1、电针在应激大鼠胃粘膜保护作用中对氧自由基和前列腺素的影响作者:秦明,黄裕新,王景杰,赵保民,高巍,王庆莉 【关键词】 电针 关键词: 电针;胃粘膜;氧自由基;前列腺素 摘 要:目的 观察电针对应激大鼠血浆超氧化物岐化酶(SOD) 、丙二醛(MDA)和前列腺素 E2 (PGE2 )的影响,以探讨电针对胃粘膜保护作用的机制. 方法 将 72 只大鼠平均分为空白对照组,应激组和电针组,每组再按实验时间 1,3 和 5d 平均分为 3 小组(每小组 8 只).利用生化法和放免分析法测定各组大鼠血浆 SOD,MDA 和 PGE2 含量并计算各组溃疡指数(UI). 结果 应激组较空白对照组大鼠血浆 SOD
2、 明显下降(17.02.9)mol L-1 (11.93.4)mol L-1 ,MDA 明显上升(4.852.38)mol L-1 (7.562.48)mol L-1 ,PGE2 明显下降(2.740.77)ng L-1 (1.540.25)ng L-1 ,P0.05.UI 明显上升(1.10.4)(28.04.1) ,P0.01.电针组较应激组血浆SOD 明显上升(11.93.4)mol L-1 (17.74.8)mol L-1 ,MDA 明显下降(7.562.48)mol L-1 (4.141.78)mol L-1 ;PGE2 明显上升( 1.540.25)ng L-1 (3.210.38
3、)ng L-1 ;UI 明显下降(28.04.1)(19.02.3) ,P0.01.电针组 PGE2 实验 5d组较实验 1d 组明显上升(3.210.38)ng L-1 (4.521.06)ng L-1 ,P0.05. 结论 电针对胃粘膜的损伤具有保护作用,其机制与其影响氧自由基代谢和前列腺素水平有关.电针对 PGE2 的调节与针刺时间有关. Keywords:electroacupuncture;gastric mucosa;oxygen free radicals;prostaglandin Abstract:AIM To study the effect of electroacupu
4、ncture(EA)on plasma superoxide dismutase(SOD) ,malondialde-hyde(MDA)and prostaglandin E2 (PGE2 )in stress rats.METHODS 72SD rats were randomly divided into3groups:control group,stress group and EA group;each group was divided into3small groups by1,3,5d test time.The plasma levels of SOD and MDA were
5、 measured by bio-chemical methods and the levels of PGE2 by radioim-munoassay methods.The extent of gastric mucosal damage was evaluated by ulcer index(UI) ,according to the Guth ex-ponential method.RESULTS In the stress group,the plas-ma levels of SOD decreased(17.02.9)mol L-1 (11.93.4)mol L-1 ;MDA
6、 increased(4.852.38)mol L-1 (7.562.48)mol L-1 ;PGE2 decreased(2.740.77)ng L-1 (1.540.25)ng L-1 ,P0.05;UI increased(1.10.4)(28.04.1) ,P0.01,as compared with those of control group.In the EA group compared with stress group,the plasma levels of SOD increased(11.93.4)mol L-1 (17.74.8)mol L-1 ;MDA decre
7、ased(7.562.48)mol L-1 (4.141.78)mol L-1 ;PGE2 in-creased(1.540.25)ng L-1 (3.210.38)ng L-1 ;UI decreased(28.04.1)(19.02.3) ,P0.01.The changes of plasma levels of PGE 2 in5d test were more obvi-ous than those in1d in EA group(3.210.38)ng L-1 (4.521.06)ng L-1 ,P0.05.CONCLUSION EA can protect gastric mu
