模块二 项目一灭菌.ppt

1、项目一 灭菌,通过本项目的学习，学生能熟知常用的灭菌方法。,任务一 了解灭菌,定义：用物理或化学方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病的微生物，以及细菌的芽胞的过程。微生物：细菌、真菌和病毒。灭菌标准：杀灭芽孢。,任务一 了解灭菌,常用的灭菌方法：物理灭菌法和化学灭菌法。,灭菌方法,物理灭菌法,化学灭菌法,热力灭菌,射线灭菌法,微波灭菌法,化学药液灭菌法,气体灭菌法,干热,湿热,燃烧法-火焰灭菌法,干热空气灭菌,煮沸消毒灭菌法,压力蒸汽灭菌,手提式压力蒸汽灭菌器,卧式压力蒸汽灭菌器,预真空压力蒸汽灭菌器,辐射灭菌法,紫外线灭菌法,过滤除菌,流通蒸汽灭菌,任务二 熟悉物理灭菌法,定义：是利用物理因

2、素作用于病原微生物，将之清除或杀灭，常用的方法有热力、光线、辐射、过滤除菌等。 常用的物理灭菌法：湿热灭菌法、干热灭菌法、辐射灭菌法和过滤灭菌法。,热力灭菌法,热力灭菌法：主要利用热力破坏微生物的蛋白质、核酸、细胞壁和细胞膜，从而导致其死亡，是应用最早、效果可靠、使用最广泛的方法。灭菌条件：126、15min，121、30min，116、40min。热不稳定性的物品的F0值一般不低于8min。,热力灭菌法,分类：干热法（燃烧法、干热空气灭菌法）：由空气传导，传热慢。湿热法 （煮沸消毒法、压力蒸汽灭菌法。流通蒸汽灭菌法）：由空气和水蒸气导热，传热快，穿透力强。,热力灭菌法-热压灭菌法,定义：利用

3、高压下的高温饱和蒸汽杀灭所有的微生物 及其芽孢。灭菌方法可靠，临床使用最 广的一种方法。特点：是热力消毒灭菌中效果最为可靠、是物理灭菌 法中最有效的方法。适用：耐高温、高压、耐潮湿物品的灭菌。如各类器 械、敷料、搪瓷、橡胶、玻璃制品及溶液、 药品、细菌培养等。,方法：根据排放冷空气的方式和程度的不同， 分为 1）下排气式压力蒸汽灭菌。 2）预真空压力蒸汽灭菌。,热压蒸汽灭菌法,1）手提式压力蒸汽灭菌器： 压力：103kPa，时间：15-30分钟，温度：121126,手提式压力蒸汽灭菌器,卧式压力蒸汽灭菌器,2）卧式压力蒸汽灭菌器： 压力：103137kPa，时间：1530分钟，温度121126

4、,预真空压力蒸汽灭菌器,注意事项1.必须使用饱和蒸汽。2.必须排尽灭菌柜内空气。3.灭菌时间应以全部药液温度达到所要求的温度时开始计时。4.灭菌完毕后必须先停止加热，逐渐减压至压力表指针为“0”后，放出柜内蒸汽，待柜内压力与大气压相等，稍稍打开灭菌柜门，1015min后全部打开柜门，以免柜内外压力差和温度差太大，造成被灭菌物品冲出、玻璃炸裂而酿成伤害事故。,2.流通蒸汽灭菌法方法：在常压下用100的左右的蒸汽消毒,从产生蒸汽后开始计时,1530分钟即可达到消毒效果,在加入抑菌剂的基础上3060min达到灭菌效果。常用于食具、注射器及其针头的消毒。,热力灭菌法-流通蒸汽灭菌法,3.煮沸消毒灭菌法

