气相色谱法测定不同商品来源降香药材中挥发油和反式苦橙油醇的含量.doc

1、气相色谱法测定不同商品来源降香药材中挥发油和反式苦橙油醇的含量作者：李卓亚，唐春萍，梁生旺，尹永芹，沈志滨【摘要】 目的 建立降香药材及降香挥发油中反式苦橙油醇的含量测定方法，并比较不同商品来源降香药材中降香挥发油及反式苦橙油醇含量。方法 采用气相色谱法，RTX-1701 弹性石英毛细管柱(320 m15 m，0.25 m)，以 FID 为检测器，内标为正十四醇。结果 降香药材中挥发油的含量为 1.01%2.70%，挥发油中反式苦橙油醇的含量为40.35%53.30%，反式苦橙油醇在 0.150.42 mg/mL 范围内呈良好的线性关系，平均回收率为 98.81%。结论 采用水蒸气蒸馏法提取降

2、香挥发油和采用气相色谱法测定降香挥发油中反式苦橙油醇的含量，方法简便，可行；9 个不同商品来源的降香挥发油的含量差别较大，挥发油中反式苦橙油醇的含量也有差别。 【关键词】 降香；挥发油；反式苦橙油醇；含量测定Abstract:Objective To develop a GC method for analyzing dnerolidol and volatile oil in Ligunm Dalbergiae Odoriferae from different origins. Methods Samples were analyzed on a RTX1701 (320 m15 m, 0

3、.25 m) column by using FID as the detector and 1tetradecanol as internal standardResults Content of volatile oil in Ligunm Dalbergiae Odoriferae was 1.01%-2.70%, and the content of dnerolidol was 40.35%-53.30%. dnerolidol had a good linearity in the range of 0.15-0.42 mg/ml, and the average recovery

4、 was 98.81%.Conclusion Contents of the volatile oil and dnerolidol in Ligunm Dalbergiae Odoriferae varied with origins.Key words:Ligunm Dalbergiae Odoriferae；volatile oil；dnerolidol; content determination中药降香（Ligunm Dalbergiae Odoriferae）为豆科植物降香檀（Dalbergia odorifera T.Chen）树干和根的干燥心材，具有行气活血、止痛止血之功效1

5、。中国药典 2005 版一部仅采用薄层色谱法对降香药材进行定性鉴别，有文献报道采用 HPLC 法对不同产地降香挥发油中反式苦橙油醇的含量进行测定2 ，为降香药材的质量控制提供了参考标准。本实验在参考文献的基础上，采用水蒸气蒸馏法提取降香挥发油，测定不同商品来源降香药材的出油率，并同时测定挥发油中反式苦橙油醇的含量，为进一步控制降香药材的质量提供依据。1 仪器与试剂岛津(Shimadzu)GC2010 气相色谱仪，FID 检测器。降香药材：分别购于山东、黑龙江、江西、贵州、广东，经广州市药材公司周路山主任中药师鉴定为豆科植物降香檀树干和根的干燥心材；苦橙油醇（Sigma 公司，顺反异构混合液，纯

6、度98%，批号sigmah59605 ） ；正十四醇（色谱纯，天津市大戟化学试剂厂） ；无水乙醇、石油醚均为分析纯。2 方法与结果2.1 色谱条件RTX1701 气相色谱柱(320 m15 m，0.25 m)，进样口温度230 ，分流比为 51，流动相高纯 N2（99.999%） ，正十四醇为内标，FID 检测器，进样量 2 L，检测器温度 250 ，流速 2 mLmin-1。升温程序：初始温度 100 ，以 2 min-1 速度升温到 124 ，保持 10 min；以 10 min-1 速度升温到 138 ，保持 5 min；以 20 min-1 速度升温到 220 ，保持 5 min。色谱

7、图见图 1。2.2 溶液的制备2.2.1 不同商品来源降香挥发油的制备 分别取 9 个不同商品来源的降香药材适量，粉碎，过 40 目筛，分别取过筛后药材粗粉 150 g，置 2 000 mL 圆底烧瓶中，加 8 倍量水、浸泡 5 h，挥发油提取器提取 6 h3 ，无水 Na2SO4 干燥，离心，即得降香挥发油。2.2.2 内标溶液的制备 精密称取内标十四醇 99.0 mg，置 100 mL 量瓶中，加入无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得内标溶液（0.990 mgmL-1） ，置 4 冰箱保存。2.2.3 对照品溶液的制备 精密称取苦橙油醇对照品 119.0 mg，置 100 mL 量瓶中，加

