褐藻糖胶对高脂血症大鼠脂代谢酶的影响.doc

1、褐藻糖胶对高脂血症大鼠脂代谢酶的影响【摘要】 探讨褐藻糖胶（FPS）对高脂血症大鼠脂代谢酶的影响。【方法】取健康雄性 SD 大鼠 60 只，随机分为 6 组：正常组，模型组，绞股蓝组（剂量为 30mgkg-1） ，FPS 低、中、高剂量（剂量分别为0.1、0.2、0.4gkg-1）组。除正常组外，其他各组以高脂乳剂（10mLkg-1）灌胃复制大鼠高脂血症模型。观察各给药组对大鼠脂代谢酶脂蛋白脂酶（LPL） 、肝脂酶（HL） 、卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT） 活性的影响。 【结果】FPS 低、中剂量组血清 LPL、HL、LCAT 及肝脏 LPL、HL 活性均较模型组显著升高。 【结论】FPS

2、 通过激活血清和肝脏 LPL、HL 的活性来降低血清甘油三酯，激活 LCAT 降低血清胆固醇。 【关键词】 褐藻糖胶/药理学 高脂血症/中药疗法 高脂血症/血液 脂代谢酶 疾病模型 动物 大鼠 在血浆脂蛋白代谢过程中，有许多脂酶起着很重要的作用。主要包括脂蛋白脂酶（LPL） 、肝脏甘油三酯酶（HTGL） 、肝脂酶（HL）和卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT） 。LPL 和 HL 可催化乳糜微粒（CM）和促进极低密度脂蛋白（VLDL）中的甘油三酯水解。LCAT 催化新生高密度脂蛋白（HDL）表面的游离胆固醇酯化，使 HDL 表面游离胆固醇酯化转入核心部位，使体积?才套吹母呙芏戎 鞍椎 檀迹DL3C

3、 ）逐渐转化为体积更大的 HDL2C ，HDL 就这样转运酯化胆固醇的消除过程1 。以上脂代谢酶的活性与血脂水平紧密相关。本试验旨在探讨褐藻糖胶（FPS）对高脂血症大鼠脂代谢酶的影响，现将结果报道如下。 1 材料与方法 1.1 药物 褐藻糖胶（FPS）由广东海洋药物研究所提供；绞股蓝总苷片为安康正大制药有限公司产品，批号：Z10041204。 1.2 动物 健康雄性 SD 大鼠，清洁级，体质量 180220g，广东省医学实验动物中心提供，合格证号：2004A011。 1.3 试剂与仪器 总胆固醇（TC）试剂盒为中生北控生物科技股份有限公司产品，批号：180451；甘油三酯（TG）试剂盒为中生北

4、控生物科技股份有限公司产品，批号：220371；总脂酶（LPL+HL）试剂盒为南京建成生物工程研究所产品，批号：20040920；722 型分光光度计为尤尼柯（上海）仪器有限公司产品。 1.4 高脂乳剂的配制 按文献2方法配制。 1.5 高脂模型复制2及药物治疗 取 SD 大鼠 60 只，随机分为6 组：即正常组，模型组，绞股蓝组（剂量为 30mgkg-1） ，FPS 低、中、高剂量组（剂量分别为 0.1、0.2、0.4gkg-1） ，每组 10 只，各组均喂以基础饲料。除正常组外，其他各组每日按 10mLkg-1d-1 的剂量灌胃（ig)高脂乳剂，28d 后眶静脉丛取血，测定血脂各指标，证实

5、模型复制成功。然后，每天上午分别灌胃给药，其中正常组和模型组给予等容积蒸馏水；下午除正常组外，其他各组灌胃高脂乳剂，每周测体质量 1次，以便调整给药量，共给药 4 周。 1.6 血清和肝脏 TC、TG、LPL、HL 的测定 均按试剂盒说明书进行。1.7 血清 LCAT 的测定 参照蒋宪成等3的方法，利用血清中原有卵磷脂与胆固醇作底物，保温一定时间，由于 LCAT 作用，血清中胆固醇酯增加，而游离胆固醇减少，然后应用胆固醇氧化酶使胆固醇氧化，同时产生 H2O2，后者与 4 氨基比林及本酚在辣根过氧化酶作用下生成红色醌亚胺，在 500nm 处进行比色可测定游离胆固醇（FC）含量，以 FC的减少量（

