1、青霉素过敏者的梅毒治疗方法比较,组员:赵洁,祝常青,翁雅慧,杨敏,课题研究背景,设计性实验,梅毒(syphilis)是由梅毒螺旋体感染人体而发生的常见性传播疾病,已经问世数百年了,目前在世界范围均有分布,是十分重要的性传播疾病;可以分为获得性梅毒、先天梅毒和妊娠梅毒等。 梅毒病西医治疗方法梅毒的治疗现在主要以西药为主,自从青霉素用于治疗梅毒有奇效之后,中药基本不在作为主要医疗手段,只是起辅助作用。 然而对青霉素过敏者屡见不鲜,那么,对青霉素过敏的梅毒患者又该怎样治疗呢? 查阅了相关文献资料,我们发现,对于青霉素过敏的梅毒患者的代替治疗药物目前只有以下三种:红霉素、四环素、多西环素。 因而我们决
2、定对这三种药物进行实验和讨论。,梅毒简介,设计性实验,梅毒(syphilis)由梅毒螺旋体引起的一种慢性传染性疾病,当螺旋体进入人体后,迅速播散至全身各器官,产生各种症状与体征,也可呈潜伏状态,还可通过胎盘传给下一代,故危害极大。病原体梅毒螺旋体(TreponemaPallidun)是梅毒的病原体,因其透明,不易着色,故又称苍白螺旋体。梅毒是一种广泛流行的性病,在中国发病率又有所回升。梅毒螺旋体只感染人类,分获得性梅毒与胎传梅毒。,梅毒螺旋体,梅毒常用治疗药物,设计性实验,(一)青霉素类 为首选的高效抗梅毒的药物,血清浓度达到0.03g/ml即可杀死梅毒螺旋体,且应该持续2周以上,常用的有苄星
3、青霉素、普鲁卡因青霉素和水剂青霉素。(二)头孢曲松钠 有治疗梅毒的报道,取得了良好的近期疗效,但在剂量、疗程和远期疗效尚无确切的经验。(三)四环素类和红霉素类 疗效较青霉素为差,通常作为青霉素过敏者的替代治疗药物。四环素类常用的有四环素、多西环素和米诺环素,孕妇及儿童禁用。红霉素类常用的有红霉素、阿奇霉素,孕妇慎用阿奇霉素。,青霉素,设计性实验,1.早期梅毒(包括一期、二期梅毒和早期潜伏梅毒) 四环素500mg,4次/d,口服,疗程15d;或 多西环素100mg,2次/d,口服,疗程15d;或 红霉素500mg,4次/d,口服,疗程15d。2.晚期梅毒(包括三期皮肤、黏膜或骨骼梅毒,晚期潜 伏
4、梅毒,不能确定病期的潜伏梅毒及二期复发梅毒) 四环素500mg,4次/d,口服,疗程30d;或 多西环素100mg,2次/d,口服,疗程30d;或 红霉素500mg,4次/d,口服,疗程30d。,青霉素过敏者常用药物及治疗方案,设计性实验,青霉素过敏者常用药物及治疗方案,3.心血管梅毒: 应住院治疗,如有心力衰竭,应在控制心力衰竭后开始抗梅毒治疗。 治疗方法同晚期梅毒。4.神经梅毒 治疗方法同晚期梅毒。5.妊娠梅毒 用红霉素500mg,口服,4次/d,早期梅毒疗程15d,二期复发及晚期 梅毒疗程30d。妊娠初3个月与妊娠末3个月各治疗一个疗程,但所生 的婴儿应用青霉素补治。 孕妇禁用四环素和多
5、西环素。,设计性实验,实验内容,1.提取青霉素过敏的梅毒患者的一期梅毒和二期梅毒标本。2.对梅毒螺旋体进行体外培养,得到Nichols株。3.通过加入青霉素、红霉素、四环素与多西环素来改变其生长环境,然 后检测梅毒螺旋体的数量。4.通过实验结果分析哪一种药物对于治疗梅毒的效果最佳,并得出最适 药物剂量。,设计性实验,实验目的,1.掌握梅毒螺旋体的人工培养技术。2.通过实验操作掌握梅毒螺旋体的染色方法及微生物学检查法。3.通过实验得出最有效的代替青霉素治疗梅毒的药物。,设计性实验,实验方法及路线,一、梅毒螺旋体的提取,1.到医院征得院方同意后,对青霉素过敏的梅毒患者进行标本采集: 期梅毒-由于一
6、期梅毒的临床表现为硬下疳、腹股沟 或近卫淋巴结肿大,因而可取患者硬下疳渗 、 出液; 期梅毒-此时患者的临床表现为多形性皮肤损害及浅 表淋巴结肿大,因而可采集梅毒疹渗出液或 局部淋巴结抽出液。2.采集样本后妥善保管,设计性实验,实验方法及路线,1.留下足够的标本妥善保管,以备后面的实验使用,只取一部分进行本次 实验。将一期标本与二期标本分别接种在两只家兔睾丸中或眼前房内 繁殖,约需30小时才能分裂一次,能保持毒力。2.待梅毒螺旋体繁殖到原来的16倍以后(约150个小时),分组进行实 验。,二、梅毒螺旋体的人工培养,三、分组,1.将一期与二期培养物分别平均分为32组,共64组。2.一期中取每8组
