梗阻性黄疸的微观机制.pptx

1、梗阻性黄疸的微观机制,及腺苷蛋氨酸作用机制解读,肝脏切面镜下视图,肝细胞电镜下视图,相邻肝细胞示意图,肝细胞的紧密连接,肝内解剖学关系,胆树内胆管细胞的不均一性,毛细胆管胆汁分泌的转运系统,独特的作用机制改善患者的情绪,大作用,大机制,安全性好,保护肝细胞膜保护细胞骨架,抗氧化，减少肝细胞损伤解毒，抵抗有害物质对肝细胞的损害修复肝细胞，改善膜流动性，提高Na+K+-ATP酶活性，修复细胞骨架等，改善肝细胞功能促进肝细胞再生抗肝纤维化，延缓肝病进程增加胰岛素敏感性，改善脂质代谢,CFDA批准用于妊娠期肝内胆汁淤积,转甲基转硫基转丙氨基,Teodoro Bottiglieri. S-Adenosy

2、l-L-methionine (SAMe): from the bench to the bedsidemolecular basis of a pleiotrophic molecule.Am J Clin Nutr, 2002;76(suppl):1151s-7s,腺苷蛋氨酸独特360多重作用,内容纲要,3：三大作用机制6：六重临床获益作用0：良好的临床安全性,SAMe是存在于人体组织的一种生理活性分子,SAMe 是存在于人体组织的一种生理活性分子，是由SAMe合成酶催化蛋氨酸和ATP而合成的。,S-腺苷甲硫胺酸的结构,思美泰说明书,腺苷蛋氨酸的代谢途径,12,ATP,腺苷蛋氨酸,蛋氨酸,

3、PPi,去羧基腺苷蛋氨酸,腐胺,亚精胺,精胺,亚精胺,转丙氨基,5甲硫腺苷,CH3,磷脂、神经递质DNA、蛋白质,转甲基,VB12,四氢 叶酸,甲基四氢叶酸,S腺苷同型半胱氨酸,半胱氨酸,转硫基,胱硫醚,半胱氨酸,谷胱甘肽,硫酸根,Teodoro Bottiglieri. Am J Clin Nutr, 2002;76(suppl):1151s-7s.,解毒，抗氧化,促进正常肝细胞再生,合成磷脂酰胆碱维持Na+-K+-ATP酶活性,调节细胞膜流动性,腺苷蛋氨酸的三大机制,腺苷蛋氨酸,甲基化合物,调节细胞膜流动性,聚胺合成(如亚精胺+精胺),促进肝细胞再生,转硫基,还原型谷胱甘肽,解毒，抗氧化,

4、转甲基,转丙氨基,3 大机制,机制,终产物,作用,1.Anstee QM , Day CP. S-adenosylmethionine (SAMe) therapy in liver disease: A review of current evidence and clinical utility.J Hepatol. 2012;57:1097-11092.Lu SC , Mato JM. S-adenosylmethionine in liver health,injury, and cancer. Physiol Rev .2012;92: 151515423.Williams AL,G

5、irard C,Jui D,et al.S-adenosylmethionine (SAMe) as Treatment for Depression: A Systematic Review. Clin Invest Med. 2005; 28 (3): 132139.4.思美泰产品说明书，H20140261,腺苷蛋氨酸的转甲基作用,腺苷蛋氨酸,CH3,激素,神经递质,细胞膜磷脂,核酸,蛋白,磷脂酰胆碱的合成膜磷脂的甲基化维持Na+K+ ATP酶活性,改善细胞膜的流动性，促进胆汁分泌,腺苷蛋氨酸的转硫基作用,腺苷蛋氨酸,腺苷同型半胱氨酸,谷胱甘肽,硫酸盐,同型半胱氨酸,牛磺酸,半胱氨酸,CH

6、3,抗氧化,胆汁酸的摄取,胆汁分泌,腺苷蛋氨酸的转丙氨基作用,鸟氨酸,腐胺,亚精胺,精胺,腺苷蛋氨酸,腺苷蛋胺,MTA,腺苷蛋氨酸,腺苷蛋胺,MTA,MTA：5-脱氧5-甲基硫代腺苷,促进正常肝细胞再生,腺苷蛋氨酸的六大作用,抗氧化，减少肝细胞损伤,解毒，抵抗有害物质对肝细胞的损害,修复肝细胞，改善膜流动性，提高Na+K+-ATP酶活性，修复细胞骨架，改善肝细胞功能,促进肝细胞再生,抗肝纤维化，延缓肝病进程,增加胰岛素敏感性，改善脂质代谢,* P0.05 vs单用乙醇组,Cabrales-Romero Mdel P,Mrquez-Rosado L,Fattel-Fazenda S,et al.

