药理学实验课.ppt

1、药理学实验课,药理教研室,药学专业实验课程安排,（1）实验基本技能,（2）不同给药途径对药物的影响,（4）药物对家兔离体肠平滑肌的作用,（5）吗啡镇痛实验,（3）药物抗炎实验,足肿胀法,耳片法,热板法,扭体法,临床医学（本）实验课程,（1）实验基本技能,（2）不同给药途径对药物的 影响,（5）药物对家兔离体肠平滑肌的作用,（7）药物对肠推进实验的影响,（4）吗啡镇痛实验,（3）药物抗炎实验,（8）药物对家兔心电图的影响,（6）药物对家兔动脉血压的影响,实验课程学习要求,实验课程学习目的,药理学实验一、基本实验操作看短片,实验报告,标题实验目的：实验原理：实验器材：实验方法：结果：讨论：结论：,

2、二、不同给药途径对 药物的影响,实验目的：掌握小鼠给药的基本方法。 比较不同给药途径药物起效的时 间快慢实验原理：不同的给药途径药物吸收不同,1,实验动物：小鼠实验器材：0.4%戊巴比妥钠、1ml注射器、 1ml灌胃器。,2,取6只小鼠，称重、分组、标记 给0.4戊巴比妥钠（腹腔、皮下、灌胃） （0.1ml/10g） 观察小鼠翻正反射消失及恢复的时间 分析、比较实验结果,计时,（1）注意给药途径的正确操作。 （2）注意小鼠翻正反射消失时间判定 （1min）。,4,仔细观察记录实验结果，结合药理学总论知识思考，何种给药途径起效最快。为什么？,药理学实验 二、抗炎实验 1、大鼠足肿胀法 2、小鼠耳

3、片法,1、大鼠足肿胀法,1.1 实验目的： 学习利用鸡蛋清制急性炎症动物模型方法。 观察糖皮质激素的抗炎作用。1.2 实验原理：鸡蛋清为异性蛋白，可致动物急性炎症，出现局部肿胀，容积增加。比较給药组与对照组动物局部容积的变化，从而观察到药物的抗炎作用。,1,和,实验动物：大鼠（雄性） 实验药物：0.5%氢化可的松、10%鸡蛋清、生理盐水 主要仪器：（PV-200足趾肿胀测定仪）,大鼠两只：称重、标记,甲、乙二鼠右踝关节的突起点处用笔划线作为测量标志，测定大鼠正常足容积(见后图),动物,给药30min， 从右后足掌心向掌跖关节方向进针，皮下注射10%新鲜蛋清0.1ml。 (见后图),注射蛋清后1

4、5min、30 min、45min、，测量右后足的体积，记录数据。 计算肿胀率=（药后-药前体积）/ 药前体积100%,甲（给药组）：腹腔注射0.5%氢化可的松溶液 0.3ml/100g 体重乙（对照组）：腹腔注射生理盐水0.3ml/100g 体重,计时,皮下注射新鲜蛋清,抗炎实验中动物性别的选择：雄性测定大鼠足体积时，选定统一测量位置（大鼠足外踝关节突起）注意测量时别把鼠足插得过深，避免测量杯中水溢出，影响准确性。大鼠捉拿时别捉得过紧，避免其窒息死亡。鸡蛋清现配现用。,2、小鼠耳片法,2.1 实验目的： 学习利用化学药物刺激制急性炎症动物模型方法。 观察糖皮质激素的抗炎作用。2.2 实验原理

5、：化学刺激物，可致动物急性炎症，出现局部肿胀，重量改变，比较給予药物前后动物局部肿胀程度的变化从而观察到药物的抗炎作用。,和,实验动物：小鼠（雄性） 实验药物：0.1%地塞米松、二甲苯、 生理盐水 主要仪器： 分析天平、打孔器、手术剪等,小鼠4只，称重、标记,四只分二组,30min后用二甲苯0.05ml均匀涂抹每只鼠的右耳,涂抹45min后小鼠脱臼处死，分别用打孔器取相同部位左右耳片，电子天平称重。计算： 右耳-左耳=肿胀度； 肿胀率=（右耳-左耳）/左耳100%,给药组：腹腔注射0.1地塞米松 0.1ml/10g 体重对照组：腹腔注射生理盐水0.1ml/10g 体重,计时,抗炎实验中动物性别

