1、单克隆抗体的制备,应急处置：洗、挤、消毒24小时内接种疫苗，5针，28天内打完咬伤较严重者先注射狂犬病病毒抗毒血清和破伤风杆菌抗毒血清，后接种疫苗。,阅读思考,常规抗体的缺点？为什么血清中分离的抗体纯度低？,常规抗体,（多克隆抗体）,纯度低、特异性差、产量低,1、单克隆抗体 由一个B淋巴细胞增殖分化形成的浆细胞群产生的抗体。化学性质单一，特异性强。,被免疫过的B细胞（浆细胞）,设想：,B细胞,骨髓瘤细胞,杂交瘤细胞：既能产生特异性抗体，又能无限增殖,细胞融合技术,细胞培养,抗原,2、单克隆抗体制备过程,B1、B2、B3多种淋巴细胞,骨髓瘤细胞（设定为A）,+,PEG,选择培养基,BB AB1
2、AB2 AB3AA,细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断。试验用骨髓瘤细胞（缺陷型）只有D途径，没有S途径。,杂交瘤细胞克隆化培养,抗体检测,产生特定抗体的杂交瘤细胞,获取,单克隆抗体体内制备,单克隆抗体体外制备,优点：特异性强、灵敏度高、可大量制备,将以下单克隆抗体的制备步骤排序,3、单克隆抗体的应用,用于治疗疾病和运载药物，如生物导弹,131I,制备甲胎蛋白的单克隆抗体，与药物结合，定向运输到癌细胞位置。,癌细胞膜具特殊蛋白质，甲胎蛋白、癌胚蛋白。,“生物导弹” 单克隆抗体药物,作为诊断试剂：,人绒毛膜促性腺激素的单抗,杂交瘤技术是上世纪方法学上的一个重大突破，开创了大量生产具有专一特异性的单克隆抗体的新纪元。1984年米尔斯坦和柯勒被授予诺贝尔生理学或医学奖。,骨髓瘤细胞（缺陷型）,多种细胞,筛选,杂交瘤细胞,B淋巴细胞（多种）,选择培养基,特定抗原注射动物引起免疫反应,加PEG,克隆化培养，抗体检测,筛选,产生特异性（所需）抗体的杂交瘤细胞,2、单克隆抗体的制备过程,特异性强、灵敏度高，可大量制备。,脾脏提取,优点,既能大量繁殖又能产生专一抗体,