5、定义：是一种简单、经济的消毒方法。特点：简单、经济、方便。适用：耐热、耐湿、耐高温的物品，如金 属、搪瓷、玻璃和橡胶类等。,热力灭菌法-煮沸灭菌法,煮沸灭菌法方法：将物品刷洗干净，全部浸没在水中，然后 加热煮沸，水沸后开始计时。经510分钟可杀灭繁殖体，达到消毒效果，多数细菌芽胞需煮沸15分钟以上可将其杀灭(破伤风杆菌芽孢 60分钟;肉毒杆菌芽孢-3小时).将碳酸氢钠加入水中，配成1%2%的浓度时，可提高沸点达105， 增强杀菌作用，还可去污防锈。,热力灭菌法-煮沸灭菌法,其温度不能杀灭芽胞，只能作消毒使用；加入抑菌剂条件下方可灭菌。,煮沸消毒锅,注意事项1、煮沸消毒前，应将物品刷洗干净，空腔

6、导管须先在腔内灌水；2、玻璃器皿应用纱布包裹好后，从冷水或温水中放入，水沸后计时，消毒时间为10-15min；3、橡胶制品用纱布包好，待水沸后放入，消毒时间为5min；4、有轴节的器械或带盖的容器应将轴节或盖打开再放入水中，物品不宜放置过多，大小相同的碗、盆不能重叠，要保证物品各面都与水相接触；,注意事项5、如煮沸途中加入物品，则在再次水沸后开始计时。6、水的沸点受气压影响，海拔高的地区气压低，水的沸点也低，需适当延长消毒时间。海拔每增高300m，消毒时间延长2min；7、较小的物品用纱布包好沉入水中。8、尖锐器械不宜用此方法，以免受热变钝。9、消毒后应用无菌器械将物品及时取出，置于无菌容器内

7、。,4.低温蒸汽消毒法 将蒸汽输入预先抽空的压力蒸汽灭菌器内，并控制其温度在6080，持续1015分钟进行消毒，加入抑菌剂的条件下60分钟可灭菌；主要用于不耐高热的物品，如内镜、塑料制品和麻醉面罩的消毒。可杀灭大多数致病微生物。,热力灭菌法-低温灭菌法,热力灭菌法-干热灭菌法,1.燃烧法-火焰灭菌法 定义：是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法。特点：简单、迅速、彻底适用：1）无保留价值的污染物品，如废弃物、病理标本、带脓性分泌物的敷料和纸张等 2）某些金属器械或搪瓷类物品急用时也可用燃烧法(锐利刀剪禁用此法以免锋刃变钝)。,热力灭菌法-干热灭菌法,1.燃烧法-火焰灭菌法 方法：1）金属器械可在火焰

8、上烧灼20s； 2）瓶塞或试管口在火焰上来回旋转23次 3）搪瓷类容器可倒入少量95的乙醇， 慢慢转动容器，使其分布均匀，然后点 火燃烧直熄灭 4）无保留价值的物品可直接在焚烧炉内焚毁,热力灭菌法-干热灭菌法,1.燃烧法-火焰灭菌法 注意事项: 1）注意安全：操作时远离易燃、易爆物品，如氧气、乙醚、汽油等。 2）在燃烧过程中不能添加乙醇。 3）贵重物品、锐利刀剪禁用。,2.干热空气灭菌法定义：利用特制的烤箱，通电升温后进行灭菌。特点：热力传播和穿透主要依靠空气对流和介质传 导，灭菌效果可靠。适用：在高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品，如 油剂、粉剂、玻璃器皿、金属制品等各类物品。灭菌条件为：1

9、60持续2h ，或180持续1h 或 250持续45min注意事项：不适于纤维织物、塑料制品等的消毒灭菌,热力灭菌法-干热灭菌法,烤箱,对物品的要求：高温下不变质，不损坏、不蒸发的物品，如油剂、金属制品、玻璃器具等。,三、过滤除菌法,指用滤过的方法除去微生物的方法，属于机械除菌。设备：除菌过滤器。主要用于气体、对热不稳定的药物溶液或原料。常用过滤孔径：0.22m或0.3m的微孔膜滤器或G6垂熔玻璃漏斗。,三、过滤除菌法,医院内常通过高效过滤净化处理空气，除掉空气中0.55m的尘埃，达到空气洁净的目的。目前手术室以及对空气要求较高的病房内采取空气层流的方法进行空气消毒与灭菌，包括垂直层流和水平层