6、的选择：雄性小鼠耳廓滴加二甲苯时，正反面均匀涂抹。避免滴入耳廓内。小鼠左右耳打耳片位置统一（耳廓中间部位）。使用打孔器注意：1、安全；2、别打硬物。注意时间合理分配。,4,本实验中选择雄性动物的原因？,药理学实验四、药物对家兔离体肠平滑肌的作用,药物对家兔离体肠平滑肌的作用,浴槽实验前准备(预热）：,1、领取器材,2、浴槽内加水,3、测定筒内加液,4、接通电源,5、按压温度调节旋钮,6、调温为37,1.1 实验目的： 学习离体平滑肌器官的实验方法。 观察拟胆碱药和抗胆碱药对离体家兔肠平滑肌的作用。1.2 实验原理：乙酰胆碱通过激动M受体兴奋胃肠平滑肌；阿托平可阻断M受体；氯化钡直接兴奋胃肠平滑

7、肌。,1,和,实验动物：家兔 实验药物：乙酰胆碱溶液（1/10万）、0.1% 硫酸阿托品溶液、1% 氯化钡溶液 实验试剂：台氏液 主要仪器：离体平滑肌槽（浴槽）,在浴槽（大试管）中，加入台氏液70ml （标线处），加热，维持水370.5 。,3,3,斜角在上,取家兔一只，颈椎脱臼处死。,立即打开腹腔，找到幽门部，分离十二指肠，以2cm左右穿线，分段结扎，剪取肠段（一只兔取三段）。,每组取一肠段，在上下结扎线内侧边缘各剪一小口。肠段贯通。,3,将肠段，一端连结通气钩，置测定管（麦氏浴槽）中。另一端连结张力换能器弹簧片上。上下调节双凹夹，控制张力的大小。,3,打开气量调节旋钮，让气泡缓慢通入，1-

8、2个气泡/秒即可。,打开电脑，点击桌面中BL-420图标，进入主菜单，点击工具栏上的“实验项目”，消化道实验，消化道平滑肌生理特性（2）,双击,正常曲线,乙酰胆碱,阿托品,乙酰胆碱,1. 肠管稳定10分钟，记录一段正常活动曲线 。,2. 加入1:10万乙酰胆碱溶液0.2ml，记录其收缩幅度，待收缩明显后。,3. 立即加入0.05% 硫酸阿托品0.2ml。观察结果。,4. 平滑肌收缩曲线稳定后，再次加入1:10万乙酰胆碱溶液0.2ml ，结果与（1）相比较，观察结果有何不同。,3,5.加入1% 氯化钡溶液0.2ml，观察实验结果。,3,6.待作用明显后，加入0.05% 硫酸阿托品溶液0.2ml，

9、再次观察结果。,反演窗口及剪辑,1拖,2点击,剪辑板（同时复制）,冲洗和分离肠管时动作应轻柔，尽量避免牵拉肠管。 如需换液，台氏液液面高度及温度应与以前保持一致。加药时不要把药液直接加到标本上，以免影响结果。 浴温和肠肌的张力均可影响实验结果，应注意调节。,4,实验中能影响离体肠肌收缩活性的必要条件有哪些？,药理学实验 三、吗啡镇痛实验,实验目的： 掌握镇痛药的实验方法 （热板法、扭体法） 观察药物的镇痛作用实验原理：热刺激或者化学刺激物使小鼠 产生不同的疼痛反应，观察给 药前后小鼠疼痛反应的变化。 （痛阈值、扭体次数）,1,实验动物：小鼠（热板法中小鼠为雌性） 实验药物： 0.1%吗啡 实验

10、试剂：0.1酒石酸锑钾（或0.7%冰醋酸）、生理盐水 主要仪器：热板测痛仪（RB-200智能热板仪）,2,打开实验仪器、设定温度（55）,动物初筛（选出四只），称重，合格动物分二组,测定药前痛阈值。,给药组：腹腔注射0.1%吗啡 0.1ml/10g体重对照组：腹腔注射生理盐水 0.1ml/10g体重,给药后15min、30min、45min再次测定各组小鼠痛阈值1次。,实验数据记录、整理、分析,二组,痛阈值即小鼠出现疼痛反应的时间。（以小鼠添后足作为出现疼痛观察指标。）筛选指标以痛阈值大于5秒，小于30秒，做为筛选合格动物。药前痛阈值测定2次痛阈值， 2次间隔时间5min，取平均值，为给药前正

