1、基因组拷贝数变异（CNV） -疾病遗传学研究新方向,邓林贝国家人才培养与生命科学基地,2018/7/17,拷贝数变异(Copy number variation, CNV) 是由基因组发生重排而导致的,一般指长度1 kb 以上的基因组大片段的拷贝数增加或者减少, 主要表现为亚显微水平的缺失和重复。,2018/7/17,正常人类基因组构成成分是成对存在，即2份拷贝,当基因组片段出现缺失或重复时，导致CNV,2018/7/17,CNV领域的奠基之作,自然遗传学： 在人类基因组上发现大尺度变异,科学： 人类基因组上的大尺度拷贝数多态,2018/7/17,基因组拷贝数多态和结构多态,Zhang et
2、al.(2009) Annu .Rev. Genomics Hum, Genet,2018/7/17,2018/7/17,2018/7/17,致病性,2018/7/17,非等位同源重组(NAHR) 主要发生在减数分裂中, 可导致重复、缺失和倒位非同源末端连接(NHEJ) 产生一些结构简单的 CNV复制叉停滞和模板转换(Fos Tes) 产生含复杂结构的 CNV,2018/7/17,CNV 突变机理,2018/7/17,基因组技术的分辨率,2018/7/17,G banding 4Mb ,FISH40 to 250Kb per clone,2018/7/17,TSC2：c. 1221 CA,TS
3、C2： c. 5238-5255 del,TSC2： c. 5121 ins A,TSC2：c. 2071 del C,DNA sequencing 1 bp ,全基因组规模的CNV分析平台,2018/7/17,Next generation sequencing,SNP array 技术平台的实际应用 对不明原因智力障碍/生长发育迟缓患者行全基因组拷贝数变异分析,2018/7/17,智力障碍：又称为精神发育迟滞（Mental Retardation，MR），是一组以18周岁前起病、认识功能障碍（IQ小于70）、社会适应能力缺陷为特征的疾病 。MR群体发病率约为1-3%。MR患者在学龄前（5岁
4、前）常表现为语言、运动发育迟滞，故亦称之为生长发育迟缓（Development Delay，DD）MR/DD的病因复杂，主要包括环境致畸致愚因素、围产期缺氧窒息和遗传因素。其中遗传因素约占2/3。目前只有一半的患者能够明确病因诊断。,2018/7/17,用SNP array芯片行全基因组拷贝数变异检测Illumina Setrix BeadChip,2018/7/17,研究方法, CNV分析软件：cnvPartition （Illumina提供）,2018/7/17,Illumina Infinium 实验流程（）,拷贝数变异（CNVs)是否致病判断流程 （参考Koolen DA，2009）,
5、2018/7/17,完成基因芯片检测情况,目前已通过Illumina BeadArray 系统共完成426例智力障碍/生长发育迟缓患者的全基因组拷贝数变异检测；85例确诊为致病性CNVs，阳性率19.9%；50例pCNVs已完成来源的验证,其中： 缺失型pCNVs大小0.6218.5Mb，平均4.9Mb； 重复型pCNVs大小1.338Mb，平均9.5Mb 。,2018/7/17,结果-患者诊断为已知综合征的类型包括,22q11.21微缺失综合征22q11.21微重复综合征Pallister-Killian综合征1q21.1微重复综合征9p-综合征睑裂狭小-上睑下垂-倒转型內眦赘皮综合征Pra
6、der-Willi综合征Greig 头-并指（趾）多指（趾）综合征1p36单体综合征Williams-Beuren综合征先天性颅锁骨发育不全,2018/7/17,2018/7/17,睑裂狭小-上睑下垂-倒转型內眦赘皮综合征,A示3q22.2-q23 缺失约4.2Mb；B示患者并趾畸形、面部畸形特征（包括小头、上睑下垂、睑裂狭小、倒转型內眦赘皮、低位耳、鼻梁低平、人中长、小嘴）； C、D、E分别为患者及其父亲、母亲FISH分析结果图，目的探针RP11-79L9 ，对照探针RP11-636D10 ，可见患者间期核和中期染色体均缺失一个红色信号。,2018/7/17,Greig头-并指（趾）多指（趾
7、）综合征,A示 7p14.1-p14.3缺失约10Mb；B示患者脚部并趾多趾畸形及面部畸形特征（前额窄、额嵴、眼距宽、內眦赘皮、眼裂上斜、缩下颌）；C、D、E分别为患者及其父亲、母亲FISH分析结果图，目的探针RP11-121A8 ，对照探针RP11-1005L7 ，可见患者中期染色体缺失一个橙色信号,2018/7/17,Williams-Beuren综合征,A示7q11.23缺失约1.4M；B示患者面部畸形特征（长脸、额头高、眼裂下斜、球状鼻尖、厚嘴唇）；C、D、E分别为患者及其父亲、母亲FISH分析结果图，目的探针RP11-27P17 ，对照探针RP11-121A8 ，可见患者中期染色体缺失一个橙色信号（图D和E目的探针标记为橙色）。,2018/7/17,The end！,