7、 S-adenosyl-methionine decreases ethanol-induced apoptosis in primary hepatocyte cultures by a c-Jun N-terminal kinase activity-independent mechanism. World J Gastroenterol .2006 March 28; 12(12): 1895-1904,腺苷蛋氨酸显著降低经乙醇处理肝细胞的ROS水平,腺苷蛋氨酸的六大作用-抗氧化，减少肝细胞损伤,活性氧物质（ROS）,ROS水平变化百分比（%）,腺苷蛋氨酸的六大作用解毒，提高内源性血清谷

8、胱甘肽水平，抵抗氧化应激,Teodoro Bottiglieri. S-Adenosyl-L-methionine (SAMe): from the bench to the bedside-molecular basis of a pleiotrophic molecule.Am J Clin Nutr, 2002;76(suppl):1151s-7s.,解毒，抗氧化,腺苷蛋氨酸,腺苷同型半胱氨酸,同型半胱氨酸,CH3,谷胱甘肽,DNA甲基化,与自由基和重金属结合,半胱氨酸,转化为无毒物质，排出体外,转硫基作用,腺苷蛋氨酸，修复肝细胞，促进内源性谷胱甘肽的生成，持续解毒抗氧化。,王雪明,魏荣

9、,李楠 等. 腺苷蛋氨酸治疗药物性肝损害疗效与血液中GSH变化关系.中国基层医药.2002；9(6):497-498,用腺苷蛋氨酸对14例因各种药物引起的肝损害患者给予治疗，连续静脉给药800mg/d，3周。观察谷胱甘肽水平变化情况,6.21,7.4,0,1,2,3,4,5,6,7,8,9,治疗前,治疗4周后,GSH(mmol/L),腺苷蛋氨酸的六大作用解毒，提高内源性血清谷胱甘肽水平，抵抗氧化应激,腺苷蛋氨酸的六大作用改善膜流动性，提高Na+K+-ATP酶活性,三组大鼠对照组n=6结晶氨基酸组n=6结晶氨基酸+思美泰组n=6,结果：结晶氨基酸组胆汁流动及Na+-K+-ATP酶活性较对照组均显

10、著降低（P均0.05），而加入思美泰后可恢复其胆汁流速及Na+-K+-ATP酶活性，提示思美泰通过保护细胞膜脂质环境维持正常肝脏细胞膜Na+-K+-ATP酶活性而改善胆汁形成和/或分泌。,Belli DC,Fournier LA,Lepage G ,et al.S-adenosylmethionine prevents total parenteral nutrition-induced cholestasis in the rat. journal of Hepatology 1994;21:18-23,*P0.025， VS control及Travasol+ SAMe*P0.005，VS

11、 control及Travasol+ SAMe Travasol:结晶氨基酸溶液,没有腺苷蛋氨酸 预处理的细胞图片可观察到：随着环孢霉素A浓度的增高，细胞内结构遭受严重破坏（细胞内结构不透明，呈现白色模糊状）；肌动蛋白含量较正常对照组显著下降，表明细胞骨架也遭受破坏。,次毒覃环肽荧光素标记的F-肌动蛋白微丝，共聚焦显微镜图片,Irene D. RomaN, Gerald D. Johnson , Roger Coleman.S-Adenosyl-L-Methionine Prevents Disruption of Canalicular Function and Pericanalicula

12、r Cytoskeleton Integrity Caused by Cyclosporin A in Isolated Rat Hepatocyte Couplets.Hepatology .1996;24(1):134-140,无SAMe预处理,腺苷蛋氨酸的六大作用有效保护细胞骨架微丝,CyA 组 (100 nmol/L）,CyA 组 500 nmol/L,CyA 组 500 nmol/L,CyA 组 (100 nmol/L）,对照组,经过腺苷蛋氨酸 预处理的细胞图片可观察到：细胞内结构显影透明，说明胞膜完整，胞内结构没有受到破坏。还有，肌动蛋白含量和正常对照组类似。说明腺苷蛋氨酸 有效保