11、常痛阈值。,返回,吗啡热板法镇痛结果,用药后平均痛阈值-用药前平均痛阈值 用药前平均痛阈值 组别 剂量（mg/kg） 动物数 药前痛阈值（s） 药后痛阈值(s) 药后痛阈值提高百分率(%) 15min 30min 45min 15min 30min 45min 生理盐水组 0.1ml/10g 2 0.1%吗啡组 0.1ml/10g 2,痛阈值提高百分率=,100%,b,四只小鼠随机分二组,给药组：腹腔注射0.1%吗啡 0.1ml/10g体重对照组：腹腔注射生理盐水 0.1ml/10g体重,各组小鼠均腹腔注射0.7%冰醋酸（0.1%酒石酸锑钾）0.2ml/只,记录各组小鼠潜伏期、15min内的扭

12、体次数,小鼠扭体反应,（给药出现扭体时间）,30min后,吗啡对小鼠的镇痛作用（扭体法）,注：疼痛潜伏期超过15mim，以15mim（900s）计。,热板仪温度设定：550.5 室温 :以15 20C为宜 热板法中动物性别的选择：雌性痛阈值判定指标：添后足初筛：（5s 痛阈值时间 30s）。 超过60s动物未添足，将动物取出，痛阈值以60s计算实验中保持小鼠足底及热板内干净、干燥。热板仪测量中注意：及时盖鼠盒盖，避免温度散失。扭体法实验中观察：潜伏期：以注射刺激物到出现疼痛反应（开始腹部凹陷或扭体）计时。扭体次数：只数扭体反应的次数。酒石酸锑钾、冰醋酸现用现配,4,药理学实验 八、药物对家兔动

13、脉血压的影响,1.1 实验目的： 学习麻醉动物急性血压实验的方法 。 观察传出神经药物对动物血压的影响 。1.2 实验原理：盐酸肾上腺素溶液 、酚妥拉明溶液等药物能与心肌或者血管平滑肌上的相应受体结合，从而影响家兔的血压。,1,和,实验动物：家兔 实验药物： 肝素生理盐水液(500ml 生理盐水加肝素12ml)、1.5%戊巴比妥钠溶液、 0.01%肾上腺素溶液、 0.1%酚妥拉明溶液。,和,主要仪器： 压力换能器1台、BL-420生物机能实验系统1套、手术刀1把、手术剪1把、止血钳2把、眼科剪1把、三通2个、气管插管1个、动脉插管（留置针）1根、动脉夹1个、输液针1根、20ml注射器1个、5m

14、l注射器1个、1ml注射器3个、烧杯1个、纱布1块、丝线等。,家兔称重，找到耳缘静脉，用输液针，耳缘静脉注射1.5%戊巴比妥钠2ml/kg，麻醉。（固定输液针，建立静脉输液通道）注入适量肝素生理盐水液（冲洗管道并防凝血）。,将动物背位固定于手术台上，剪去颈部的毛，颈正中切口，分离气管，（作一倒“T”形切口，插入气管插管，结扎固定。据情况可免）。,3,分离气管 气管插管,留置针管与压力换能器相连（充满肝素生理盐水）并连接在生物信号采集系统一通道上；在气管一侧的颈动脉鞘内分离颈总动脉（注意有迷走神经伴行，应将其与颈总动脉分离）。颈总动脉近心、远心端各穿一根线，远心端结扎；然后用动脉夹夹住近心端，在

15、靠近远心结扎处，向心方向，剪一V字型口，插入充满肝素生理盐水液动脉插管，结扎近心端，固定于动脉插管小叉上。慢慢松开颈总动脉夹，描记正常血压曲线。,3,在气管一侧的颈动脉鞘内分离颈总动脉，进行颈总动脉插管,分离得到颈总动脉,颈总动脉插管,连接压力换能器后，打开电脑，点击桌面上的BL-420图标，进入血压实验系统。,3,描记正常血压曲线静脉注射0.01%肾上腺素0.15ml/kg，描记血压曲线。恢复正常后，静脉注射0.1%酚妥拉明（0.15ml/kg) ，描记血压曲线。恢复正常后，再次静脉注射0.01%肾上腺素0.15ml/kg，描记血压曲线。注：每次注射药物后都需推注适量肝素生理盐水液冲洗。,作

