配制溶液的一般实验步骤.doc

1、配制溶液的一般实验步骤配制溶液步骤因配置的溶液不同而有所不同，现举两个例子：举例 1：配置 0.05mol/L，400mL NaOH 溶液的步骤：要准确配置氢氧化钠的浓度，则要用容量瓶定容，实验室没有 400 毫升的容量瓶，则选用 500 毫升的容量瓶。1.计算需要氢氧化钠的质量： 0.5L*0.05mol/L*40.01=1.000 克 2.称 1.000 克氢氧化钠于烧杯中，加少量水溶解，然后倒入500 毫升容量瓶里，分 3 次洗烧杯，将溶液全部倒入容量瓶里，最后用水稀释至刻度线，摇匀，即，得到 0.05mol/L 的氢氧化钠溶液。如果不需要很准确的话，可以直接用量筒量 400 毫升，称的

2、时候只要称 0.8 克就可以了。 举例 2：配置 1.5mol/L 的稀硫酸 200mL 步骤：第 1 步：计算：根据 C1V1=C2V2，计算需要浓硫酸的体积；第 2 步：量取，利用刻度吸管吸取需要浓硫酸的体积；第 3 步：稀释，将浓硫酸转移到小烧杯中，加少量水稀释；第 4 步：转移,待溶液温度降低后，将烧杯中的硫酸转移到200mL 容量瓶中； 第 5 步：洗涤，洗涤小烧杯，和转移的时候用到的玻璃棒，至少三次，将洗涤的水一并转移到容量瓶中； 第 6 步：定容，加水定容到刻度线，在距离刻度线一厘米左右改用胶头滴管定容； 第 7 步：摇匀,将溶液摇匀,如果液面下降也不可再加水定容；第 8 步：将

3、配得的溶液转移至试剂瓶中，贴好标签； 举例 3：配制 500mL，0.1mol/L 碳酸钠溶液步骤及注意事项 所需的仪器：烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、分析天平、药匙、量筒步骤： 第一步：计算：所需碳酸钠的质量=0.5*0.1*106=5.3 克； 第二步：称量：在天平上称量 5.3 克碳酸钠固体，并将它倒入小烧杯中； 第三步：溶解：在盛有碳酸钠固体的小烧杯中加入适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌，使其溶解； 第四步：移液：将溶液沿玻璃棒注入 500mL 容量瓶中； 第五步：洗涤：用蒸馏水洗烧杯 23 次，并倒入容量瓶中； 第六步：定容：倒水至刻度线 12cm 处改用胶头滴管滴到与凹液面平直； 第七步

4、：摇匀：盖好瓶塞，上下颠倒、摇匀； 第八步：装瓶、贴签； 误差分析： 固体药品的称量与液体药品的量取是否准确； 把溶液向容量瓶中转移，溶液洒了； 未洗涤烧杯和玻璃棒； 用待配液润洗了容量瓶； 定容时水加多了或加少了； 定容时未平视刻度线。仰视、俯视对溶液浓度有何影响？ 俯视刻度线，实际加水量未到刻度线，使溶液的物质的量浓度增大；仰视刻度线，实际加水量超过刻度线，使溶液的物质的量浓度减小。 市售盐酸密度 1.19，质量分数 36%38%以 37%计算：步骤：1.计算：假若需要 2mol/L 的硫酸100mL，则需 37%浓硫酸 16.6mL； 计算过程如下：假设盐酸 VmL：（ 0.1L*2mo

5、l/L*36.5g/mol）/37%=V/1.19V=16.59mL,考虑到量筒的精确度 0.1mL，故取16.6mL 即可。2.量取：16.6mL 浓硫酸； 3.溶解：把16.6mL 浓硫酸倒入已经加入蒸馏水的小烧杯中，用玻璃棒不断搅拌。 4.转移：待溶液冷却后，将溶液沿玻璃棒倒入100 毫升的容量瓶中。 5.洗涤：再用少量蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒 2-3 次，并将全部洗液移入容量瓶中。 6.定容：向容量瓶内加蒸馏水，当液面接近刻度线 1-2 厘米处时，改用滴管滴加蒸馏水到一面恰好与刻度线相切。 7.摇匀：塞上瓶塞，反复颠倒容量瓶数次，使瓶内的溶液均匀，此时可以把溶液倒入到试剂瓶中贴标签保存。

6、完成配制过程 容量瓶的使用六忌： 1.忌用容量瓶进行溶解（体积不准确） 2.忌直接往容量瓶倒液（洒到外面） 3.忌加水超过刻度线（浓度偏低） 4.忌读数仰视或俯视（仰视浓度偏低，俯视浓度偏高） 5.忌不洗涤玻璃棒和烧杯（浓度偏低） 6.忌标准液存放于容量瓶（容量瓶是量器，不是容器） 1 mol/L的氢氧化钠溶液 250mL，完成下列步骤： 用天平称取氢氧化钠固体/克。 将称好的氢氧化钠固体放入烧杯中加少量蒸馏水将其溶解，待完全溶解后将溶液沿玻璃棒移入250mL 的容量瓶中。 用少量蒸馏水冲洗 23 次，将冲洗液移入容量瓶中，在操作过程中不能损失点滴液体，否则会使溶液的浓度偏低。 向容量瓶内加水