13、护细胞骨架功能。,1mmol/L SAMe 预处理15 分钟后,微丝是细胞骨架组成部分。此研究中F-肌动蛋白微丝含量由双细胞连接处荧光量/总荧光量算得。,腺苷蛋氨酸的六大作用 保护细胞骨架微管,2h亚砷酸钠10MSAMe 17nM,对照,SAMe,亚砷酸钠,亚砷酸钠+SAMe,亚砷酸钠处理的细胞微管形态紊乱；同时用腺苷蛋氨酸处理的细胞则保留有正常的微管形态，同正常对照组。,成纤维细胞荧光显微镜,人体细胞实验中腺苷蛋氨酸逆转亚砷酸钠和其他细胞骨架损伤物质引起的微核形成。,Ramrez T,Garca-Montalvo V,Wise C ,et al.S-Adenosyl-L-Methionine

14、 is able to reverse micronucleus formation induced by sodium arsenite and other cytoskleton disrupting agents in cultured human cells. J Mutat Res. 2003 Jul 25;528(1-2):61-74,Milan Holeceka, Frantisek Skopeca, Ludek Spronglb. Influence of Buthionine Sulfoximine, S-Adenosylmethionine and Glutathione

15、on Liver Regeneration Following Partial Hepatectomy. Arzneim.-Forsch./Drug Res. 2000; 50 (II):1093-1098,腺苷蛋氨酸的六大作用 促进肝细胞再生,SAMe在早期即显著增加肝细胞有丝分裂活性，而外源性GSH反而抑制肝细胞再生,PH：部分肝切；B：缓冲液 ; SAM：腺苷蛋氨酸 ; GSH,：谷胱甘肽; BSO：丁硫氨酸亚砜胺,*P0.05， vs.剖腹手术P0.05， vs PH+B#P0.05，PH+BSO+GSH或PH+BSO+ SAMe vs PH+BSO,*,25,腺苷蛋氨酸对初代培养的肝

16、星状细胞形态学的影响,未处理对照培养液 培养4d,添加5mM腺苷蛋氨酸 培养4d,肝星状细胞活化增殖,肝星状细胞趋于静止,Matsui H, Kawada N.Effect of S-adenosyl-l-methionine on the activation, proliferation and contraction of hepatic stellate cells. European Journal of Pharmacology. 2005;509: 31 36,从完整鼠肝中分离的新鲜肝星状细胞用加入10%胎牛血清/DMED(二甲基甲酰胺)培养24小时后，分为对照组和处理组继续培养

17、。a图：未处理对照培养液 培养4d；b图：添加5mM腺苷蛋氨酸 培养4d,腺苷蛋氨酸的六大作用延缓纤维化进程抑制肝星状细胞的活化,1.Zhenyuan Song, Shirish Barve,Theresa Chen. S-adenosylmethionine (SAMe) modulates endotoxin stimulated interleukin-10 production in monocytes.Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol.2003;284: G949G9552.李丹,张丽娟,陈治新.实验性大鼠肝纤维化进程中TNF一01、IL

18、6与IL一10的作用. 世界华人消化杂志.2001;(9):1242-1245,* P0.05,腺苷蛋氨酸组IL-10浓度明显增高,*,腺苷蛋氨酸的六大作用抗纤维化提高IL-10浓度,在RAW264.7的胞株中，使用脂多糖刺激后，观察加入/不加入腺苷蛋氨酸后IL-10水平。注：IL-10主要由TH2细胞，巨噬细胞，星状细胞，肝细胞等产生，有证据表明IL-10通过多种途径阻止纤维化进程，予以外源性IL-10对CCL4诱导的肝纤维化有明显的拮抗作用。,IL-10：白介素-10,*,1.Henar Hevia,1 Marta Varela-Rey,1 Fernando J, et al.5-Meth

19、ylthioadenosine Modulates the Inflammatory Response to Endotoxin in Mice and in Rat Hepatocytes .Henar Hevia, HEPATOLOGY.2004;39(4):1088-10982.李丹,张丽娟,陈治新.实验性大鼠肝纤维化进程中TNF一01、IL6与IL一10的作用. 世界华人消化杂志.2001;(9):1242-1245,TNF-：肿瘤坏死因子， LPS：脂多糖， MTA：5-甲硫腺苷,* P0.05 * P0.01 vs 单用LPS,腺苷蛋氨酸的代谢产物MTA可显著抑制LPS所致TNF-

