SD大鼠及beagle犬肾组织形态参数研究.doc

1、SD 大鼠及 beagle 犬肾组织形态参数研究作者：徐勤 沈逸萍 苏俊芳 罗振亮 许安丽 【关键词】 肾小球病理学；,毒理学；,犬；,大鼠 摘要：【目的】了解 SD 大鼠及 beagle 犬肾组织学参数，为肾毒理病理诊断提供组织学判断依据。 【方法】以 40 只成年 SD 大鼠及 20 只成年 beagle 犬为研究对象，雌雄各半，大鼠在 12 周龄处死，beagle 犬在12 月龄时处死。以体积分数为 10%中性福尔马林固定肾脏，石蜡包埋，5?m 切片，苏木素-伊红(HE)染色。以 Spot Advanced 图像分析软件测量犬和大鼠皮质及近髓肾单位、肾小球长径、短径及平均直径，同时比较种

2、属间及不同性别动物之间的区别。 【结果】beagle 犬皮质肾单位肾小球长径大约为 96?m，短径大约为 76?m；近髓肾单位肾小球长径约为120?m，短径约为 94?m，雌雄犬无显著性差异，但近髓肾单位长径、短径均大于皮质肾单位长径及短径。SD 大鼠皮质肾单位肾小球长径约为87?m，短径约为 64?m，近髓肾单位肾小球长径约为 88?m，短径约为 64?m，雌雄大鼠间无显著性差异，皮质及近髓肾单位肾小球长、短径亦无显著性差异。beagle 犬组的皮质和近髓肾单位的长、短径均大于SD 大鼠组(P005 或 P001)。 【结论】beagle 犬近髓肾单位大于皮质肾单位，而 SD 大鼠近髓肾单位

3、及皮质肾单位大小无显著性差异；beagle 犬肾小球较 SD 大鼠肾小球稍大，性别对 beagle 犬及 SD 大鼠肾小球大小无影响。 关键词：肾小球病理学； 毒理学； 犬； 大鼠 肝肾是药物毒性作用最常见的靶器官 ，目前肾毒性作用的判断主要依靠尿、血液学及病理形态观察 ，当尿及血液学未出现改变，或尿及血液学检测不准确、或不能反映肾损伤时，则肾毒性的判断必须依靠病理检查。在病理检查时，毒理病理工作者对肾小管变性、坏死、管型出现较易辨认，而对肾小球的病变判断较为困难，尤其是镜下判断肾小球大小是否改变，往往缺乏客观依据。为了给病理工作者在做药物毒性试验时判断肾小球是否增大提供基本组织学依据，本文以

4、成年 SD 大鼠及 beagle 犬为研究对象，结合计算机图像分析技术，测量beagle 犬及 SD 大鼠皮质及近髓肾单位肾小球长径及短径，比较犬及大鼠近髓肾单位及皮质肾单位肾小球大小，以及观察性别对肾小球大小的影响。现报告如下。 1 材料与方法 11 动物 beagle 犬 20 只，12 个月，雌雄各半，来源于顺德实验动物研究所(合格证号为 2003B023)；SD 大鼠 40 只，12 周，雌雄各半，来源于广东省医学实验动物中心(合格证号为 2004A021)。 12 主要试剂与仪器 苏木精(Sigma 公司)；伊红(Sigma 公司)；脱水机(LeicaTP1020)；切片机(Leic

5、aRM2135)；包埋机(LeicaEG1160)；OlympusBX41 显微镜(Olympus 公司)；CoolSNAP 专业数码摄影装置(SCIENTIFIC 公司)；Spot Advanced 图像分析软件(Silicon Graphic 公司)。 13 取材与制片 以 20?g/L 戊巴比妥钠麻醉加颈动脉放血处死beagle 犬，以乙醚麻醉加腹主动脉放血处死 SD 大鼠，体积分数为 10%中性福尔马林固定肾脏，石蜡包埋，5?m 连续切片，苏木素-伊红(HE)染色。 14 组织测量 利用 CoolSNAP 显微数码摄像机进行图像采集，Spot Advanced 软件进行图像分析、测量。

6、分别测量皮质、近髓肾单位肾小球长径、短径。 2 结果 21 SD 大鼠肾小球形态参数测量结果 表 1 结果显示，SD 大鼠近髓肾单位及皮质肾单位的肾小球大小在雌、雄性间比较差异无统计学意义(均 P005)。同性别大鼠皮质肾单位肾小球的长径和短径分别与近髓肾单位肾小球的长径和短径相比差异均无统计学意义。 22 Beagle 犬肾小球形态参数测量结果 表 2 结果显示，Beagle 犬近髓肾单位肾小球及皮质肾单位肾小球大小在不同性别间差异无统计学意义。而同性别 beagle 犬的皮质肾单位肾小球与近髓肾单位肾小球比较，近髓肾单位肾小球的长径和短径均分别大于皮质肾单位肾小球的长径和短径。 23 SD

7、 大鼠及 beagle 犬肾组织形态参数比较 表 3 显示 beagle 犬皮质肾单位及近髓肾单位的肾小球均大于 SD 大鼠相应的肾小球。表 1 SD 大鼠肾小球形态参数表 2 Beagle 犬肾小球形态参数 表 3 Beagle 犬及 SD 大鼠肾小球形态参数比较 3 讨论 药物对肾组织的毒性作用，常见的有肾小管损伤、肾间质及肾小球损伤 。其中肾小球是否损伤较难判断，特别是近髓肾单位肾小球大小和皮质肾单位肾小球大小有无区别，雌雄动物间肾小球大小有无区别，目前仍不清楚，因此给药物肾毒性的判断增加了难度。目前计算机图像分析技术的出现，为肾组织基本参数的测量提供了技术上的可能性。 本文以 beag

8、le 犬及 SD 大鼠为研究对象，以计算机图像分析技术对雌雄性动物皮质肾单位及近髓肾单位肾小球的长、短径进行了测量，结果显示两种动物的肾小球大小在不同性别间均无显著性差异(P005)，在同性别的皮质肾单位和近髓肾单位之间，SD 大鼠差异无显著性(P005)，其肾小球的长径约为 88?m，短径约为 64?m；而 beagle 犬的近髓肾单位肾小球(长径约为 120?m，短径约为 94?m)却大于皮质肾单位肾小球(长径约 96?m，短径约 76?m)，差别具有高度显著性意义(P001)。 Beagle 犬皮质肾单位肾小球长、短径均大于 SD 大鼠，但不超过20%；髓质肾单位肾小球长、短径也大于 S

9、D 大鼠，但也不超过 50%。显示肾小球大小在不同体型的动物中有所不同，但并不随着体型增大而增加。因此，在判断肾小球毒性作用时，应注意和对照组比较肾小球大小，注意肾小球有无增大或萎缩。对 beagle 犬要同时注意皮质肾单位肾小球和近髓肾单位肾小球大小变化，若近髓肾单位肾小球大小与皮质肾单位肾小球大小一致，需注意区分是皮质肾单位肾小球肥大，还是近髓肾单位肾小球萎缩。 参考文献： Minami M，Ishiyama A，Takagi M，et alEffects of allopurinol，a xanthine oxidase inhibitor，on renal injury in hype

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