7、为一个小组,共四组(即红霉素组,四环素组,多西 环素组与青霉素对照组)。二期同上。3.将红霉素组、四环素组、多西环素组、青霉素组设置8个剂量梯度进 行实验。(详见表格),设计性实验,实验方法及路线,1.方法一:直接显微镜检查 将上述检材置于玻片上用暗视野显微镜检查,如见有呈现运动活泼,沿其长轴滚动、屈伸、旋转、前后移行等的螺旋体即有诊断意义。 也可做镀银染色、荧光抗体染色或Giemsa染色。,四、分时间段检查梅毒螺旋体数量,2.方法二:核酸检测 用PCR技术直接检测临床标本中梅毒螺旋体的特异性DNA片段,用于检测的引物和探针是编码外膜蛋白47kD的基因,其扩增产物经斑点印迹,或电泳Southe
8、rn 印迹法鉴定。,设计性实验,实验方法及路线,3.抗体检测(1)非密螺旋体抗原试验 多用牛心肌的心脂质作为抗原,测定病人血清中的反应素。将抗原包被到载体颗粒上,如:胆固醇(VDRL、USR)、活性炭(RPR)、甲苯胺红(TRUST)。均为初筛试验。 初期梅毒病灶出现后1-2周时,阳性率为5383,二期梅毒的阳性率可达100。1)性病研究所实验室(VDRL)玻片试验 所用抗原(0.03心拟脂、0.21卵磷脂、0.9胆固醇,用无水乙醇配制)03ml加入装有0.3ml缓冲盐水的小瓶内(1015ml容积),加塞混匀。再加2.4ml缓冲盐水即为抗原悬液。 待检血清经5630min灭活,滴加于玻片的漆圈
9、内加等量抗原液,摇转玻片5min充分混匀反应后观察结果。有大片絮状凝聚物为(3+),中等凝聚物为(2+),细小凝聚物为(+),液体混浊为()。,设计性实验,实验方法及路线,2)快速血浆反应素环状卡片试验(RPR) 用活性炭颗粒吸附VDRL抗原。与反应素结合形成黑色凝集块,可肉眼观察结果。 取待检血清加于环状卡圆圈内,加VDRL抗原致敏活性炭1滴,旋转摇匀8min,观察结果。在白色底板出现明显黑色凝集颗粒为阳性,试验结果用肉眼很容易判断,不需显微镜,也易于推广。3)不加热血清反应素试验(USR) 注意:以上试验常有假阳性反应:结核、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、老年人、妊娠、吸毒者等。,设计性实验
10、,实验方法及路线,(2)密螺旋体抗原试验 (确证试验) 用密螺旋体抗原检测病人血清中特异性抗体,由于梅毒螺旋体、雅司螺旋体等抗原性相似,故血清学试验不能区别这些密螺旋体及其所致疾病。 1)荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS) 先用吸收剂去除病人血清非特异性抗原,提高特异性,稀释成不同稀释度,加于预先涂有梅毒螺旋体抗原的玻片上,置湿盒内,37孵育30min,洗片后再用荧光素标记的羊抗人丙球蛋白抗体,在荧光显微镜下观察。阳性者可见发荧光的梅毒螺旋体。FTA-ABS试验具高度特异性和敏感性,在第一期梅毒的头几天就可测出特异性抗体。2)梅毒螺旋体血凝试验 (treponemal pallidum
11、 hemaggulation assay, TPHA) 用抗原致敏红细胞作间接血凝试验是检测抗体最简易的方法,所用抗原是用梅毒螺旋体(Nichols株)提取物去致敏经醛化处理的绵羊红细胞,病人的血清先与非致病性Reiter细胞。血清若含有抗体则与这些细胞反应形成平铺孔底的凝集;用非致敏红细胞作对照,以除外非特异性凝集。梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA),设计性实验,实验结果记录表,设计性实验,预期结果及展望,1.通过对比红霉素、四环素、多西环素与青霉素环境下梅毒螺旋体的存 在数量得出最有效的药物。(也许可能发现其中某种药物治疗梅毒的 效果与青霉素相当或者甚至超过青霉素)2.再观察这种药物的不同剂量梯度中哪一个剂量的药效最好。3.得出结论:此药物为最适合代替青霉素来治疗青霉素过敏的梅毒患者。,展望: 在查阅资料的过程中发现如果有条件的话,对青霉素过敏的梅毒患者最好是进行脱敏以后再进行青霉素治疗,因为青霉素的效果比红霉素、四环素与多西环素的效果要强。但是,对于没有这种条件的患者,依然采用代替药物。 另:本实验还可继续延伸,可将选出的最优药物进行更细的剂量梯度进行实验,最终选出最适剂量。,Thank you .,
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