10、流。主要用于手术室和烧伤病房。,手术室层流,注意事项1、对净化系统设备注意日常维护保养2、定期更换过滤板，以免细菌长期积聚粘附在过滤板上,四、射线灭菌法,包括：紫外线灭菌法、辐射灭菌法、微波灭菌法。1.紫外线灭菌法紫外线属电磁波辐射，根据波长可分为A波、B波、C波和真空紫外线。消毒使用的是C波紫外线，其波长范围为200 nm275nm，杀菌作用最强的波段为250 nm 270nm。紫外线可杀灭多种微生物，包括杆菌、病毒、真菌、细菌繁殖体、芽孢等。常用的紫外线灯管 15W、20W、30W、40W,紫外线灯管：,射线灭菌法,1.紫外线灭菌法1）作用机制 1、破坏菌体蛋白质中的氨基酸，使菌体蛋白 光

11、解变性； 2、使菌体DNA失去转化能力而死亡； 3、降低菌体内氧化酶的活性，使氧化能力丧失 4、使空气中的氧电离产生极强杀菌作用的臭氧,射线灭菌法,1.紫外线灭菌法2）使用方法1、空气消毒：消毒前做好室内清洁卫生工作（紫外线易被灰尘微粒吸收而影响效果），关闭门窗，人员停止走动，每10m2安装30W紫外线灯管一支，有效距离不超过2m，照射时间为3060分钟；2、物品消毒：消毒时应将物品摊开或挂起以减少遮挡（紫外线穿透力差），有效距离为2560cm，照射时间为2030分钟。3、液体消毒：可采用水内照射法或水外照射法，水层厚度应小于2cm,并根据紫外线的辐照强度确定水流速度。,射线灭菌法,1.紫外线

12、灭菌法3）注意事项1、由于紫外线辐照能量低，穿透力弱，应经常保持灯管清洁，灯管表面至少每2周用乙醇棉球擦拭一次2、由于紫外线对人的眼睛和皮肤有刺激作用，直接照射30s可损伤角膜或致皮炎，同时，照射过程中产生的臭氧对人体亦不利，故照射时人应离开房间，必要时戴防护镜，肢体用被单遮盖。3、由于紫外线的穿透力差，消毒物品时应将物品摊开或挂起，并定时翻动，使其表面受到直接照射；,射线灭菌法,1.紫外线灭菌法3）注意事项4、紫外线消毒的适宜温度为2040，适宜湿度为4060；5、紫外线的消毒时间须从灯亮57min后开始计时，照射后病室要通风换气。关灯后如需再开启，应间歇34min。6、紫外线灯使用过程中由

13、于其辐照强度逐渐降低，为保证消毒效果，故应定时检测灯管强度（一般36个月一次），如灯管照射强度低于70Wcm2时应更换，或建立使用登记卡，记录使用时间，凡使用时间超过1000h需更换灯管。7、定期进行空气培养，以监测灭菌效果。,普通移动紫外线灯消毒车,C波段移动紫外线灯消毒车,家用紫外消毒线灯,2.辐射灭菌法,利用放射性核素60Co或137Co发射高能射线（丙种射线）或电子加速器产生的高能电子束（阴极射线）进行辐射灭菌，杀死微生物的灭菌法。由于此法是在常温下灭菌，故又称“冷灭菌”，适用于不耐高温物品的灭菌，如：金属、橡胶、塑料、高分子聚合物（如一次性注射器、输液器、输血器等）、精密医疗器械、生