6、即胆固醇酯化量）表示 LCAT 活性大?僮鞣椒 喝?份新鲜血清各 0.1mL，其中 1 份置 56水浴，另 1 份置 37水浴，各 1h，立即分别按试剂盒说明测定 FC 的含量。 1.8 数据处理 采用 SPSS10.0 统计软件进行处理。 2 结果 2.1 FPS 对大鼠血清 TG、TC 及肝脏 TG 的影响 表 1 结果显示，与正常组比较，模型组血清 TG、TC 及肝 TG 均显著性升高（P0.001)；除高剂量组对血清 TG 无明显影响外，FPS3 个剂量组可显著性降低血清TG、TC 及肝组织 TG 含量（P0.05 或 P0.01 或 P0.001） 。 2.2 FPS 对血 HDLC

7、 、HDL3C 、HDL2C 及 HDLC/TC 的影响 表 2 结果显示，与正常组比较，模型组 HDLC 、HDL2C 浓度及HDLC/TC 比值均显著性降低（P0.001） ；与模型组比较，FPS 低、中剂量组 HDLC 、HDL2C 浓度显著性升高（P0.05 或 P0.01） ，FPS 低、中、高剂量组 HDLC/TC 比值亦显著性升高（P0.01 或 P0.001） 。 2.3 FPS 对血中 LPL、HL、LCAT 的影响 表 3 结果显示，与正常组比较，模型组 LPL、HL、LCAT 活性均显著性降低（P0.001） ；与模型组比较，FPS 低、中剂量组 LPL、HL、LCAT

8、活性均显著性升高（P0.05 或P0.01） ，以中剂量组更显著。 2.4 FPS 对肝脏 LPL、HL 的影响 表 4 结果显示，与正常组比较，模型组肝脏 LPL、HL 活性均显著性降低（P0.001） ；与模型组比较，FPS 低、中剂量组 LPL、HL 活性均显著升高（P0.05 或 P0.01） ，且均以中剂量组效果更显著。表 1 FPS 对高脂血症大鼠血脂的影响表 2 FPS对高脂血症大鼠 HDLC 、HDL3C 、HDL2C 及 HDLC/TC 的影响表 3 FPS 对高脂血症大鼠单位时间(h)血清 LPL、HL、LCAT 的影响表 4 FPS 对高脂血症大鼠肝脏 LPL、HL 的影

9、响 3 讨论 LP 可催化 CM 和 VLDL 中的 TG 水解为甘油和脂肪酸，水解时释放的磷脂、胆固醇转移至 HDL2C ，即促进 HDL3C 转化成 HDL2C ，使这些大颗粒脂蛋白逐渐变为较小的残骸颗粒。HL 是由肝实质细胞合成的一种糖蛋白，存在于肝脏和肾上腺血管床内皮细胞中，在肝素的作用下释放入血。目前认为 HL 可继续 LPL 的工作，进一步催化水解 CM 和 VLDL 残骸颗粒中的甘油三酯1 。本试验中，与模型组比较，FPS 可显著升高血清和肝脏中 LPL、HL 的活性，从而使 FPS 组 TG 含量显著低于模型组。这说明FPS 可能通过增加 LPL、HL 的活性来降低血清 TG

10、的水平。 LCAT 是肝脏分泌的一种糖蛋白，存在于血液中，其功能是催化卵磷脂分子二位脂酰基转移到胆固醇第三位羟基，生成胆固醇酯（CE） ，血浆90%的 CE 由 LCAT 催化反应形成。HDLC 为有效抗动脉粥样硬化因子，可将外周组织的游离胆固醇转移至肝脏代谢，有利于减少胆固醇在外周组织细胞中的聚集和对血管内皮细胞的广泛性损害。影响 HDLC 代谢的主要因素之一就是 LCAT 活性。因为 LCAT 不断使 HDL 表面游离胆固醇酯化转入核心部位，使 HDL 表面与血浆及周围组织细胞的游离胆固醇含量继续形成一定的浓度梯度，有利于游离胆固醇不断地向 HDL 转移。随着HDL3 核心内 CE 不断增

11、多，逐渐转变为体积更大的 HDL2。HDL2 一部分转运酯化胆固醇至肝脏代谢，一部分则转化为胆汁酸并排出体外1 。代谢动力学研究也证实，FPS 组 LCAT 的活性显著提高，HDLC 、HDL2C浓度显著增加，HDLC/TC 比值也显著提高，说明 FPS 具有激活 LCAT 的作用，可显著增加 HDL2C 的含量，从而促进胆固醇的逆转及清除。 【参考文献】 1赵水平，王钟林，陆宗泉.临床血脂学M.长沙：湖南科学技术出版社，1997：81 2刘明，董超仁，苏静怡一种简易大鼠高脂血症模型 中国药理学通报，1989，5（2）：119 3蒋宪成，庄庆祺，梅美珍卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性的简易测定法 上海第一医学院学报，1985，12（2）：259 4Jean G L,Francina GSome effects of chitosan on liver function in the rat