16、用于、受体的药物,3,建立静脉通道时，输液针一定要固定好，防止动物挣扎时滑脱，每次给药后都药用适量肝素生理盐水液冲洗。 随时注意插管位置，特别在挣扎时，避免扭转而阻塞血流或刺破血管。两次给药之间须等待血压恢复正常。,4,3、先加入酚妥拉明再加入肾上腺素，血压的变化情况与第一次加入肾上腺素有何变化？为什么？,五、传出神经系统药物对小鼠胃肠推进实验的影响,实验目的：掌握小鼠胃肠推进实验基本方法。 比较拟胆碱药、抗胆碱药的作用。实验原理：胃肠兴奋，蠕动增强，小肠中的碳墨运行长；反之运行短。,1,实验动物：小鼠（各半）实验药品、器材：0.05%阿托品、0.001%新斯的明、10%活性炭混悬液、生理盐水

17、。 1ml注射器3支、灌胃针1支、直尺1把、手术剪1把、培养皿1个、苦味酸及棉签。,2,取6只小鼠（各半），称重、标记、分三组 甲组：ip 0.05阿托品 0.2ml/只 乙组：ip 0.001%新斯的明 0.2ml/只 丙组：ip 生理盐水 0.2ml/只 灌胃 10%活性炭悬液0.2ml/只 处死动物，打开腹腔，取出小肠测量小肠全长和碳末运行距离,10min后,15min后,幽门,碳末运行率 =,幽门至远端碳末处距离,小肠全长,100%,【结果】,1、碳末灌胃量、小鼠处死时间必须准确。2、取出小肠后，先用水浸湿，平铺在桌上可免与台面粘连。3、剪取肠道时必须避免强行牵拉，否则将影响长度的准确

18、性。,药理学实验,六、利多卡因抗氯化钡 诱发家兔心律失常,1.1 实验目的： 家兔心电图导联的实验方法. 观察利多卡因的抗心律失常作用。1.2 实验原理：氯化钡具有加速钠离子内流的作用， 自律性，引起心律失常。利多卡因抑制钠离子内流自律性，抗心律失常。,1,和,实验动物：家兔，体重2 3kg 实验药物： 20%乌拉坦、0.2%利多卡因、0.5 %氯化钡、150U/ml肝素生理盐水。主要仪器：电脑、BL-420E生物机能实验系统、三心线、三通1个、输液针1根、5ml注射器2支、20ml 10ml注射器各1支、胶布。,1、 取家兔1只，称重。用输液针经耳缘静脉注射20%乌拉坦6 ml/kg，并推注

19、适量肝素生理盐水液，麻醉 。固定在兔板上。,3,2、用三线心电连线，分别在右前肢（白色），左后肢（红色），右后肢（黑色）皮下插入针形电极（肢体导联）。3、在1通道插口连接计算机，并开机。选择输入信号通道1动物心电（G =1000 T =0.1S F =300HZ）。4、描记正常心电图。作药物（利多卡因）的准备。,4,5、由静脉注射0.5氯化钡0.5ml/kg。立即描记心电图，心律失常出现后，立即静脉注射0.2利多卡因1ml/kg，描记心电图的变化。 记录、分析结果。,5,附：常见心电图表现,1、正常窦性心律,2、阵发性室性心动过速,3、扭转性室性心动过速,4、房室完全传导阻滞,5、心室扑动与心

20、室颤动,1】每次给药后，用适量肝素生理盐水液冲洗,并防凝血堵塞针头。2】针形电极不能插入肌肉，否则肌电干扰。,6,九、药物对动物自发活动的影响,目的： 1、观察安定对小白鼠自发活动的影响。 2、掌握小白鼠自发活动的实验方法。,材料,1、同性别小白鼠 4 只2、1ml注射器2支3、ZZ-6小白鼠自发活动测试仪1台4、药品：0.05%安定、生理盐水、苦味酸溶液,ZZ-6小白鼠自发活动测试仪,测试仪使用,方法,1、取同性别，活动度相近小鼠4只。称重、编号，分成甲乙2组。2、分别放入自发活动测试仪反应箱的4个格内，使其适应5min。按“定时”按钮，设为5min。按“启动”按钮，测试给药前正常小鼠5mi

21、n内活动值。3、取出小鼠，甲组:ip 0.05%安定0.2ml/10g。 乙组:ip 等量生理盐水。4、再放回自发活动测试仪反应箱格内，同样方法每隔5min一次（测试5min内活动次数）。连续观察5次。,5、记录结果。,注意事项,1、测试过程中保持安静，别震动台面。2、各组测试中记住每次的数据。3、统计数据时，可以算出减少或增加的百分率。4、实验完成后，打扫卫生的同学，将测试仪的反应箱取出、洗净、擦干，放回机内。5、实验环境要求安静。有条件可在隔音室内进行。6、动物活动与饮食条件、昼夜及生活环境等有密切关系、观察自发活动最好各方面条件相近。7、动物宜事先禁食12小时，以增加觅食活动。,十、动物