14、物医学制品等均可用此法灭菌。因放射线对人体有害，应选用机械传递物品。,3.微波灭菌法,微波是一种频率高、波长短的电磁波。在电磁波的高频交流电场中，物品中的极性分子发生极化，高速运动，并频繁改变方向，互相摩擦、碰撞，使温度迅速上升，达到消毒灭菌的作用。 微波可以杀灭各种微生物，包括细菌繁殖体、真菌、病毒和细菌芽孢、真菌孢子等。常用于食物及餐具的消毒、化验单据及票证的消毒、医疗药品及耐热的非金属材料器械的消毒灭菌。,3.微波灭菌法,注意事项1、微波对人体有一定的伤害,应避免小剂量长期接触或大剂量照射2、微波无法穿透金属面，故不能用铁罐等容器盛放消毒物品3、水是微波的强吸收介质，用湿布包裹物品或在炉

15、内放一杯水会提高消毒效果,灭菌技术物理灭菌法,灭菌技术物理灭菌法,任务三 熟悉化学灭菌法,定义：利用液体或气体的化学药物抑制微生物的生长繁殖或杀灭微生物的方法。凡不适用热力灭菌的物品，都可采用化学消毒灭菌法。如病人皮肤、黏膜、排泄物及周围环境、光学仪器、金属锐器和某些塑料制品的消毒。,灭菌物品,灭菌器,减压排气,预热,通环氧乙烷混合气体,抽真空排除环氧乙烷,送无菌空气,灭菌技术 气体灭菌法:环氧乙烷灭菌法,灭菌技术 气体消毒与灭菌:环氧乙烷灭菌法,环氧乙烷混合气体,10%环氧乙烷90%二氧化碳,12%环氧乙烷88%氟里昂,灭菌技术 气体灭菌法:环氧乙烷灭菌法,环氧乙烷维持时间,浓度450mg/

16、L45维持5h,浓度850900mg/L45,维持3h,相对湿度：40%60%温度：2255 ,气体灭菌法：2.臭氧灭菌消毒,臭氧灭菌灯,臭氧发生器,气体灭菌法,2.臭氧灭菌法 臭氧在常温下为强氧化剂，稳定性极差，易爆炸，主要依靠强大的氧化作用杀菌，可杀灭细菌繁殖体、病毒、芽孢、真菌，并可破坏肉毒杆菌毒素。（补充） 灭菌灯内装有臭氧发生管，在电场作用下，可将空气中的氧气转换成高纯臭氧。主要用于空气、物品表面等的消毒。方法：关闭门窗，人员离开，打开开关20分钟，（杀灭芽孢40分钟）。消毒后30分钟，人方可进入。,气体灭菌法,2.臭氧灭菌法注意事项1、为保证消毒效果，使用时需关闭门窗；2、臭氧对人

17、有毒，国家规定大气中允许浓度为 02mg/m3；3、由于臭氧的强氧化性，对多种物品都有损坏；4、温湿度、有机物、pH等多种因素可影响臭氧的 杀菌作用；5、空气消毒时，人员必须离开，待消毒结束后 30min可进入。,37% 40%的甲醛（福尔马林 formalin）【作用原理】 高效(灭菌剂) 使菌体蛋白变性，酶失去活性；能杀灭细菌、真菌、芽孢和病毒.杀灭所有微生物,【适用范围】用于物体表面及对湿热敏感，不耐高温、高压的医疗器械,常用化学试剂灭菌法 ,【使用方法】 常用熏蒸法。将待消毒物品分开摊放或挂起，调节消毒箱内的温度、湿度，使温度达到52 56，相对湿度为70% 90%消毒按100mg/L

18、、灭菌按500mg/L计算甲醛用量，加热使其产生甲醛气体，密闭消毒箱，作用3小时以上,37% 40%的甲醛（福尔马林 formalin）,【注意事项】 1、用甲醛消毒箱消毒物品时，不可用自然挥发法 2、环境的温度和湿度对消毒效果影响较大，消毒 时应严格控制在规定范围内 3、穿透力弱，被消毒物品应摊开放置，中间留有 一定空隙，污染表面尽量暴露，以便甲醛气 体与有效的与之接触 4、有一定的毒性和刺激性，消毒后一应要驱除残 留甲醛气体，可用抽气通风或氨水中和法。 5、甲醛有致癌作用，不宜用于室内空气消毒。,常用化学试剂灭菌法 ,过氧乙酸,常用化学试剂灭菌法 ,【作用原理】 高效（灭菌剂） 能产生新生

