1、电刺激参数对坐骨神经干兴奋性的影响【摘要】 目的 研究电刺激对坐骨神经干兴奋性的影响。方法 用不同的电刺激参数刺激坐骨神经干,测定引起的动作电位的幅度和传导速度分别衰减 20以及潜伏期延长 20时所需的时间。结果 随着刺激强度、频率和波宽的增大,动作电位的幅度和传导速度衰减 20以及潜伏期延长 20时所需的时间明显缩短。结论 高强度、长时间、快速反复的电刺激将使神经纤维兴奋性降低。 【关键词】 坐骨神经;动作电位;传导速度; 兴奋性;潜伏期 神经干动作电位(action potential,AP)的幅度、传导速度和潜伏期是反映神经干兴奋性的主要指标。电刺激是电生理实验中使用最多的刺激方式,选择
2、合适的电刺激参数如强度、频率、波宽(持续刺激时间)对保持坐骨神经干的兴奋性尤为重要。本研究观察电刺激参数如强度、频率和波宽对坐骨神经干兴奋性主要指标动作电位的幅度、传导速度和潜伏期的影响。 1 材料和方法 1.1 仪器、试剂和实验动物 SBR-1 型双线示波器(汕头超声电子仪器厂) ,FZG-1A 型直流前置放大器(南京电生理仪器厂) , JDC-多用隔离刺激器(开封市华中电子仪器厂) ,自制的屏蔽装置。试剂为按照SOP 配制的任氏液。实验动物经检验为清洁健康的雄性、体重 100 g 左右的蟾蜍,由徐州医学院实验动物中心提供。 1.2 方法 1.2.1 蟾蜍坐骨神经标本的制备 按照周希平1 、
3、周华等2 和高兴亚3介绍的方法制备蟾蜍坐骨神经标本。需要注意的是神经干应尽可能分离得长(上起脊椎处的主干,下沿腓总神经与胫神经一直分离至踝关节附近) ,腓总神经和胫神经均应保留;在制备蟾蜍坐骨神经标本过程中应尽量少损伤神经,以确保神经标本的兴奋性。 1.2.2 实验过程 利用上述电生理仪器和自制的屏蔽装置,通过改变电刺激的强度、频率和波宽,当神经干兴奋性的主要指标 AP 的幅度和传导速度分别衰减 20以及 AP 的潜伏期延长 20时,测定其所需的时间。 1.2.3 自制的屏蔽装置和连接 见图 1。 1.2.4 AP 的传导速度测定4 测量 A、 C 之间的距离差 S, 再求出 A 通道和 B
4、通道 2 个 AP 起始点图 1 自制的屏蔽装置和连接示意图 的时间差 t,按公式 V= S/t(m/s),计算出 AP 的传导速度 V。 1.3 统计学处理 实验数据采用s 表示,数据分析采用 Prism 4.0 统计软件。多组间的比较采用单因素方差分析,两组间的比较采用 t检验。P0.05 为差异有显著性。 2 结 果 2.1 A、B 两个通道引导的神经干双相动作电位(AP) A 通道引导的 AP 在前,B 通道引导的 AP 滞后;APB 的潜伏期大于 APA 的潜伏期;2个通道引导到的 AP 波形相似。 2.2 电刺激的强度对坐骨神经干兴奋性主要指标的影响 在频率为100 Hz、波宽为
5、0.5 ms、极性为正极性情况下,电刺激的强度对坐骨神经干兴奋性主要指标的影响见表 1。 2.3 电刺激的频率对坐骨神经干兴奋性主要指标的影响 在强度为2 V、波宽为 0.5 ms、极性为正极性情况下,电刺激的频率对坐骨神经干兴奋性主要指标的影响见表 2。 2.4 电刺激的波宽对坐骨神经干兴奋性主要指标的影响 在强度为2 V、频率为 100 Hz、极性为正极性情况下,电刺激的频率对坐骨神经干兴奋性主要指标的影响见表 3。表 1 电刺激的强度对兴奋性主要指标的影响表 2 电刺激的频率对兴奋性主要指标的影响表 3 电刺激的波宽对兴奋性主要指标的影响 3 讨 论 电刺激强度由 1 V 增加到 2 V
6、 时,所产生的动作电位幅度和传导速度分别衰减 20以及潜伏期延长 20时所需的时间变化不明显;当强度由 2 V 增加到 3 V 时,该时间缩短;当强度由 3 V 增加到 6 V 时,该时间明显缩短。这是因为随着电刺激强度的增大,电刺激引起神经干(特别是粗纤维)的电化学损伤增大,兴奋性降低5 。 电刺激频率由 50 Hz 增加到 100 Hz 时,所产生的神经干动作电位幅度和传导速度分别衰减 20以及潜伏期延长 20时所需的时间无明显变化;在电刺激频率由 100 Hz 增加到 500 Hz 时,该时间缩短; 当频率由500 Hz 增加到 2 000 Hz 时,该时间明显缩短。理论上讲,神经纤维具
7、有相对不疲劳性、AP 的大小接近于 Na+平衡电位、绝对不应期为 1 ms。随着电刺激频率的增加,特别是当频率超过 1 000 Hz 时,虽然产生的神经干动作电位的数量不再增多,但是反映坐骨神经干兴奋性的主要指标将发生明显地改变。这可能是因为相对离体坐骨神经干而言,由于坐骨神经干所处的外环境、能量供给等因素发生了改变,快速反复地刺激引起神经干疲劳,导致神经干的兴奋性降低6 。 随着电刺激波宽的增加,所产生的 AP 幅度和传导速度分别衰减 20以及潜伏期延长 20时所需的时间缩短明显。这是因为电化学损伤与持续刺激时间成正比,较长时间的持续电刺激引起神经干的电化学损伤程度快速增加,使其兴奋性降低7
8、 。 总之,在电刺激蟾蜍坐骨神经干时,应避免使用高强度(电压3 V) 、长时间(波宽 2 ms)和高频率(频率500 Hz)的刺激,以保护其兴奋性。 【参考文献】 1 周希平. 神经干动作电位引导、兴奋传导速度及不应期的测定M/谢可鸣,周希平,茅彩萍,等. 机能学实验苏州:苏州大学出版社,2005:94-98 2 周 华,郑 煜,张承武 .神经干动作电位引导、兴奋传导速度及不应期的测定M/杨芳炬机能学实验成都:四川大学出版社,2003:78-80 3 高兴亚. 神经干动作电位引导、兴奋传导速度及不应期的测定M/高兴亚,汪 晖,戚晓红,等机能实验学第 2 版北京:科学出版社,2004:101-1
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