1、抗酸杆菌痰涂片检验的实验室生物安全抗酸杆菌痰涂片检验作为对传染性肺结核的诊断手段比 X 线诊断准确性高；作为实验方法，技术相对简单，容易标准化和完成操作；其投入设备少、成本低；从收到标本到报告结果的时间短，能够及时、准确地评价涂阳患者的治疗效果，被我国设为结核病控制项目的主要实验室检验方法。但结核分枝杆菌（抗酸杆菌）为二类高致病性病原菌，其自身的生物学特性使其容易在实验室造成对工作人员及相关人员的感染和环境的污染，形成对公众的伤害，操作结核分枝杆菌的实验室人员结核病发病率比其他人群高三倍，因此抗酸杆菌痰涂片检验的实验室安全问题已经成为当前结核病防治机构实验室必须关注的问题 目前，在市、县、乡级
2、结核病防治机构没有建立 BSL-2 实验室的情况下，就更好地保障实验室的生物安全问题，本人根据多年的工作经验，谈一些粗浅的看法。 实验室的生物安全工作的开展应遵循科学合理、安全首位、软件在先、严格管理、远离病原、预防为主、使用方便、厉行节约的原则，具体实施如下： 实验室首先要配备必须的安全设施： 1）有独立的实验室，室内有上下水，通风良好； 2）室内设通风柜、高压灭菌器、紫外线灯、废物桶、感应水龙头； 3）标本的收集、涂片、染色、镜检、登记和涂片的储存应在各自独立的区域； 4）设有独立生物咳痰室，内设紫外线灯（按 1.5W 每立方米计算） ，每个病人咳痰后必须打开紫外线灯灭菌，如果没有此设施，
3、要叮嘱病人在远离人群的开放空间留取标本，防止肺结核病人咳漱产生的结核杆菌气溶胶造成对人的传播及对环境的污染。 其次要做好个人防护，实验室工作人员要配备一次性聚氯乙烯手套、一次性帽子、口罩、鞋套和防护服。 第三要使用以下消毒剂：5%的苯酚溶液、75%的酒精、甲醛、2%的戊二醛及 2%的乙醛溶液。 在操作环节上，严格遵守以下方法和措施： 实验前首先要用紫外线灯将操作台面及室内照射一小时，工作人员进入实验室前必须穿好防护服、戴上口罩、手套、鞋套，病检查有无破损；女检验员长发束在帽内；操作人员在操作时应严格遵守实验室安全操作规程和标准化操作程序（SOP)；在实验过程中，禁止一切与实验无关的活动，保证集
4、中精力完成操作；在操作过程中，要警惕分枝杆菌气溶胶的产生，涂片操作要小心谨慎，动作轻缓，固定和染色操作时产生气溶胶的几率较大，Allen Bw 实验结果表明，样品热固定不能杀灭所有涂片标本中的结核杆菌，若涂片长时间暴露在高温中，残留活菌减少，并仅见于涂片厚的部分，从而提高热固定时痰液对细菌的保护作用，新鲜痰液粘滞度越大，加热固定时对细菌的保护作用越强，为避免此风险，操作人员要做到双手伸入操作台操作，面部通过通风柜的玻璃与操作台面隔开（在操作过程只利用通风柜的屏障功能） ；完成涂片后立即染色，若不能及时染色涂片，应浸泡在 2%乙醛溶液中，不可以将涂片暴露在空气中，涂片在空气中暴露的时间越长，感染
5、的机会越大，这是操作者尤其需要注意的问题；另外涂片不能涂抹太厚尤其是新鲜痰液；经过染色的结核分枝杆菌已不能存活。 实验结束后，所有物品归放原位，标本盒及其他废弃物放入 5%的苯酚溶液废物桶中，涂片用镊子夹取放入储存柜内，用 5%的苯酚溶液擦拭玻片夹、放置标本的搪瓷盒、台面，镊子放在 75%的酒精中浸泡，关上通风柜的玻璃窗，打开通风柜紫外线灯；操作人员在实验室近门处依次脱掉帽子、防护服、鞋套、手套装入高压灭菌袋，用肥皂洗手，流水冲洗；出门后打开室内紫外线灯，关好门；两小时后关闭紫外线灯、例行安全检查后关闭门窗离开；一次性手套、帽子、鞋套、过期的涂片和经过 24 小时浸泡的废弃物经高压灭菌后按医疗
6、垃圾处理；高压灭菌时采用生物或化学指示剂以确保灭菌效果；防护服在每次实验完毕后均需高压灭菌。 为确保实验室生物安全，还要建立建全规章制度并严格遵守。规章制度主要强调以下几个方面： 1）操作人员上岗前必须经过严格的生物安全培训。 2）实验室管理方面，应严格限制非实验室人员进入实验室，减少实验室内外感染的机会，实验室必须保持肃静，操作人员进入实验室尽量避免携带非必须物品，实验台上不放置任何与实验无关的物品，禁止吸烟、饮食及用嘴湿润笔或标签等，不要用手抚摸头面部。 3）制定实验室和咳痰室定期消毒制度。 4)制定操作员定期肺部检查制度。 除建立健全规章制度外，还要制定实验室应急预案，包括防水、防火、意外暴露的处理及污染消毒等。 总之，实验室生物安全不仅涉及操作人员自身安全，还涉及他人健康，所以这个问题必须引起我们高度重视，以便更好地保障结核病控制项目的实施成果。