7、至刻度线12cm 时，改用胶头滴管小心地加水至溶液凹液面与刻度线相切，若加水超过刻度线，会造成溶液浓度偏低应该重新配制。 最后盖好瓶盖，摇匀，将配好的溶液移入试剂瓶中贴好标签。 常用贮液与溶液1mol/L 亚精胺（Spermidine）： 溶解 2.55g 亚精胺于足量的水中，使终体积为 10mL。分装成小份贮存于-20。 1mol/L 精胺（Spermine）：溶解 3.48g 精胺于足量的水中，使终体积为 10mL。分装成小份贮存于-20。 10mol/L 乙酸胺（ammoniumacetate）：将 77.1g 乙酸胺溶解于水中，加水定容至 1L 后，用 0.22um 孔径的滤膜过滤除菌

8、。 10mg/mL 牛血清蛋白 (BSA）：加 100mg 的牛血清蛋白（组分 V 或分子生物学试剂级，无 DNA 酶）于 9.5mL 水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白） ，盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到 10ml，然后分装成小份贮存于-20。 1mol/L 二硫苏糖醇（ DTT）：在二硫苏糖醇 5g 的原装瓶中加 32.4mL 水，分成小份贮存于-20，或转移100mg 的二硫苏糖醇至微量离心管，加 0.65mL 的水配制成 1mol/L 二硫苏糖醇溶液。 8mol/L 乙酸钾（ potassiumacetate）：溶解 78.

9、5g 乙酸钾于足量的水中，加水定容到 100mL。 1mol/L 氯化钾（KCl）：溶解 7.46g 氯化钾于足量的水中，加水定容到100mL。 3mol/L 乙酸钠（sodiumacetate）：溶解 40.8g 的三水乙酸钠于约 90mL 水中，用冰乙酸调溶液的 pH 至5.2，再加水定容到 100mL。 0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA 和 NaOH 溶液（0.5mol/L ） ，混合后形成 EDTA的三钠盐。或称取 186.1g 的 Na2EDTA2H2O 和 20g 的NaOH，并溶于水中，定容至 1L。 1mol/L HEPES：将23.8gHEPES 溶于约

10、 90mL 的水中，用 NaOH 调pH（6.88.2） ，然后用水定容至 100ml。 1mol/L HCl：加8.6ml 的浓盐酸至 91.4ml 的水中。 25mg/ml IPGT：溶解250mg 的 IPGT（异丙基硫代-D-半乳糖苷）于 10ml 水中，分成小份贮存于-20。 1mol/LMgCl2:溶解 20.3g MgCl26H2O 于足量的水中，定容到 100mL。100mmol/L PMSF：溶解 174mg 的 PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的异丙醇中，定容到 10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮存于-20。 20mg/mL 蛋白酶 K（proteinase K）：将

11、200mg 的蛋白酶 L 加入到 9.5mL 水中，轻轻摇动，直至蛋白酶 K 完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到 10ml，然后分装成小份贮存于-20。 10mg/mL R-nase（无 D-Nase）（D-Nase freeR-Nase）：溶解 10mg 的胰蛋白 RNA 酶于1mL 的 10mmol/L 的乙酸钠水溶液中（pH5.0 ） 。溶解后于水浴中煮沸 15min，使 DNA 酶失活。用 1mol/L 的 TrisHCl调 pH 至 7.5，于-20贮存。 （配制过程中要戴手套） 5mol/L 氯化钠（NaCl）：溶解 29.2g 氯化钠于足量的水中，定容至 100mL。 10N 氢

12、氧化钠（NaOH）：溶解 400g 氢氧化钠颗粒于约 0.9L 水的烧杯中（磁力搅拌器搅拌） ，氢氧化钠完全溶解后用水定容至 1L。 10SDS（十二烷基硫酸钠）：称取 100gSDS 慢慢转移到约含 0.9L 的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至 1L。 2mol/L 山梨（糖）醇（Sorbitol）：溶解 36.4g 山梨（糖）醇于足量水中使终体积为 100mL。 100三氯乙酸（TCA）：在装有 500gTCA 的试剂瓶中加入 100mL 水，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。 （稀释液应在临用前配制） 2.5Xgal （5-溴-4-氯-3-吲哚-半乳糖苷）：溶解25mg 的 Xgal 于 1ml 的二甲基甲酰胺（DMF ） ，用铝箔包裹装液管，贮存于-20。 100Denhardt 试剂（Denhardtsregent）成分及终浓度配制 100mL 溶液各成分用量 2%聚蔗糖（Ficoll，400 型）2%聚乙烯吡咯烷酮（PVP-40）2%BSA（组分 V）水 2g2g2g加水至总体积为 100mL