19、态氧，使菌体蛋白氧化、死亡。但对金属及纺织物有腐蚀性，受有机物影响大，稳定性差【适用范围】耐腐蚀物品、环境及皮肤等消毒灭菌【使用方法】可用浸泡、擦拭和喷洒法消毒。1、0.2手的消毒，浸泡12min2、0.5餐具消毒3060min3、0.2-0.4表面擦拭或喷雾消毒，30-60min4、1体温表消毒，浸泡0min 5、0.51.0室内空气消毒，加热蒸熏，密闭门窗2h,过氧化氢 双氧水（H2O2),【消毒水平】 高效-无毒，但对金属及纺织物有腐蚀性，受有机物影响大，纯品稳定性好，稀释液不稳定【适用范围】用于丙烯酸树脂制成的外科埋植物，隐形眼镜、不耐热的塑料制品、餐具、服装、饮水等消毒和口腔含漱、外

20、科伤口清洗等【使用方法】 可用3的过氧化氢溶液浸泡、擦拭待消毒的物品，作用时间为30分钟,常用化学试剂灭菌法 ,促进菌体蛋白质变性凝固（酚、醇、醛、酸碱类等）干扰细菌酶系统和代谢（氧化剂、重金属盐类等）损伤细菌细胞膜，增加其通透性（表面活性剂、脂溶剂等）菌体成分氧化、水解或结构改变（氧化剂、卤素、醛、酚等）,灭菌技术 化学消毒剂作用机制,化学灭菌法2、化学消毒剂的分类（1）灭菌剂：可以杀灭一切微生物，包括细菌芽孢，使其达到灭菌效果的制剂。如甲醛、戊二醛、过氧乙酸、环氧乙烷等（2）高效消毒剂：指可杀灭一切细菌繁殖体、病毒、真菌及其孢子，并对细菌芽孢有显著杀灭作用的制剂，如含氯消毒剂、过氧化氢等

21、（3）中效消毒剂：能杀灭细菌芽孢以外的细菌繁殖体、真菌、病毒及其他微生物的制剂。如乙醇、碘消毒剂（4）低效消毒剂：只能杀灭细菌繁殖体，亲脂病毒和某些真菌的制剂，如氯乙定等。,化学灭菌法3、化学消毒剂的使用方法 浸泡法(immersion) 是将被消毒的物品洗净、擦干后浸没在消毒液中，按标准的浓度与时间内达到消毒灭菌作用。 适用于不耐热的物品、器械的消毒，如体温表、锐利器械、化学纤维制品、精密仪器等。 常用溶液：器械消毒液、0.2%过氧乙酸、75乙醇、0.1新洁尔灭 注意事项： 盛放消毒液容器须先灭菌后使用，每周灭菌一次,化学灭菌法4、常用的化学消毒剂高效：3740%的甲醛（福尔马林）、戊二醛、

22、环氧乙烷、过氧乙酸、过氧化氢、含氯消毒剂（常用的有液氯、漂白粉、漂白粉精、氯胺T、二氯异氰脲酸钠等）中效：乙醇、碘酊、碘伏低效：氯己定（洗必泰）、苯扎溴铵（新洁尔灭）,任务四 无菌操作法,药剂生产的整个过程均控制在无菌条件下进行的一种操作方法。该方法在技术上并非灭菌操作，是避箘操作，尽量避免微生物污染。,无菌操作法,制药工业中的消毒与灭菌 无菌操作法,工作前开启1h,制药工业中的消毒与灭菌 无菌操作法,制药工业中的消毒与灭菌 无菌操作法进入无菌操作室,制药工业中的消毒与灭菌 无菌操作法操作要求,安瓿瓶经干热灭菌160170，2h橡皮塞用热压灭菌121 ，1h相关器具、机器都要灭菌药品及用具等由侧门送入无菌操作柜操作时与外界空气隔绝柜内空气灭菌可采用紫外线灯,