8、入石油醚溶解并稀释至刻度，摇匀，即得苦橙油醇对照品溶液（1.190 mgmL-1） ，用面积归一化法测定其中反式苦橙油醇的含量为 61%，故对照品中反式苦橙油醇的浓度为（0.726 mgmL-1） ，置 4 冰箱保存。2.2.4 样品溶液的制备 分别精密称取“2.2.1”项下制备的 9 个不同商品来源的降香挥发油 150.7、153.5、149.5、153.8、150.6、152.6、154.5、153.2、152.6 mg，分别置 9 个 100 mL 量瓶中，以石油醚定容到刻度，摇匀，编号，即得。2.3 标准曲线的绘制精密量取“2.2.3”项下配制的对照品溶液1.0、1.5、2.0、2.5

9、、2.9 mL 于 5 mL 量瓶中，分别加入 1.5 mL 内标溶液，石油醚溶解并定容至刻度，摇匀，照“2.1”项下色谱条件进样，以反式苦橙油醇质量浓度为横坐标（X） ，以反式苦橙油醇峰面积与内标峰面积之比为纵坐标（Y） ，绘制标准曲线，得回归方程：Y=3.633X-0.057（r=0.999 9） ，线性范围：0.1460.420 mgmL-1。2.4 精密度试验精密量取“2.2.3”项下制备的对照品溶液 2.0 mL，置 5 mL 量瓶中，加入 1.5 mL“2.2.2”项下制备的内标溶液，石油醚溶解并定容至刻度，摇匀，照“2.1”项下色谱条件重复进样 5 次，反式苦橙油醇与内标峰面积比

10、的 RSD 为 0.67%，表明仪器精密度良好。2.5 稳定性试验精密量取“2.2.4”项下制备的“1”号降香挥发油溶液 1.5 mL，置5 mL 量瓶中，准确加入“2.2.2”项下制备的内标溶液 1.5 mL，石油醚定容至刻度，摇匀，照“2.1”项下色谱条件下分别在 0、3、6、12、24 h 进样测定，结果 RSD 值为 0.85%，表明供试品溶液在 24 h 内稳定。2.6 重复性试验精密量取 5 份“2.2.4”项下制备的“1”号降香挥发油溶液 1.5 mL，置 5 mL 量瓶中，分别加入 1.5 mL“2.2.2”项下制备的内标溶液，石油醚溶解并定容至刻度，摇匀，照“2.1”项下色谱

11、条件进样测定，RSD 值为 1.01%。2.7 加样回收率试验精密量取 5 份 1.5 mL“2.2.2”项下制备的内标溶液分别置 5 mL 量瓶中，分别精密加入 0.8 mL“2.2.4”项下制备的降香挥发油溶液“1” ，分别加入“2.2.3”项下制备的对照品溶液 0.7、0.8、0.9、1.0、1.1 mL，石油醚稀释至刻度，摇匀，照“2.1”项下色谱条件进样测定，计算得平均回收率为 98.81%，见表 1。表 1 反式苦橙油醇加样回收率试验结果（略）2.8 不同商品来源降香中反式苦橙油醇的含量测定分别取“2.2.4”项下配制的 9 个不同商品来源的样品溶液各 1.5 mL，分别置 9 个

12、 5 mL 量瓶中，分别加入内标溶液 1.5 mL，石油醚溶解并定容至刻度，摇匀，测定，结果见表 2。从表 2 可见，9 个不同商品来源降香药材中挥发油的提取率最高为2.70%；最低为 1.01%，差别较大；挥发油中反式苦橙油醇的含量最高为53.03%，最低为 40.35%。表 2 不同商品来源降香药材挥发油及反式苦橙油醇含量测定结果（略）3 讨论本文结果表明，9 个不同商品来源的降香挥发油的含量差别较大，挥发油中反式苦橙油醇的含量也有差别。在本文实验的基础上，作者对 10 个厂家生产的含有降香药材的香丹注射液进行了反式苦橙油醇含量的测定，结果显示 2 个厂家的产品均未检出反式苦橙油醇，并且各

13、产品之间，反式苦橙油醇的含量差别也有 10 倍之多，相关研究正在进行中。因此，在临床及中药复方制剂选用降香时，应尽量选择来源稳定、质量可控的道地药材，并对其挥发油和反式苦橙油醇的含量同时进行测定，以此控制降香及其复方制剂的质量，保证临床疗效。【参考文献】1国家药典委员会中华人民共和国药典：2005 版一部M.北京：化学工业出版社，2005：158.2梁汉明，郭晓玲，冯毅凡，等.HPLC 法测定不同产地降香中橙花叔醇的含量J.药物分析杂志，2007,27(3):361-363.3李奉勤，田志国，史冬霞，等.正交试验探讨降香挥发油的最佳提取条件J.中国实验方剂学杂志，2004,11(4):23-24