8、cosa in stress rats.This function may be connected with its effect on oxygen free radicals and prostaglandin.PGE2 in EA group is effected by test time. 0 引言 氧自由基是形成应激性溃疡的重要原因之一1 .许多实验表明,它参与了胃粘膜的损伤2-4 .前列腺素对胃粘膜损伤具有保护作用5,6 ,且其作用机制与其抗氧自由基有关7 .针刺对胃粘膜损伤具有保护作用,但有关其对氧自由基和前列腺素的研究报道不多,我们采用同步实验方法,研究观察电针前后的应激大
9、鼠血浆中抗氧自由基物质超氧化物歧化酶(SOD)和氧自由基脂质过氧化产物丙二醛(MDA)以及前列腺素 E2 (PGE2 )含量的变化,旨在探讨电针对胃粘膜保护作用中有关氧自由基和前列腺素方面的作用机制. 1 材料和方法 1.1 材料 成年雄性 SD 大鼠 72 只,体质量 200250g(本校实验动物中心提供)随机分为空白对照组,应激组,电针足三里穴后应激组(下称电针组) ,每组动物再随机分为 3 小组,分别实验 1,3 和 5d 后结束实验,每小组8 只实验动物.实验前禁食 24h,自由饮水. 1.2 方法 先将大鼠分批装入有机玻璃鼠笼内,固定.空白对照组,将动物固定 2h 后放出(不针刺,1
10、 次 d-1 );应激组,将 3 小组动物固定后分别在 1,3 和 5d 装入有机玻璃笼内放入 4水箱中,2h 后取出(不针刺);电针组,将大鼠固定后电针大鼠双侧足三里穴,每日 1 次(具体电针方法及参数指标参照本期另文) ,3 小组动物分别电针 1,3 和 5d 后再应激处理(方法同前).实验结束后将大鼠断头取血 3mL,内加 EDTA 二钠,抑肽酶各 100L,于 45500r min-1 ,离心 15min,分离血浆于-70保存待测相关指标.SOD,MDA 采用生化法(药盒由南京生物建成有限公司提供) ,于 752 型分光光度计上读取 A(OD)值,通过计算获得结果.PGE2 采用放免分
11、析法(药盒由苏州大学血栓教研室提供).质控符合标准.按 Guth 标准计算溃疡指数(UI). 统计学处理:实验数据以 x s 表示,采用 Nosa 统计软件作统计处理. 2 结果 大鼠应激后血浆 SOD,MDA,PGE2 及溃疡指数较空白对照组 SOD 明显下降,MDA 明显上升,PGE2 明显下降(P0.05);UI 明显上升(P0.01);电针组较应激组比较,血浆 SOD 上升,MDA 下降,PGE2 上升,UI 下降(P0.01);电针组中血浆 PGE2 含量在实验 5d 时较实验 1d 时明显上升(P0.05).其余各组各小组间无明显差异(Tab1). 3 讨论 氧自由基是指分子氧还原
12、为水的一系列单价途径中所产生的中间产物,如超氧自由基、羟自由基等.它可通过攻击生物膜中多聚不饱和脂肪酸形成一系列脂质过氧化产物及其降解产物丙二醛等,导致组织损伤,引起和加剧炎症反应,此外还可与蛋白质和酶发生反应,导致细胞坏死8-10 .以上作用均可引起胃粘膜损伤.机体自身抗氧化系统如 SOD 等可减轻 胃粘膜损伤,已得到实验证实11 .有关针刺影响氧自由基的报道不多,陕西中医学院在此方面做了初步探索12 ,他们发现针刺大鼠足三里穴后大鼠溃疡指数及胃粘膜超微结构均较对照组损害轻,同时针刺组胃粘膜 SOD 和谷胱甘肽过氧化物酶的活性升高,认为针刺可通过影响氧自由基保护胃粘膜.前列腺素由花生四烯酸氧
13、化生成,研究发现抑制前列腺素合成可形成胃粘膜损伤13,14 ,间接证明了前列腺素对胃粘膜有保护作用,其机制与其具有扩张血管 15 和抗自由基作用有关7 .李铁等7 报道给大鼠服用前列腺素可翻转因应激性溃疡所致的组织中非蛋白疏基含量的下降,谷胱甘肽还原酶活性的抑制和丙二醛水平的上升.有关针刺对前列腺素含量影响的研究尚不全面,艾炳蔚等16 发现针刺大鼠足三里穴、梁丘穴可提高应激性溃疡组织局部PGE2 ,PGF2 的含量,并可降低溃疡指数.本实验发现应激后血浆 SOD含量下降,MDA 含量上升,而 PGE2 含量下降;相应的溃疡指数增加,与氧自由基增加、前列腺素减少所致结果一致.而电针可翻转应激所致
14、的SOD,MDA 和 PGE2 含量的变化;且溃疡指数下降,对胃粘膜损伤有保护作用.本实验表明氧自由基和前列腺素在应激性溃疡的发生和保护中具有重要作用;电针对胃粘膜损伤具有保护作用,推测此作用可能与电针促进氧自由基的清除,增加血浆前列腺素水平有关,且电针对前列腺素血浆水平的调节与针刺时间有关系. 表 1 实验应激大鼠 SOD,MDA,PGE 参考文献: 1Li T,Zhang XJ.The injurious effect of oxygen radicals on the membrance of gastric mucosal cells J.Beijing Yike Daxue Xueb
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