22、盐酸肾上腺素半数致死量（LD50）测定,寇氏改良法,【实验目的】,通过实验，学习测定药物LD50的方法、步骤和计算方法。,【实验原理】,药物的致死量的对数值在50%致死量的上下形成正态分布，因此通过药物的对数剂量-动物的死亡率可求出LD50。从而反应药物的安全性。,【实验材料】,动物：小鼠药品：0.1%盐酸肾上腺素器材：注射器、天平、量筒、刻度吸管。,实验内容,1、预试验：以一个实验小组为单位完成。（约10只小鼠）（1）剂量范围（找出0%和100%死亡率的剂量范围）： 全死量Dmax （30内），每次取2只小鼠，用0.1%肾上腺素腹腔注射（全死参考剂量0.14ml/10g）,如全死，剂量减小1

23、.2倍直到不全死，则上一剂量为Dmax 。如非全死，剂量增加1.2倍直到全死，此剂量为Dmax。 全活量Dmin （30内），每次取2只小鼠，用0.1%肾上腺素腹腔注射（全活参考剂量0.05ml/10g）,如全活，剂量增加1.2倍直到非全活，则上一剂量为Dmin。如非全活，剂量减小1.2倍，直到全活，此剂量为Dmin 。（取本实验室6个组的全死量、全活量的平均值为最后值）,实验内容,确定公比：-公比；Dmax -最大剂量；Dmin-最小剂量；n-动物组数（6）。 =(Dmax/Dmin) 1/n-1 配制等比稀释液：C母液=Dmax/药的容积数（ml） 按公比逐级稀释成n组（6）。,实验内容,

24、2、正式试验：（以实验室为单位，每小组完成一个剂量组。） 每组取小鼠10只（各半），腹腔注射肾上腺素各稀释液，药的容积数（ml）/10g，记录30分钟内小鼠死亡数。完成后，各实验室统计全实验室各组的数据绘表、按公式计算。,LD50的计算,LD50= （ P：用小数表示的死亡率；Xm:最大剂量对数值； ：相邻两组剂量对数值之差； P:各组动物死亡率之和 ） LD50的标准误Sx50=（n:为每组动物数） LD50的95%可信限 =LD504.5LD50Sx50,修正计算,当最小剂量组的死亡率大于0而又小于30，或最大剂量组的死亡率小于100而又大于70时，可按下列校正公式计算： （式中Pm最大剂

25、量组的死亡率； Pn最小剂量组的死亡率。） LD50的标准误Sx50= （n:为每组动物数） LD50的95%可信限 =LD504.5LD50Sx50,(perfusion of frogs heart),十一、强心苷对离体蛙心活动的影响,【实验目的】1. 学习离体蛙心的灌流方法。2.观察强心苷对离体蛙心的作用。,【实验原理】青蛙的心脏离体后，把含有任氏液的蛙心套管插入心室，用这种人工灌流的方法保持心脏新陈代谢的顺利进行，以维持蛙心有节律地收缩和舒张。通过生物信号处理系统，记录心脏搏动情况。本实验采用离体蛙心，观察强心苷的强心作用。,【实验材料】 420生物机能实验系统、张力换能器、蛙类手术器

26、械、蛙心插管、试管夹、缝合线、蛙心夹、铁支架、滴管【实验药品】 任氏液、低钙任氏液（所含CaCl2量为一般任氏液的1/4，其它成分不变 ） 、0.02%去乙酰毛花苷(西地兰)、1% CaCl2。,【实验方法】,一、离体蛙心脏标本制备 1.破坏脑和脊髓，仰位固定于蛙板上。 2.剪开胸廓、心包膜，暴露心脏 3.蛙心插管,1.观察心脏的解剖结构,（腹面）,（背面）,3.1 分离主A干,在其下穿二条线，一条准备结扎A和蛙心插管。另一条准备结扎后腔静脉。3.2用蛙心夹夹住心尖，向上翻起，结扎后腔静脉，尽量向下结扎，避免扎着静脉窦。否则心脏停搏。扎完，恢复心脏原位。,蛙心插管,3.3 在主动脉根部剪一“V