20、浓度,腺苷蛋氨酸的六大作用抗纤维化抑制肿瘤坏死因子-（TNF-）,注：TNF-是在肝纤维化研究中最早受到关注的细胞因子之一，通过多种途径参与肝纤维化的调控，作为重要的刺激原使肝星状细胞活化。,1500,1250,1000,750,500,250,0,TNF-(pg/ml),*,*,*,*,腺苷蛋氨酸增加mtDNA密度，改善胰岛素敏感性,Increases skeletal muscle mitochondrial DNA density and whole body insulin sensitivity,腺苷蛋氨酸的六大作用增加胰岛素敏感性,mtDNA：线粒体DMA,腺苷蛋氨酸改善糖尿病大鼠

21、的胰岛素敏感性,Cheng Ji Jin,Hyeong Kyu Park, Young Min Cho,et al. S-adenosyl-L-methionine increases skeletal muscle mitochondrial DNA density and whole body insulin sensitivity in OLETF rats. J Nutr.2007;137(2):339-44.,采用自发性2型糖尿病伴胰岛素抵抗大鼠模型研究思美泰对于mtDNA密度的影响,LEFO：非糖尿病大鼠OLETF：2型糖尿病大鼠伴胰岛素抵抗模型OLETF-SAM:2型糖尿病大鼠伴

22、胰岛素抵抗模型加用思美泰OLETF-SAM葡萄糖输注率高于OLEFT对照组,.,P0.05,腺苷蛋氨酸改善糖尿病大鼠mtDNA密度,OLETF-SAM,1.Jin CJ,Park HKCho YM,et al. S-adenosyl-L-methionine increases skeletal muscle mitochondrial DNA density and whole body insulin sensitivity in OLETF rats. J Nutr.2007;137(2):339-442.时丽丽，张莉，谭初兵 等.线粒体功能损伤与胰岛素抵抗J .中国药理学通报，2012

23、；28（11）：1481-1486,mtDNA密度与胰岛素敏感性正相关,腺苷蛋氨酸改善糖尿病大鼠的胰岛素敏感性,线粒体内的核蛋白主要由mtDNA控制转录表达。线粒体主要功能是代谢体内糖脂类物质，产生ATP和热量。mtDNA相关的线粒体功能损伤可能会引起胰岛素抵抗及相关代谢类疾病。,含量,注：同一时间点字母不同，代表P0.05,葡萄糖输注率mg/kg/min,FXR：一种多功能的核体，医学分子生物学杂志，2008，5（6）：529-534,肝脏细胞中胆汁酸的解毒 (如: SULT2A1、UGT284、BACS、BAT),包括胆汁酸氧化、硫酸盐化和糖苷化胆汁酸和磷脂从肝细胞向胆小管的分泌 (如:B

24、SEP、MRP2、MDR3)胆汁酸在肝肠循环中的转运（如:ASBT、IB. ABP、OST、OST、NTCP),腺苷蛋氨酸调控胆汁酸代谢,FXR多种途径调节胆汁酸代谢,在大鼠模型中诱导 IHC48h后，分别采用腺苷蛋氨酸及FXR受体激动剂GW4064治疗，腺苷蛋氨酸（60mg/kg/d）显著改善了血清胆红素，胆汁酸及肝酶， 并显著上调了FXR表达。同时，腺苷蛋氨酸还上调了BSEP, MRP2和NTCP的表达,腺苷蛋氨酸调控胆汁酸代谢,实验设计：采用-萘基异硫氰酸酯诱导IHC大鼠模型，分别采用腺苷蛋氨酸及FXR受体激动剂GW4064治疗，检测血浆胆红素、胆汁酸、肝酶, FXR, 胆汁盐出口蛋白质

25、 (BSEP)，多重耐药相关蛋白2 (MRP2) 和Na+牛磺胆酸盐协同转运多肽 (NTCP),Mao H, et al, APDW 2014, Nov. Post presentation,六大作用,抗氧化，减少肝细胞损伤思美泰显著降低经乙醇处理肝细胞的活性氧物质（ROS）水平。促进内源性谷胱甘肽的生成，持续解毒抗氧化。解毒，抵抗有害物质对肝细胞的损害。促进内源性谷胱甘肽的生成，持续解毒抗氧化。修复肝细胞，改善膜流动性，提高Na+K+-ATP酶活性，修复细胞骨架等，改善肝细胞功能保护细胞膜：思美泰通过保护细胞膜脂质环境，维持正常肝脏细胞膜Na+-K+-ATP酶活性而改善胆汁形成和/或分泌。保

