黄金咽喉片中挥发油及有机酸的同板薄层色谱鉴别.doc

1、黄金咽喉片中挥发油及有机酸的同板薄层色谱鉴别作者：何兵，冯文宇，田吉，李春红，艾洪兵【摘要】 目的考察黄金咽喉片质量控制标准中的薄层鉴别项。方法采用薄层色谱法对黄金咽喉片中的主要有效成分挥发油类（青蒿油、薄荷脑）及有机酸类（绿原酸、没食子酸、甘草酸）分别进行定性鉴别。结果在薄层层析色谱中均能检出青蒿油、薄荷脑、绿原酸、没食子酸和甘草酸。结论薄层色谱法简便、快速，专属性强，重复性好，可作为该制剂的质量控制方法。 【关键词】 黄金咽喉片 青蒿油 薄荷脑 绿原酸 没食子酸 甘草酸 薄层鉴别Abstract：ObjectiveTo establish a thin layer distinguish

2、project of quality control standards for HuangJing YanHou Tablet. MethodsArtemisia Annuae oil，Menthol，Chlorogenic Acids，Gallic Acid and Glycyrrhizic Acid in HuangJing YanHou Tablet were identified by TLC.ResultsArtemisia Annuae oil，Menthol，Chlorogenic Acids，Gallic Acid and Glycyrrhizic Acid could be

3、 detected by TLC. ConclusionThis method is simple，rapid，specific and repeatable，and it can be used for thin layer distinguish project of quality control standard.Key words：HuangJing YanHou Tablet; Artemisia Annuae oil; Menthol; Chlorogenic Acids; Gallic Acid; Glycyrrhizic acid; TLC黄金咽喉片是我所研究的中药新药，由青

4、蒿（黄花蒿）油、金银花提取物、甘草提取物、青果提取物、乌梅提取物、薄荷脑 6 味中药提取的有效成分和有效部位组成的复方制剂。具有芳香透邪、清热解毒、生津润燥、利咽止痛等功效。主要用于治疗急慢性咽炎、喉炎、扁桃体炎、口腔黏膜溃疡；亦可辅佐治疗细菌或病毒感染的其他呼吸道疾病。为了确保药品的质量，对方中的两大类有效成分挥发油类（青蒿油、薄荷脑）和有机酸类（绿原酸、没食子酸、甘草酸）分别进行了同板薄层色谱鉴别研究。1 仪器与试药1.1 仪器 FA1604 电子分析天平（上海民桥精密仪器有限公司） 、CQX25-06超声波清洗器（上海必能信超声有限公司） 、硅胶 G 薄层预制板（青岛海洋化工厂） 。1.

5、2 对照品青蒿（121016-200406） 、薄荷脑（0728-200305） 、绿原酸（0753-200412） 、没食子酸（110831-200302） 、甘草酸铵（110731-200409） ，中国药品生物制品检定所提供。1.3 试药所用试剂均为分析纯；水为重蒸馏水。1.4 样品黄金咽喉片（批号 051212，051213，051214）及阴性对照样品（泸州医学院药物研究所自制） 。2 方法与结果2.1 有机酸类的鉴别2.1.1 对照品溶液的制备取绿原酸、没食子酸、甘草酸铵对照品，分别加甲醇制成浓度为 2 mgml-1 的溶液，作为 3 者的对照品溶液。2.1.2 供试品溶液的制备取

6、本品 1 片，研细，加水 30 ml，混匀，用 1 molL-1 盐酸调 pH 23，置分液漏斗中，用醋酸乙酯萃取 2 次，20 ml/次。合并醋酸乙酯液，在水浴上蒸干，残渣加醋酸乙酯 2 ml 溶解，即得。同法制得 3 批样品的供试品溶液。2.1.3 阴性对照液的制备取按处方比例及制备工艺制得缺金银花提取物、青果提取物、甘草提取物的阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。2.1.4 薄层层析照薄层色谱法1实验，吸取上述溶液各 6 l，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水（432）上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10硫酸乙醇溶液，以120 加热至斑点显色

7、清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色斑点，阴性对照无此斑点。结果见图 1。2.2 挥发油类的鉴别2.2.1 对照品溶液的制备取青蒿对照药材 10 g，加水 100 ml，置挥发油测定器中，自测定器上端加水使充满刻度部分，再在刻度管中加入醋酸乙酯 2 ml，连接回流冷凝管，加热至沸，蒸馏 1h ，取醋酸乙酯层，加无水硫酸钠脱水，作为青蒿油对照品溶液。取薄荷脑对照品，加醋酸乙酯制成浓度为 20 mgml-1 的溶液，作为薄荷脑对照品溶液。2.2.2 供试品溶液的制备取本品 20 片，研细，同青蒿油对照品溶液制备方法制得 3 批样品的供试品溶液。2.2.3 阴性对照液的制备取按处

8、方比例及制备工艺制得不含青蒿油及薄荷脑的阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。2.2.4 薄层层析照薄层色谱法1试验，吸取上述溶液各 5 l，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以石油醚（6090）-醋酸乙酯（365）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 2 香草醛硫酸溶液，在105 加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色斑点，阴性对照无此斑点。结果见图 2。3 讨论在甘草酸的鉴别中，由于甘草酸不容易结晶，其对照品很难得到，而甘草酸铵容易结晶，易得到纯品，在酸性条件下，仍以甘草酸形式存在2 ，故可以用甘草酸铵作为鉴别甘草酸的对照品。为同板鉴别绿原酸、没食

9、子酸、甘草酸，考察了多种展开剂：醋酸乙酯-甲酸-水（832） ，甲苯-醋酸乙酯-甲酸（631） 、三氯甲烷-醋酸乙酯-甲酸（641） ，醋酸丁酯-甲酸-水（432） 。结果前3 个展开系统分离效果不如第 4 个展开系统。曾比较了 1三氯化铁乙醇溶液、10硫酸乙醇溶液两种显色剂，结果喷以 1%三氯化铁乙醇溶液，绿原酸显墨绿色，没食子酸显深蓝色，甘草酸显亮黄色，但亮黄色在白色背景下对比不明显，而 10硫酸乙醇溶液所有斑点均为灰色斑点，效果优于前者。采用薄层色谱鉴别的方法对黄金咽喉片中的两类有效成分挥发油（青蒿油、薄荷脑）和有机酸（绿原酸、没食子酸、甘草酸）分别进行同板薄层鉴别，该方法简便易行，层析分离清晰，斑点集中，阴性对照无干扰，重复性好，专属性强，可用于该制剂质量标准中的鉴别项。【参考文献】1国家药典委员会.中国药典,部 S.北京:化学工业出版社,2005,附录 312孙文基,谢世昌.天然药物成分定量分析，第 1 版M.北京:中国医药科技出版社,2003:205.