27、”斜口，将插管插入动脉圆锥， 在心室收缩时将插管插入心室，结扎固定(成功，管内液面会上下波动)。分离周围组织，在结扎处远端剪断血管及组织，使心脏离体。并用任氏液连续换洗，至无血色。,蛙心插管,1.用试管夹将蛙心管固定在铁支架上。2.把张力换能器固定铁支架支台上，蛙心夹上的线如图绕过滑轮连于换能器弹簧片上，上下移动换能器或蛙心插管，调整线的松紧程度。换能器的信号线连于420生物机能实验系统1通道上，开机，描记曲线。,二、连接仪器和装置,三、仪器的使用,1、打开420生物机能实验系统后面的电源开关，指示灯亮。2、打开电脑，在桌面双击420生物机能实验系统图标，在工具栏中点击“输入信号”，选择1通道

28、，在子菜单中选择“张力”，再点击记录。,四、描记及给药,1、稳定510分钟，描记正常蛙心收缩曲线。2、用低钙任氏液换洗插管内任氏液两次，描记曲线的变化。3、当蛙心收缩明显减弱时，向插管内加入0.02%去乙酰毛花苷0.04ml ,描记曲线的变化。4、当作用明显时，再向套管内加入1%氯化钙溶液23滴，描记曲线的变化。,【实验结果】,注意：1、测定时，插管内液面保持相同高度，以保证心脏的固定负荷。 2、随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。 3、蛙心套管一定要插入心室。切勿用力过大，插入过深，损伤心肌。 4、结扎静脉时，要远离静脉窦（起博点）。,药理学实验,七、药物的利尿作用,1.1 实验目的： 学

29、习学习利尿的实验方法. 观察利尿药对尿量的影响。1.2 实验原理：呋塞米属高效利尿药，通过抑制髓袢升枝粗段对氯化钠的重吸收而达到利尿作用 。(与尿液生成生理过程相联系。),1,和,实验动物：家兔，体重2 3kg 实验药物： 1.5%戊巴比妥钠、1%呋噻米、 实验试剂：生理盐水 主要仪器：烧杯、膀胱漏斗、10 ml量筒。,1、 取家兔1只，称重，清水灌胃30ml/kg,3,2、30min后，用1.5%戊巴比妥钠2ml/kg经耳缘静脉注射麻醉,3、家兔背位固定于兔台上。耻骨联合前正中切开腹部皮肤46 cm，暴露膀胱。,4、分离输尿管，结扎尿道内口。在膀胱游离部作荷包缝合，然后剪开小口插入膀胱漏斗并

30、固定。,5、膀胱内注入生理盐水（或清水），使其充盈。记录10分钟正常尿量。,6.耳缘静脉注入药物： 呋噻米0.5ml/kg，观察并记录各药给药后10 min尿液滴数及尿量。,家兔麻醉过程中，控制麻醉药推注速度，密切观察实验过程中家兔情况。手术过程中，动作轻柔，以免损伤膀胱。准确找到输尿管，注意输尿管的生理比邻位置。,4,考试软件的使用说明,分二种题型1、单选题2、判断题,双击,输入01-30,单击,选择,点击,点击,1,2,3,4,点击,判断题,单选题,答题完成,点击,1,2,3,4,氯丙嗪加强麻醉药的麻醉作用,【实验目的】观察氯丙嗪加强麻醉药的麻醉作用，并联系其临床意义。【实验材料】5ml注

31、射器2支、兔固定盒、苦味酸、棉签。1%戊巴比妥钠溶液、0.25%盐酸氯丙嗪溶液；家兔2只；,【实验方法】1、取家兔2只，称重、标记分成甲乙两只。2、观察正常活动情况（角膜反射、肌肉紧张度、呼吸频率及深度、心率等）。3、甲兔耳缘静脉注射0.25%氯丙嗪1ml/kg; 乙兔耳缘静脉注射生理盐水1ml/kg。观察注射氯丙嗪后家兔的情况。4、10分钟后，甲乙两兔分别耳缘静脉注射1%戊巴比妥钠1.5ml/kg。观察两兔的麻醉情况有何差异。,【实验结果】,拟胆碱药与抗胆碱药对兔眼瞳孔的作用,【实验目的】观察拟胆碱药、抗胆碱药对瞳孔的作用并分析其作用机制。【原理】 M受体激动药通过激动瞳孔括约肌上分布的M受