26、护细胞骨架：预防环孢霉素A(CyA)所致胆管功能破坏；减少细胞骨架破坏药物所致微核细胞形成；保护微管完整。促进肝细胞再生腺苷蛋氨酸在早期即显著增加肝细胞有丝分裂活性。抗肝纤维化，延缓肝病进程可抑制肝星状细胞的活化。腺苷蛋氨酸通过抑制TNF表达，促进IL-10表达，从而抑制炎症，对抗肝纤维化。增加胰岛素敏感性，改善脂质代谢思美泰增加mtDNA密度，改善胰岛素敏感性,1.思美泰（腺苷蛋氨酸）说明书，H201402612.G.Manzillo, F,Piccinino, C.Surrenti,et al. Multicentre Double-Blind Placebo-controlled Stu

27、dy of Intravenous and Oral S-Adenosyl-L-Methionine (SAMe) in Cholestatic Patients with liver disease. Drug Investigation.1992;4(Suppl.4): 90-100,腺苷蛋氨酸安全性良好,SAMe 作为存在于人体组织的一种生理活性分子，循内源性S-腺苷蛋氨酸的途径代谢1妊娠期：可用于妊娠期肝内胆汁淤积1与安慰剂比较，不良反应发生率无显著差异2,腺苷蛋氨酸与情绪改善,1. Jonathan E. Alpert, MD, George Papakostas, MD, Davi

28、d Mischoulon, MD,et al. S-Adenosyl-L-Methionine (SAMe) as an Adjunct for Resistant Major Depressive Disorder Journal of Clinical Psychopharmacology . 2004;24(6):661-42.Alvaro L, Garcia-Garcia , Adrian Newman-Tancredi, et al.P5一HTI A receptors in mood and anxiety:recent insights into autoreceptor ver

29、sus heteroreceptor functionJ.Psychopharmacology. 2014;231;623-6363.王-歌，邹士辉，胡晔等腺苷蛋氨酸治疗酒精性肝病合并抑郁症45例临床疗效观察中国实用医学2011，6（16）,补充外源性的腺苷蛋氨酸可能促进5一HIAA合成。,抑郁患者脑脊液中五羟色胺（5-HT）代谢产物5-HIAA（5羟色胺的代谢产物）浓度越低，抑郁程度越重。,5-羟色胺是受到广泛研究的神经递质。大量的证据表明，5-羟色胺神经传递的失调与焦虑和抑郁密切相关。大量研究提示 5-HT1 A亚型参与焦虑和抑郁障碍发生。,SAMe多重作用，全面获益,Teodoro Bo

30、ttiglieri. S-Adenosyl-L-methionine (SAMe): from the bench to the bedsidemolecular basis of a pleiotrophic molecule.Am J Clin Nutr, 2002;76(suppl):1151s-7s,3：三大机制：转甲基，转硫基，转丙氨基6：六重作用：解毒抗氧化修复肝细胞（改善细胞膜流动性和修复细胞骨架）促进肝细胞再生抗纤维化增加胰岛素敏感性0：安全性良好补充外源性的腺苷蛋氨酸可能促进5一HIAA合成，患者使用后情绪得到改善,解毒、抗氧自由基,抗纤维化,提高Na+-K+-ATP酶活性,

31、抗炎症介质、细胞因子,增加膜的流动性,促进肝细胞再生,1. Teodoro Bottiglieri. S-Adenosyl-L-methionine (SAMe): from the bench to the bedside-molecular basis of a pleiotrophic molecule.Am J Clin Nutr, 2002;76(suppl):1151s-7s.2. 杨静, 王旻, 韦平和. S-腺苷甲硫氨酸的临床及药理研究进展.药学进展.2001;25(3):164-1673. Mato JM, Lu SC. Role of S-adenosyl-L-methio

32、nine in liver health and injury. Hepatology. 2007;45(5):1306-12.4. Holecek M, Skopec F, Sprongl L. et al. Influence of buthionine sulfoximine, S-adenosylmethionine and glutathione on liver regeneration following partial hepatectomy. Arzneim-Forsch/Drug Res. 2000;50(II):1093-10985. Tsuruoka N, Abe K, Wake K, et al. Hepatic protection by glycyrrhizin and inhibition of iNOS expression in concanavalin A-induced liver injury in mice. Inflamm Res. 2009;58(9):593-9.,思美泰的保肝机制,多烯磷脂酰胆碱,还原型谷胱甘肽,甘草酸制剂,思美泰,14,谢 谢,