠血浆含量及学习记忆能力的影响，为探讨针灸治疗和对脑细胞保护作用的机理提供实验依据。现报道如下。 1 材料与方法 1.1 动物、分组与造模 成年雄性健康大鼠（级）只，体质量 180220g，由广州中医药大学实验动物中心提供实验动物许可证号：（粤）-；使用

4、实验动物质量合格证编号： 。随机抽取只大鼠作假手术对照组，其他只均采用改良的四血管阻断法7复制模型。术后 7d 存活并无肢体残疾的大鼠只，将其随机分为电针组只、西药组只和模型组只。假手术组只全部存活。实验动物均按常规饲养。 1.2 主要仪器 -双极射频电凝器（上海手术器械厂） ；Morris 水迷宫（广州中医药大学实验动物中心提供） ；-型治疗仪（中国青岛华声仪器厂） ；次性无菌针灸针（苏州天一针灸器械有限公司） ；-型放免 测量仪（上海核仪器一厂） 。 1.3 治疗方法 电针组采用号 25mm 毫针，参考实验针灸学 取穴，于模型大鼠头部百会穴（顶骨正中）斜刺mm，大椎穴（第颈椎下） 、脾俞穴

5、（第胸椎下两旁肋间）和肾俞穴（第腰椎下两旁）各直刺mm，连接电针仪，施以连续波，频率 150Hz，强度以大鼠安静耐受为度（约mA） ，每天电针次，留针min；西药组给予尼莫通（拜耳医药保健有限公司生产，批号：） ，按 12mgkg 灌胃，每日次；模型组给予生理盐水，按mL/kg 灌胃，每日次。各组均连续治疗d。假手术组在同等条件下饲养，未予任何治疗。 1.4 检测方法 1.4.1 行为学观测 治疗结束后开始水迷宫检测 。水迷宫内水深cm，水温26。在水池壁标明个入水点，由此将水池等分为个象限（，） ，任选一象限正中放置平台，没于水下cm，水面覆盖塑料泡沫。定位航行试验：将受试大鼠按顺时针方向依

6、次由，个入水点面向池壁放入水中。记录min 内寻找平台的时间（逃避潜伏期，escape latency） 。如果大鼠在min 内找到平台，记录其实际逃避潜伏期；如果在min 内未找到平台，由试验者将其引上平台并停留s，逃避潜伏期记为min。历时 6d，每天次。空间探索试验（spatial probetest）：定位航行试验结束后撤出平台，然后任选一相同入水点将大鼠放入水中，测其min 内跨原平台及其他个象限相应平台位置的次数。 1.4. 血浆含量测定 各组大鼠于水迷宫检测后取样，眼眶采血，每 mL 加入.mol/抗凝剂乙二胺四乙酸二钠（EDTA Na2+）2L 和抑肽酶kU，温度下立即离心，

7、r/min 离心15min，取上清液低温保存，采用放射免疫法（）测定，在广州中医药大学核医学中心测试，操作按照试剂盒说明进行（放免试剂盒由解放军总医院放免所提供，批号：） 。 1.5 统计学方法 采用 . for windows 统计软件。 2 结果 2.1 各组对大鼠学习巩固和再现能力的影响 结果见表、表。表结果显示，模型组大鼠平均逃避潜伏期显著性延长（.） ；电针组及西药组可显著性缩短逃避潜伏期（.） ，与假手术组水平相仿（.） 。表结果显示，假手术组、电针组和西药组大鼠在原平台象限跨相应平台次数显著性多于其他个象限（.） 。模型组在原平台象限跨越相应平台次数与其他个象限的跨越次数比较无显

8、著性差异（.） 。各组大鼠在原平台象限跨越相应平台次数比较，模型组显著性少于假手术组（.） ，而电针组、西药组跨越原平台象限次数显著性增加（与模型组比较，.） ，与假手术组比较无显著性差异（.） 。表明模型组大鼠学习获取能力较差，电针和尼莫通均可改善模型大鼠的学习巩固和再现能力。 2.2 各组对大鼠血浆含量的影响 表结果显示，模型组大鼠的血浆含量显著高于假手术组（.） ，而西药组、电针组可显著降低血浆含量（.） ，与假手术组比较差异无显著性意义（.） 。 表 1 各组大鼠平均逃避潜伏期比较（略） Table 1 Comparison of escape latency in various g

