1、生物药物分析概论,本章主要内容,生化药物,生物制品,（生物技术药物）,生物药物（biopharmaceuticals）：利用生物体、生物组织和器官制得的天然活性物质及其类似物,分类没有严格的界限,动植物及微生物提取、分离的天然生物活性物质及半合成得到生命基本物质及其衍生物等,生化药物biochemical drugs,人纤维蛋白原,凝血酶、胰蛋白酶,肝素、玻璃酸,氨基酸、Pr类,酶、辅酶类,多糖类,脂类,核酸类,应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备的药品,自动免疫制品,生物制品biological prod
2、ucts,其他（血液制品、组织制品等）,免疫血清,菌苗、疫苗、类毒素,诊断制品,利用重组DNA等生物技术生产的药物,基因工程药物 biotechnology drugs,发现并确定有治疗作用的Pr,分离或合成控制该Pr合成的基因,将该基因导入受体细胞,受体细胞表达该Pr,分离纯化,重组胰岛素原的合成,基因工程药物主要类别,蛋白质多肽类： 激素类及神经递质类 细胞因子类 酶及凝血因子类核酸类： 反义寡核苷酸 等,人生长激素释放抑制因子（Human Somatotin）干扰素（Human Interferons）链激酶（Streptokinase）,5. 生化药物和基因工程药物特点1）共同特点：活
3、性强，毒副作用小2）分子量大，结构确证难3）全过程的质量控制：从原料、菌种到生产设备、中间体、产品4）生物活性检查5）安全性检查：异常毒性检查、过敏物质检查、外源性DNA残留量、宿主菌蛋白残留量等 6）效价（含量）测定,收录于中国药典和中国生物制品规程,鉴别,杂质检查,安全性检查,含量（效价）测定,1.鉴别,1）理化鉴别法：UV、肽图等,反应序列信息,RP-HPLC法分析重组人胰高血糖素类多肽1（736）肽图谱药物分析杂志2005，25(1)24-26,rhGLP-1(7-36)由30个氨基酸组成，结构中含2Lys、1Arg、1Asp、3Glu,2）生化鉴别法：免疫法、酶法、电泳法等,专属性强
4、，应用广泛,免疫双扩散法,2. 杂质检查,1）一般杂质：氯化物、重金属、水分等2）特殊杂质：有关物质等,高效凝胶过滤色谱法(High Performance Gel Filter ，HPGFC）、RP-HPLC,萄聚糖凝胶立体网状结构图,标准蛋白色谱图,1.右旋糖酐蓝 2.醛缩酶 3.血清白蛋白 4.碳酸酐酶 5.抑蛋白酶肽 6.酪氨酸,重组人肿瘤坏死因子相关调亡诱导配体（rhTRAIL）质控方法和质量标准的研究 药物分析杂志2005，25（3）253-257 Synmetry 300 C18柱（3.9150mm）,3. 安全性检查,1）热原检查 家兔法、鲎试剂法2）降压物质检查3）过敏试验4
5、）异常毒性试验 豚鼠、大鼠存活试验5）无菌试验6）宿主细胞蛋白残留、DNA残留 ELISA法,1）理化分析法： 重量法、滴定法、 电化学法、光谱法 色谱法（HPLC法）,4. 含量（效价）测定,2）生化分析法 酶法： 免疫分析法,酶活力测定法 以酶为分析对象进行分析酶分析法 以酶为分析工具或分析试剂 的分析方法,3）生物检定法 药物对生物体或离体器官所起的生物活性,测定效价时采用参考品，体内、体外方法测定活性，计算效价IU 同时测定蛋白含量，计算特异比（比活性，IU/mg）,例：冻干基因工程1b干扰素制造及检定规程,本品系用从健康人白细胞中获得的1b干扰素基因重组质粒，传染大肠杆菌，使之高效表
6、达人1b干扰素，经高度纯化后冻干制成。用于治疗慢性乙型肝炎、丙型肝炎和毛细胞白血病等疾病。,主要包括以下内容：1 菌种 2 发酵 3 收菌 4 菌体裂解与粗制干扰素制备5 浓缩与纯化 6 稀释、除菌过滤 7 半成品检定8 除菌半成品检定 9 成品检定 10规格 11保存与效期12 冻干基因工程1b干扰素使用说明书,检查：纯度： 1电泳纯度 2高效液相色谱纯度pH值水分,鉴别：分子量测定肽图测定等电聚集紫外光谱扫描外观,半成品和成品的检验项目包括：,安全性检查：残余外源性DNA含量残余IgG含量残余工程菌蛋白含量抗生素活性无菌试验热原质试验异常毒性,含量：效价测定：细胞病变抑制法蛋白含量比活性,
