贝克曼库尔特血细胞分析VCS技术.ppt

1、白细胞五分类VCS技术,从三分类到五分类,三分类：淋巴细胞单核细胞粒细胞 中性粒细胞 嗜酸细胞 嗜碱细胞,五分类：淋巴细胞单核细胞中性粒细胞嗜酸细胞嗜碱细胞,淋巴细胞,单核细胞,粒细胞,淋巴,嗜碱,单核,嗜酸,中性粒细胞,五分类VCS技术,运用V、C、S三种探针,在流式通道的某一位点,对通过的单列白细胞，进行逐个的、同时的、三重的检测，以及三维分析,以确定其亚群性质。V-低频波，分析细胞体积；C-高频波，分析细胞核型；S-激光，分析细胞的颗粒特性。,接近原态的WBC分析,Scatter Pak双试剂系统的作用去红细胞: 红细胞溶解剂通过渗透压差溶解红细胞保持白细胞原态: 溶解终止液令白细胞恢复

2、到“接近原态”大小,接近原态的WBC分析,接近原态的白细胞,进入流式通道,混合池和流式通道,接近原态的WBC分析：前处理装置,流体动力聚焦,流体动力聚焦的流式通道单细胞流在鞘液的包裹下呈最适排列通过流式通道将重叠限制到最低限度,正常压力差：标本压力小于鞘流压力,异常压力差：标本与鞘流压力差过小,VCS检测,八千多个白细胞逐个、直接、同时地在流式通道内接受VCS三重检测，得到各自的三维座标值,VCS,增强型流式通道,VCS增强型流式通道运用三种独立的能量探针来分析细胞,是目前最全面先进的分析工具,更好的体积测量方法,V 是以库尔特原理检测细胞的体积获得的是完全的细胞体积,VCS - DC,更好的

3、细胞内部结构测量方法,C 运用高频探针检测细胞的内部结构获得细胞核复杂程度的信息区分分叶核和非分叶核细胞,VCS - RF,VCS - Laser,S 是运用一个宽角度的散射范围（10 -70）来测量细胞的颗粒特性更好地根据颗粒特性区分淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸细胞,更好的细胞颗粒特性测量方法,逐个、同时、直接的三维检测,NEDC Mean,细胞的三维定位,NEOP Mean,NE RLS Mean,三维分析技术,将检测过的8,192个细胞分布到一个以V、C、S为三维坐标的空间内，显示出细胞群特征。高智能的计算机软件分析分析细胞群的位置、相对密度、轮廓、和大小。三维坐标的数据分析位点多过 16

4、 106个。,三维细胞定位,三维空间的多侧面表示-DF1 -体积(V),激光散射(S),嗜酸细胞,中性粒细胞,淋巴细胞,单核细胞,DF2 -体积(V),传导性(C),单核细胞,淋巴细胞,中性粒细胞嗜酸细胞嗜碱细胞,十余种异常细胞的报警提示,VCS三维分析的技术特点,接近原态的白细胞分析一个分类试剂包增强型流式通道，VCS直接、同时、三重检测分析细胞的视角与手工相似真正的三维检测VCS，汇集最全面的物理检测工具三维分析的高分辨率 (256 256 256)白细胞五项分类10多种异常细胞的检测,VCS三维分析的技术特点,流体动力聚焦 统计8000多个白细胞分类结果与手工的相关性好流式通道还可检测网

5、织红细胞被世界上最多实验室采用的五分类原理,IntelliKineticsTM（智能调控) & AccuGateTM（精确定位）,两种新技术令报警的假阳性和假阴性减少到前所未有的水平,VCS三维技术的优化,专利的IntelliKinetics 技术,对标本在测量前的预处理作最适化控制根据实验室环境温度，控制仪器内细胞与试剂的反应温度试剂加入量试剂与细胞的反应时间从流式通道获取数据的时间,先进的标本预处理技术,专利的 AccuGate 定位技术,AccuGate 定位技术,真正的三维分析全周边限定细胞亚群对细胞特征进行实时刻划每个细胞亚群都独立定义清晰的细胞亚群分界超凡的怀疑性报警灵敏度和特异性

6、标本具48小时的分类稳定性。,以崭新方式展示白细胞分类数据,从一个分类点图上了解更多信息,转动 从任意角度观察,根据需要隐藏/显示细胞亚群,AccuGate 定位技术,增加新的怀疑性报警提示怀疑有中性、淋巴、或单核系原母细胞分辨不同细胞系的原母细胞 衰老标本低细胞数量标本(绝对值),报警语更为准确和精确,经典的库尔特专利技术 。-蠕动摇床 .,全自动90度摇匀吸样前自动设置初始化编号唯一具备样本识别无错管理,256 X 256 X 256,淋巴,单核,嗜酸,中性,充满信心的最低人工复检率,独有的非线性分类方式柔变轮廓细胞亚群多维参数的精确演算原始细胞的特征描述精确的报警,Coulter HmX

