1、血细胞分析仪与镜检法检测低值血小板结果比较分析【摘要】 目的 就血细胞分析仪与镜检法计数低值血小板结果进行比较分析。方法 选取低值血小板患者血标本，用仪器进行血小板计数，同时血涂片间接计数血小板并观察形态，以人工镜检法为参考。结果 镜检结果同仪器结果存在显著差异（P0.05） 。结论 对低值血小板结果及仪器有错误提示或 PLT 直方图异常时，要进行手工复检或重新采血检测。 【关键词】 血细胞分析仪 镜检法 低值血小板 比较 血小板计数是血液检查的一个重要指标，特别是对血小板减少的患者，血小板计数是临床决定是否进行血小板输注的重要参考指标，因此准确计数血小板显得尤为重要。现在，就 COULTER
2、 LH750 计数低值血小板并与显微镜检进行比较分析，以评价低值血小板计数的准确性。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 标本 选取 2009 年 6-10 月住院患者标本 100 例，年龄2-68 岁，男性 67 例，女性 32 例。血小板均50109/L。 1.1.2 仪器 血液分析仪 COULTER LH750,OLYMPUS 显微镜。 1.1.3 试剂 贝克曼公司血球配套试剂及质控液，实验室自配瑞氏染液及草酸铵溶液（均按全国临床检验操作规程 （第二版）配制） 。1.2 方法 1.2.1 抽取患者 1.5mg/mlEDTA-K2 抗凝静脉血 3ml，每份标本制备血涂片各两张。 1.
3、2.2 LH-750 由厂家定期校准并参加省室间质评，成绩优异。仪器每天进行室内质控，结果均在控。 1.2.3 仪器血小板计数： 每份样本在仪器上均测定 2 次，记录结果（数据，错误提示及直方图） ，求其均值。实验在采血后两小时之内完成。 1.2.4 血涂片分析：涂片经瑞氏染色，选择厚薄适宜区，计数1000 个红细胞并同时计数所见血小板，求得血小板/红细胞之比值。再将此值红细胞数，求得血小板数，并观察血小板及红细胞等形态1。 1.2.5 血小板计数参考方法：WHO 推荐血小板计数方法：取 20ul血加入 10g/L 草酸铵稀释液 0.38ml，溶血 10mim 后充入计数板放置30min，用显
4、微镜计数中央大方格四周 4 个中方格和中央 1 个中方格中血小板数。当血小板特别少时，仅计数中央整 1 大格，此操作均由有经验的检验员用双盲法计数，取两次结果的均值。 1.2.6 统计学方法：各项数据用 S 表示，组间比对采用 t 检验，检验水准 =0.05。 2 结果 2.1 仪器血小板计数后出现 R、曲线拟合不好及有报警提示病例占 65%。 2.2 血涂片观察红细胞及血小板形态，并依此分组，比较仪器法、血涂片法与镜检法结果，仪器法与镜检法计数结果差异有统计学意义（P0.05）,血涂片法与镜检法计数结果比较，大血小板组、小红细胞组、红细胞碎片组差别无统计学意义（P0.05） ，血小板聚集组差
5、别有统计学意义(P0.05). 3 讨论 3.1 血细胞分析仪是计数血小板的主要仪器,LH750 采用电阻抗法计数 2-20fl 的血小板数量，再拟合出一条 0-70fl 的曲线，目的是排除计数干扰，但条件不满足时，仪器不能给出拟合曲线，这时血小板数值后出现 R，通常导致 R 的原因有:出现异常形态的血小板，血小板发生聚集，存在细胞碎片如：红细胞碎片、血小板大小不一（输血后） ，电磁波或噪音干扰小孔计数等。 本实验结果表明，仪器曲线拟合不好或报警提示占 65%，血涂片镜检所见，大血小板、小红细胞、红细胞碎片及血小板聚集病例共 53%，说明在低值病理标本中干扰物质较常见，导致血小板计数结果出现偏
6、差，小红细胞、红细胞碎片的体积与血小板分布体积接近时，仪器识别不清将误认为是血小板，使检测结果偏高，而将大血小板误认为红细胞计数，将血小板凝集团块当作白细胞来计数，使计数假性减少2。 3.2 对血小板严重减少的患者，由于超出了电阻抗法检测血小板的线性范围，须用参考方法进行复检。本组资料显示，大血小板组、小红细胞组及红细胞碎片组，血涂片法与镜检法结果差异无统计学意义，采用血涂片法可反映患者血小板数量及形态特点。有人认为，采用血涂片计数血小板此法虽不十分精确，但可从另一侧面直观地“间接”计数血小板，还可观察血小板的大小、形态、有无聚集及聚集体大小等，是一种简单易行的方法3。但对血小板聚集组，血涂片
7、法与镜检法结果差异有统计学意义，可能与血小板聚集成团、血小板分布不均，导致计数较困难有关。 参 考 文 献 1 Kunicka JE,Fischer G,Murphy J,et al. Improved platelet counting: a proposed new reference procedure J. Brit J Heamat,2000,10(8):228-235. 2 TATSUMIN ,TSUDA I,FUNAHARA Y.Assessment of hematological data obtained by the aperture impedance method in blood from patients with thalassemia or hemoglobinpoathyJ.ICMR Ann,1998,8:49-60. 3 杨良.血涂片血小板计数方法的意义J.检验医学与临床，2009,1(6):17-18.