32、体，使括约肌向中心方向收缩，开大肌(瞳孔辐射肌)张力不变，故瞳孔缩小； M受体阻断药通过阻断瞳孔括约肌上分布的M受体，使括约肌松弛，开大肌(瞳孔辐射肌)张力不变，故瞳孔散大。,【实验材料】 器材：兔固定箱、1ml注射器、测瞳尺、剪刀。 药品：1%硫酸阿托品溶液、0.2%硝酸毛果芸香碱溶液。动物：家兔,【实验方法】 1取家兔1只，放入兔固定箱内，剪去眼睫毛，在自然光线下测量并记录两眼正常瞳孔直径，然后按下列顺序给药(每眼4滴)：左眼滴1%硫酸阿托品溶液；右眼滴0.2%硝酸毛果芸香碱溶液。2滴药10min后，在同样强度的光线下，再分别测量并记录家兔左右眼瞳孔大小。如滴0.2%硝酸毛果芸香碱溶液的瞳

33、孔已明显缩小，则再滴硫酸阿托品，10min后再观测瞳孔变化。,【实验结果】将结果记录于下表中。,【注意事项】 1测量瞳孔勿刺激角膜，光照强度及角度须前后一致，否则将影响测瞳结果。2各眼滴药量要准确，在眼内停留时间要一致，以确保药液充分作用。3实验动物应为一周内未用过眼药者。,【思考题】通过实验结果分析阿托品与毛果芸香碱对眼瞳孔的作用有何不同？,氯丙嗪对阿扑吗啡引起激怒反应的影响,【实验目的】1、激怒实验中激怒模型的建立。2、氯丙嗪的抗精神病作用【实验材料】钟罩或鼠盒、1ml注射器、氯丙嗪、阿扑吗啡。,【实验方法】1、取分笼大鼠4只，称重、标记、分成甲乙两组。2、甲组两只腹腔注射1%氯丙嗪1.5

34、ml/100g(15mg/kg);3、 乙组两只腹腔注射等剂量生理盐水。4、 30后分别给每只大鼠皮下注射0.01%阿扑吗啡0.1ml/100g（0.1mg/Kg）。同组同笼，5、15后刺激两组，造成斗殴。比较两组斗殴情况。,【实验结果】,药理学实验 药物对大鼠动脉血压的影响,1.1 实验目的：学习麻醉大鼠急性动脉血压实验的方法观察肾上腺素对大鼠血压的翻转作用并与家兔血压实验比较，有何区别。了解动物种属差异1.2 实验原理：肾上腺素、受体激动剂，酚妥拉明受体阻断剂，酚妥拉明能阻断肾上腺素的作用。,1,和,实验动物：大鼠（体重300g左右） 实验药物： 肝素生理盐水液、1.5%戊巴比妥钠溶液、0

35、.001%肾上腺素溶液、 0.1%酚妥拉明溶液。,和,主要仪器： 压力换能器、BL-420生物机能实验系统、心电导线、手术刀、手术剪、止血钳、动脉插管(留置针）、动脉夹、头皮静脉注射针头等。,充满肝素生理盐水液,大鼠称重，腹腔注射1.5%戊巴比妥钠0.2ml/100g，麻醉后，将动物背位固定于手术台上。,在后肢内侧手术，分离股静脉，做静脉插管，注入肝素生理盐水液，建立通道。,剪去颈部的毛，颈正中切口，分离气管，寻找颈总动脉，做颈总动脉插管。,3,建立心电肢体导联：右前-白、左后-红、右后-黑。,分离气管,在气管一侧的颈动脉鞘内分离颈总动脉（注意有迷走神经伴行，应将其与颈总动脉分离）。颈总动脉近

36、、远心端各穿一根线，远心端结扎；然后用动脉夹夹住近心端，在靠近远端结扎处，向心方向插入装有肝素生理盐水溶液的动脉插管（留置针），结扎近心端线，同时抽出内心。慢慢松开颈总动脉夹，留置针继续深插，线结扎并固定于留置针分叉处。压力传感器连接在420E（或F）生物机能实验系统1通道上；，试测正常血压曲线。（后暂停）2通道接入心电三心线。,在气管一侧的颈动脉鞘内分离颈总动脉，进行颈总动脉插管,分离得到颈总动脉,颈总动脉插管,测定血压及心电图,1、选择输入信号通道1(CH1)血压 通道2(CH2)心电图2、描记正常血压及心电图。注意打上标记。,10-5肾上腺素0.1ml/100g，适量肝素生理盐水液冲洗，