7、TM非线性柔变轮廓分类(AccuGate) .,对异常标本最精确的检测及结果报告对重叠及被掩盖的群落进行精确分类激发软件对分类结果异常的样本进行进一步分析超凡的怀疑性报警灵敏度和特异性标本具有更好的分类稳定性增加新的怀疑性报警提示大大降低假阳性率和假阴性率,Coulter HmXTM非线性柔变轮廓分类(AccuGate) .,Coulter HmXTM智能动力系统 Intellikinetics TM .,在任何一种血细胞分析仪的分析过程中， 细胞与试剂之间的反应过程都对结果的准确度起到至关重要的作用。细胞和溶血剂的反应（物理法）细胞和染色剂的反应（化学法）,根据实验室环境条件，调整： 加入试

8、剂的温度 加入试剂的量 试剂与细胞的反应时间（从流式通道获取数据的时间）屏蔽分析环境的内、外源噪音,Coulter LH 755TM智能动力系统 Intellikinetics TM .,消除实验室环境对结果的影响保证在不破坏白细胞的前提下,完全溶解红细胞保证白细胞恢复原态更精确的结果，降低复检率整体提高实验室工作效率,Coulter LH 755TM智能动力系统 Intellikinetics TM .,1. 试剂温度,2. 试剂量,3. 反应时间,优秀，经济的幼稚细胞检测,Coulter HmXTM卓越的幼稚细胞报警功能,基于VCS技术，结合库尔特非线性柔变轮廓分类技术，COULTER H

9、mX的研究队伍根据国际行业标准，在结果报告单中提供无与伦比的包括十余种幼稚细胞的准确报警，与同类仪器相比， COULTER HmX的幼稚细胞功能独有如下优点：基于多维参数基础上，结合多种创新科技的准确的、分系的幼稚细胞报警无需额外的试剂，降低实验室成本根据国际行业复检标准，只提供准确的报警以供人工复检参考,NE BlastsImm NE 2Imm NE 1,LY BlastsVariant LY,MO Blasts,NRBCs,Coulter HmXTM卓越的幼稚细胞报警功能,有核红细胞 单核系原始细胞淋巴系原始细胞粒系原始细胞不成熟粒细胞中性杆状核细胞异型淋巴细胞过度溶解的淋巴细胞血小板凝集

10、团和巨大血小板细胞寄生虫(疟原虫等),Coulter HmXTM卓越的幼稚细胞报警功能,有核红细胞在HmX上的体现.,VCS技术为基础在散点图上有单独的群落报告方式符合国际标准WBC分类不受影响，结果准确最准确的分类结果，最低的假阳性率，假阴性率最低的成本无限扩展性,有核红细胞,精敏调节系统AccuFlexTM,专利的AccuFlex软件技术可以让您选择每一项报警的灵敏度水平，由此来建立相应的复检标准。对您的实验室而言，库尔特VCS技术平台与AccuFlex, AccuGate, and Intellikenetics 等技术的组合意味着将复检率降低到前所未有的水平，同时也意味着以更高的效率完

11、成更大的工作,网织红细胞计数是用作红细胞产生或红细胞生成的指标，是诊断或监测贫血治疗最常用的临床指标 传统的手工计数网织红细胞的方法因其固有的不精确性，当用做监测实验时有一定的局限性，尤其是用在计数范围的低限或高限时。涂片厚薄，染色深浅，有限的细胞计数以及技师间的差异均会导致结果的变异系数为25%到50%。 流式细胞术测量网织红细胞不但大大提高了网织红细胞计数的准确性和精确性，还能提供一些反映网织红细胞成熟度和大小的非传统参数。临床研究已经开始将这些非传统参数应用于许多贫血性疾病的诊断和治疗,自动网织红细胞功能,Coulter LH750创新科技令操作更简便,试剂非荧光染料-新亚甲蓝来沉淀网织