9、roups（略）统计方法：t 检验；.，与假手术组比较；.，与模型组比较 表 2 各组大鼠跨越原平台及其他个象限相应平台位置的次数比较（略） Table Comparison of frequency of rats passing through the platform in the original and other 3 platform quadrants 统计方法：t 检验；.，与假手术组比较；.，与模型组比较；.，与同组原平台象限比较 表 3 各组大鼠血浆含量比较（略） Table 3 Comparison of plasma ET content in various grou

10、ps 统计方法：方差分析；.，与假手术组比较；.，与模型组比较 3 讨论 血管性痴呆属于中医“呆病”范畴。 医林改错指出：“高年无记性者，脑髓渐空” 。脑为髓之海，其输上在于盖，即“百会” ，百会为“三阳五会” ，位居巅顶，针刺此穴可醒脑益智、开窍醒神。 “大椎”乃“诸阳之会” ，为手足三阳经之脉气交会的集中点。督脉为阳脉之海，入属于脑，故电针此二穴，可达疏通气血、通调督脉、醒脑开窍、益智复聪之功，称为“通督调神” 。中医认为本病的病因病机为“虚、痰、瘀”相互转化，即肾虚、痰瘀相互影响，互为因果，其病机为本虚标实，以精气亏虚为本，痰热瘀血为标 。历代医家也十分强调精、气、血不足以及肾虚髓空在痴

11、呆发病中的作用。因此我们以中医整体观为指导，选择针灸治疗，在选取督脉之“百会” 、 “大椎”的基础上，配肾俞、脾俞，称之为“通督调神固本” 。肾俞调补肾虚，脾俞健脾化痰，针刺此二穴既补先天之肾虚，又健后天之脾弱。诸穴合用，既养血活血，又行气化瘀，从而养血生精、藏精生髓、填髓充脑、安神健脑，使脑髓得以荣养而复聪。 是作用最强的缩血管物质，也是一种神经介质。在急性脑血管病中，患者血浆含量明显升高。收缩血管，使血压升高，维持缺血缺氧脑组织的灌注压，是机体的一种保护性反应 。但使血管持续性收缩，加重脑缺血，并作用于神经细胞，使神经细胞钙超载，产生自由基，进一步加重脑损害 。众多研究表明，在病理情况下是

12、一种有害介质，其升高只能使病情恶化，而无助于病变的恢复和修复- 。因此，拮抗的产生，有利于的治疗和康复。本研究观察发现，大鼠血浆显著性升高，而经电针治疗后，含量显著降低，大鼠学习记忆能力也明显增强，其作用与尼莫通相仿。 本实验研究表明，以“通督调神固本”为法则的电针疗法，可调节模型大鼠异常升高的血浆含量，拮抗对脑组织的进一步损害，从而改善大鼠的学习记忆能力。 【参考文献】 赖新生，莫飞智，马朝笃，等电针对实验性血管性痴呆模型大鼠学习记忆的影响 针刺研究，（）： 赖新生，王黎电针对血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力和脑组织细胞凋亡的影响 针刺研究，（）： 王黎，赖新生，雷娓娓电针对脑缺血大鼠学习记忆

13、能力和海马神经元超微结构的影响 中国针灸，： 赖新生，王黎，江雪华，等电针对实验性血管性痴呆模型大鼠学习记忆及和的影响 中国针灸，（）： 高唱，王景周，王琳，等血管性痴呆患者血浆内皮素测定的临床价值 中国行为医学杂志，（）： 闵连秋，宋利春，刘兴仁，等急性脑梗塞患者血浆内皮素含量变化及其临床意义 中国危重病学急救医学，（）： Yan Bing,He Lilei,Xu Nenggui,et alInfluences of electro-acupuncture on learning and memory abilities and ultrastructure of gray type I s

14、ynapse in CA3 sector of the hippocampus in vascular dementia rats Chinese Journal of Clinical Rehabilitation,2006,10（39）：42 李忠仁实验针灸学 北京：中国中医药出版社，： Morris R.Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat J Neurosci Methods，（）： 王永炎，张伯礼血管性痴呆现代中医临床与研究 北京：人民卫生出版社，： Drisco

15、ll I,Hong N S,Craig L A,et alEnhanced cell death and learning deficits after a mini-stroke in aged hippocampus J/OL.Neurobiol Aging，20072007-06-08.http:/www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed. Weeraratna A T,Kalehua A,Deleon I,et al.Alterations in immunological and neurological gene expression patterns in Alzheimers disease tissues Exp Cell Res,2007,313（3）：450 Tong X K,Nicolakakis N,Kocharyan A,et alVascular remodeling versus amyloid beta-induced oxidative stress in the cerebrovascular dysfunctions associated with Alzheimers disease J Neurosci,2005,25（48）：11165