37、描记曲线。 0.1%酚妥拉明0.1ml/100g，适量肝素生理盐水液冲洗，描记曲线。 10-5肾上腺素0.1ml/100g，适量肝素生理盐水液冲洗，描记曲线。,作用于、受体的药物,V,V,V,观察每步的血压及心电变化情况。,动脉插管过程容易发生出血，操作应仔细、小心。 每次给药后，都要输入1ml左右肝素生理盐水，将药物完全冲入血管内。随时注意动、静脉插管位置，特别在挣扎时，避免扭转而阻塞血流或刺破血管。两次给药之间须等待血压恢复正常。,药物对豚鼠气管的作用,豚鼠气管链法,【实验目的】 掌握平喘药物的测定方法之一（气管链法）【实验原理】 不同的药物通过直接或间接激动不同的受体使离体气管条产生收缩

38、或松弛作用。本实验观察组胺、肾上腺素、等药物对豚鼠离体气管条的作用。【实验材料】 豚鼠；平滑肌槽，生物机能实验系统，张力换能器，手术器械一套、培养皿、注射器（1m1）、丝线；1:10000肾上腺素、0.2%组胺、克-亨氏液、氧气。,【实验方法】1离体气管条标本的制备（1）豚鼠用木锤击昏，放血致死，迅速于腹面正中切开颈部皮肤，分离气管，并自甲状软骨下至气管分叉处剪下全部气管，立刻置于氧饱和克-亨氏液的培养皿内。（2）把气管洗洗，剪取45个气管环，用丝线连接成串（链）。(或相对错位剪切成串。)（3）将气管链的下端用线固定于固定钩上，标本的上端将线与张力换能器连接，立刻将标本放入恒温37并通混合氧的

39、克-亨营养液的平滑肌槽内，初试负荷为1克。,2实验装置（1）恒温平滑肌槽内盛有恒温37的Krebs液20m1左右，连续通氧。换能器与机能实验系统一通道连接。（2）机能实验系统的操作如同胃肠平滑肌实验。3.给药（1）稳定30分钟左右，描记正常曲线。（2）加入0.2%组胺0.4ml，描记曲线。（3）加入1:10000肾上腺素0.4ml。记录张力变化曲线。,【结果】,【注意事项】（1）气管平滑肌在加药之前并无自发的节律性收缩，与肠段有所不同。（2）由于气管平滑肌比较脆弱，在整个实验过趋中须避免拉扯。（5）每次换克亨氏液的目的是用该液冲洗标本，待张力基本恢复正常后再做下一步实验。,图,表,三七粉（或0

40、.25%双香豆素片）对小鼠凝血时间的影响,（毛细管法）,【实验目的】学习小鼠凝血时间简易测定方法：学习用毛细玻管法、玻片法测定凝血时间。观察三七（或0.25%双香豆素片）缩短凝血时间的作用。【实验原理】三七能促进血小板释放凝血活性物质(双香豆素片促进凝血因子的形成)，增高血液中凝血酶含量，从而缩短小鼠的正常凝血时间，达到止血之效。,【实验材料】 小鼠灌胃器2支、毛细玻管（内径0.91mm，长10cm）5根、玻片4片、针头1个、电子称1台、秒表1个。【实验药品】10%生三七粉（或0.25%双香豆素片）混悬剂50ml、生理盐水50ml。,【实验方法】 取小鼠4只，称重，编号，随机分为二组，2只10

41、%三七粉（或0.25%双香豆素片）混悬剂灌胃 0.2ml10g体重，另2只用生理盐水灌胃，0.2ml10g体重。毛细管法：1h后用毛细玻管从眼睛内眦部插入眼底.血液即进入毛细玻管内，并按下秒表开始记时，直至血液从毛细玻管内流出，并立即取出毛细玻管，每30秒折断毛细玻管(5mm)一次，直至出现血丝即为凝血时间（看秒表记时）。玻片法：同上1h后，眼底取血时，同时滴入玻片两端各一滴，计时。每30秒用针挑动血滴一次，当出现血丝的时间即为凝血时间。,【实验结果】 1.汇总全班数据进行统计学分析（两组间t检验）。比较三七与NS组对凝血时间的影响。2.计算公式：（1） (用于例数相等) 自由度（f）=n1+n2-2（2） （用于例数不等）,三七对小鼠凝血时间的影响（ ）,【注意】1、实验时室温最好在15左右。2、测试用的毛细玻管内径应均匀一致。3、毛细玻管采血后不宜长时间拿在手中，以免加速凝血时间。,