12、红细胞内的RNA。网织红细胞染色是为了把网织红细胞与成熟红细胞区分开来。脱蛋白溶液(酸性、低渗)- 在血液与新亚甲蓝混匀孵育一段时间后加入将网织红细胞内的血红蛋白除去，而保留着色的RNA。红细胞肿胀成球形但不胀破,自动网织红细胞功能,Coulter LH750创新科技令操作更简便,方法：漂清本底后，以VCS技术在增强型流式通道内对细胞进行分析，即同时采用体积、传导性和光散射三维分析来确定细胞并将其分类。V:直流电测量的体积确定细胞的大小。网织红细胞的分析高度依赖细胞的大小信息，根据定义，未成熟的红细胞大于成熟的红细胞。数据图的y轴为体积C:传导性或射频测量提供细胞的内部特性信息。数据图的z轴为

13、传导性，它只能在旋转的三维图中才可看到S:细胞通过氦-氖激光束测得的光散射提供细胞表面特性和细胞颗粒特性的信息。网织红细胞分析高度依赖光散射信息因为含有残余RNA的红细胞的光散射强于成熟红细胞的光散射。数据图的x轴为光散射,自动网织红细胞功能,Coulter LH750创新科技令操作更简便,网织红细胞的检测,网织红细胞是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的不成熟红细胞,通常较成熟红细胞稍大,其胞质中尚残存部分嗜碱性物质(RNA,核糖体),经碱性染料染色后可见深染的网状结构,故名。右图中标记A、B、C的细胞分别代表不同成熟度的网织红细胞的。,新亚甲蓝-VCS检测法,以经典的超活染料新亚甲蓝（NMB）

14、着色网织红细胞内残存的RNA。漂去除红细胞内血红蛋白(酸性试剂)在流式通道，运用VCS三维技术，将网织红细胞与成熟红细胞、白细胞、血小板、和有核红细胞区分开来。,网织红细胞的VCS三维分析,运用VCS三维技术分析染色后的红细胞。低频波检测细胞体积高频波(阻光性)检测细胞的内部成分，可剔除非红细胞颗粒激光散射将网织红细胞与成熟红细胞区分开来(网织红细胞胞浆含较 RNA 物质，散射较多的激光，在散点图上分布于红细胞的右侧)。网织红细胞成熟度越差,在散点图上分布越靠右检测与白细胞分类共享一个流式通道。,网织红细胞VCS三维散点图分析,网织红细胞,网织红细胞亚群分辨,网织红细胞高成熟度网织红,成熟红细

15、胞,白细胞,非红细胞干扰,低成熟度网织红,网织红细胞参数意义,参数 英文 正常参考网织红细胞百分比 RET% 0.5% - 2% 2% - 6%网织红细胞绝对值 RET# (25 75) 109/L网织红成熟度 IRF 0.2-0.4平均网织红体积 MRV 100-125fl平均球形红细胞体积 MSCV 84-100fl高散射网织红百分比 HLR% 0.07%-0.7%高散射网织红绝对值 HLR# (3 50) 106/L,网织红细胞参数的临床意义,IRF的临床应用未成熟网织红细胞，也称移动或张力细胞，正常情况下不足网织红细胞总数的5%。未成熟网织红细胞在大量的促红细胞生成的刺激下会释放到外周

16、血中，如出血，某些贫血或对刺激骨髓造血治疗的反映。IRF类似于中性粒细胞的核左移，能够提供额外的红细胞信息，这些信息可以缩短疾病从诊断到治疗或单纯的治疗时间。IRF在其他方面的临床应用包括：监测骨髓移植后干细胞再生情况监测强度化疗后骨髓再生情况监测铁、维生素B12和叶酸治疗监测毒性药物对骨髓的影响通过促红细胞生成监测肾脏移植对贫血进行分类和评价监测新生儿输血检测再障危象提高贫血的分类、诊断和治疗,不同临床疾病中IRF与网织红细胞计数的相互关系,IRF网织红细胞成熟指数,IRF在骨髓移植病人中的作用，IRF通常先于中性粒细胞计数对骨髓活性情况出现反应。IRF的优点在于它不象中性粒细胞绝对计数那样

17、受临床或亚临床感染影响。骨髓移植后IRF升高到20%以上时表示红系移植成功 IRF是骨髓移植成功最敏感的指标，因为IRF升高是当前实验室方法可测得的最早的反应指标。肾移植后IRF是一个比网织红细胞绝对计数更敏感的早期指标,MSCV平均球形细胞体积,网织红细胞MSCV与CBC-MCV的关系是遗传性球形红细胞增多症的一个高度有效的指标。Chiron等人评价了286份标本CBC中的平均红细胞体积（MCV）和MSCV的相关性。由于红细胞的双凹圆饼结构，总的相关性显示出一个MSCV的正向偏差。然而48例MSCV小于MCV的标本有一群不明的细胞亚群。这一亚群包括来自遗传性球形红细胞增多（HS）的31份病人标本,