高效液相色谱法测定蒙药粘毛黄芩中黄芩苷的含量.doc

1、高效液相色谱法测定蒙药粘毛黄芩中黄芩苷的含量作者：张金花，李占军，布仁 ，乔俊缠， 薛培凤 【摘要】 目的 采用高效液相色谱法测定粘毛黄芩中黄芩苷含量。方法色谱条件为：采用 C18 柱,以甲醇-1%冰醋酸的水溶液（5446）为流动相，检测波长 280 nm。结果平均回收率 98.7%，RSD 为 0.96%。结论此法简便、灵敏、快速、可靠、重复性好，可用于粘毛黄芩药材的质量控制。 【关键词】 粘毛黄芩; 黄芩苷; 高效液相色谱法AbstractObjectiveTo determine the content of Baicalin in Scutellaria viscidula Bge.

2、by HPLC.MethodsThe separation was performed on kromasil C18 column with methyl alcohol-1% acetic acid (5460) as mobile phase. The detection wavelength was 280 nm.ResultsThe average recovery was 98.7%, with RSD 0.96%. ConclusionThe method is easy, sensitive, quick, reliable and repeatable, it can be

3、used for the quality control of Scutellaria viscidula Bge.Key wordsScutellaria viscidula; Baicalin; Determination; HPLC粘毛黄芩 Scutellaria viscidula Bge.为唇形科黄芩属植物,主产于我国内蒙、山西等地区。有些地区将它作为黄芩的代用品使用,其资源丰富、质量较好,是最有利用价值的地方品种之一1 。蒙药以其干燥根入药，谓其味苦性寒，清热解毒。主治毒热， “粘热” ，肺热咳嗽，口渴2 。粘毛黄芩根中含有黄酮类化合物：黄芩素(baicalein) 、汉黄芩素(w

4、ogonin) 、黄芩新素（neobaicalein） 、粘毛黄芩素(viscidulin )、粘毛黄芩素 II(viscidulin II)、粘毛黄芩素(viscidulin ) 、千层纸素 A(oroxylin A ) 、白杨素(chrysin) 、穿心莲黄酮（panicoin） 、黄芩苷(baicalin)、汉黄芩素苷(wogonoside) 35 。黄芩苷是粘毛黄芩的主要成分,为了解粘毛黄芩中黄芩苷的含量,为该蒙药材的质量控制提供依据，并为进一步了解其药理作用和合理开发提供基础资料,作者利用 HPLC 法对粘毛黄芩中黄芩苷含量进行测定。1 仪器与试剂大连依利特公司提供依利特高效液相色谱

5、仪（P230 高压恒流泵，UV230+紫外-可见检测器，EC2000 色谱数据处理系统） ；北京慧易德公司提供 kromasil 色谱柱（ kromasil100-5C-18, 5 m, 250 mm4.6 mm） 。黄芩苷对照品（含量测定用）为中国药品生物制品检定所提供（批号110715-200514） ；流动性所用甲醇为色谱纯试剂，水为市售娃哈哈纯净水，其他试剂试药均为分析醇。2 方法与结果2.1 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇1%冰醋酸的水溶液（5446）为流动相；流速 1. 0 ml/ min ；柱温 20 ；检测波长为 280 nm。理论板数按黄芩苷

6、计算应不低于 20 000。2.2 对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷减压干燥 12 h 的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每毫升含 20 g 的溶液。见图 1。2.3 供试品溶液的制备称取干燥的粘毛黄芩粉末约 0.3 g，精密称定，加 70%乙醇 40 ml,加热回流 3 h，放冷，滤过，滤液置 100 ml 量瓶中，用少量 70%乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加 70%乙醇至刻度，摇匀，精密量取 1 ml，置 10ml 量瓶中，加甲醇水（5446）至刻度，摇匀。见图 2。2.4 线性关系考察称取适量黄芩苷标准品用甲醇定容置 10 ml 容量瓶，分别吸取0.5，1，1.5，2，2

7、.5 ml 置 10 ml 容量瓶，用流动相稀释至刻度。吸取上述溶液各 20 l 进样测定,以峰面积对浓度进行回归,求得回归方程为Y=84 653X+32.29,r=0.999 9，线性范围为 0.011 450.057 25 mg/ml。2.5 精密度实验 取同一批号干燥的粘毛黄芩粉末, 按供试品项下方法处理后, 按上述色谱条件重复进样 5 次，测得其峰面积的 RSD 为 0.51%。2.6 稳定性实验精密吸取黄芩苷对照品溶液于 1，2，4，6，8，12，24 h 进行测定,计算得黄芩苷峰面积的 RSD 为 1.78%,可知黄芩苷溶液 24 h 稳定。2.7 重复性实验 取同一批号干燥的粘毛

8、黄芩粉末 5 份, 分别按供试品项下方法处理后, 按上述色谱条件进行含量测定, 并对所得数据进行处理,黄芩苷含量的 RSD 为 0.95%。2.8 加样回收实验 精密称取已测含量的干燥的粘毛黄芩粉末 0.15 g (共 5 份)，各精密加入没食子酸对照品适量，分别按供试品项下方法处理后,进行测定并计算回收率,结果测得平均回收率为 98.7%，RSD 为 0.96%。结果见表1。表 1 加样回收实验结果（略）2.9 样品含量测定按供试品制备方法制成样品溶液，过样 20 l/次，测定峰面积，分别测定了 3 个产地的粘毛黄芩根中黄芩苷的含量。结果见表 2。表 2 样品的含量测定结果（略）3 讨论为保

9、证被测成分能被全部提净，实验过程中对提取溶媒、提取方法、提取时间、溶媒用量、提取次数进行了详细考察。最终确定提取方法为加 70%乙醇 40 ml,加热回流 3 h，药材中的黄芩苷已基本提取完全。黄芩苷(Baicalin) 是从粘毛黄芩根中提取分离出来的一种黄酮类化合物，具有清热解毒、利胆保肝等药理作用6 。临床上用于治疗肺热咳嗽、湿热泻痢等疾病。本实验对蒙药粘毛黄芩中黄芩苷进行了含量测定,结果显示,方法稳定可靠,重复性好,为粘毛黄芩药效的进一步研究和综合开发利用提供了新的科学依据。【参考文献】1宋万志.药用黄芩的资源研究J.药学学报,1981,16(2)：139.2朱亚民.内蒙古植物药志,第 2 卷M.呼和浩特：内蒙古人民出版社,1989：485.3王红燕，肖丽和，刘 丽，等.粘毛黄芩根的化学成分研究J.沈阳药科大学学报，2003,20（5）：339,348.4刘美兰，李曼玲，梁晓天，等.粘毛黄芩中黄酮类成分的研究J.中草药,1986,17(10): 438.5于留荣，刘美兰，王孝涛.粘毛黄芩黄酮类成分的研究J.药学学报,1984,19（5）: 397.6王浴生.中国药理与应用M.北京：人民卫生出版社,1983：956.