酶法提取乌贼眼中透明质酸的研究【开题报告】.doc

1、毕业论文开题报告食品质量与安全酶法提取乌贼眼中透明质酸的研究一、选题的背景与意义透明质酸HYALURONICACID,简称HA,又名玻璃酸,是一种高分子量的直链多糖。它是由132乙酰氨基2脱氧D葡萄糖14DD葡萄醛酸双糖重复单位所组成的直链粘多糖。作为蛋白聚糖的结构核心,它与胶原、纤粘连蛋白、层粘连蛋白一起,广泛分布在动物和人体组织和细胞外基质中,对细胞运动、增殖、分化和稳定细胞与组织的表现型等,均有重要作用。HA水溶液所形成凝胶的独特网状结构和分子内羟基氢键使其具有极好的保水性和流变特性，与传统的保湿剂相比,HA具有更高的保湿效果,且无油腻和阻塞皮肤等缺点，因而被广泛应用于医学、食品、化妆品

2、等领域。透明质酸广泛存在于动物组织中，1934年美国哥伦比亚大学眼科教授MEYER等首先从牛眼玻璃体中分离得到的。目前，已经在动物眼玻璃体、皮肤、脐带，鸡冠等组织中分离得到了透明质酸。乌贼是我国四大海产大黄鱼、小黄鱼、带鱼、乌贼之一，是沿海常见的一种产量很高的软体动物，肉厚味美,营养丰富,具有重要的经济价值与药用价值。目前，人们对乌贼的利用与开发主要为其骨、肉、墨、血和卵。乌贼骨海螵蛸具有各种收敛作用,表现为止血,可治多种内外出血,单用有效表现为制酸,可中和过多胃酸,对胃溃疡、十二指肠溃疡沦生溃疡及部分慢性胃炎等有效,另外在皮肤、粘膜包括体内表面确有制泌、收敛、降低血管通透性的作用,化学处理过

3、的海螵蛸还可用作接骨材料,甚至还有抗肿瘤、防辐射的功效。乌贼肉质鲜美,营养丰富,药用价值高,是海洋带给人类的一种高蛋白、低脂肪的佳食良药。乌贼肉有活血化淤之效,不但补气、补血且可滋阴。乌贼墨在可以用于止血,增强对细胞免疫功能及抗肿瘤功能以及提取物制毛发强壮剂,用于生发、黑发。乌贼血据本草纲目载,可主治耳聋。乌贼卵可用于开胃利水，乌鱼蛋是同雌墨鱼的缠卵腺加工制成的。乌鱼蛋之所以名贵，系因其营养丰富、味道鲜美，有冬食去寒夏食解热之功效，且富含人体必需的多种微量元素。然而乌贼头两侧一对发达的眼睛，却没有得到很好的利用。据统计，水产品加工过程中产生大约1540的下脚料，其中鱼眼约占25，通常这些下脚料

4、包括乌贼眼会被人们忽视，乌贼眼较大，晶状体所占体积也大，如果对其加以利用，从中提取具有广泛应用的透明质酸，不仅能丰富我们对乌贼的开发利用，同时能带动水产品的加工利用，减少渔业资源浪费，而且提取出的透明质酸，能应用于人们的日常生活之中，提高人们的生活质量。因此，本课题利用乌贼眼提取透明质酸具有重要的经济利益和社会利益二、研究的基本内容与拟解决的主要问题研究的基本内容1查找相关文献，初步设计实验方案，确定透明质酸含量的测定方法2以透明质酸得率为指标，确定温度、PH、加酶量以及酶解时间对中性蛋白酶水解提取乌贼眼中透明质酸的影响3采用响应面法优化中性蛋白酶的酶解条件，确定最佳酶解方案。拟解决的主要问题

5、1研究各个酶解单因素对提取乌贼眼中透明质酸的影响，得出各个因素的最佳水平2根据单因素实验结果，采用响应面法优化最佳酶解条件，确定最佳酶解方案。三、研究的方法与技术路线研究方法1乌贼眼玻璃体营养成分测定11水分测定直接干燥法GB/T500932003。12灰分测定灰化法GB/T969518200813总蛋白测定凯氏定氮法法GB/T50095200314总糖测定蒽铜硫酸法2透明质酸的提取21乌贼眼前处理洗净，挑破眼珠，取眼液，18冻藏；用时4解冻，匀浆。22盐溶处理用02MOL/L氯化钠溶液振摇4H23酶解231酶活力测定福林（FOLIN）法232葡萄糖醛酸标准曲线采用咪唑法233单因素试验因素选

6、择温度、加酶量、酶反应时间以及PH，以透明质酸得率（或葡萄糖醛酸含量）为指标。234响应面试验在单因素试验的基础上进行，以透明质酸得率（或葡萄糖醛酸含量）为指标，确定提取工艺。技术路线四、论文的总体安排与进度2010年11月11日2011年2月24日查找相关文献，初步设计实验方案2011年2月25日3月1日进行试验设计，采买实验原料2011年3月2日4月20日按照试验设计进行实验，并根据实验进展进行适当修改，记录实验数据2011年4月21日5月4日处理实验数据，撰写毕业论文2011年5月5日5月18日交由指导老师修改2011年5月19日5月26日修改毕业论文，准备毕业答辩五、主要参考文献1杨晓

7、燕贾福星乌贼的综合药用J中国海洋药物,1999,246472刘艺王和鸣海螵蛸接骨动物实验的组织学研究J中国中医骨伤科，199535683窦光宇亦真亦幻话乌贼J百科知识,2007327284刘智禹,江琴乌贼内脏粉的营养价值及其安全性研究J福建农业学报,2005,2042712745罗瑞明透明质酸HA的国内外研究现状J宁夏农学院学报，2001，22（1）62646黄光斗,赵宇,张方樱等透明质酸的制备与应用研究进展J广西轻工业,2002,124267郭风仙,凌沛学,郭学平等透明质酸的生理功能及其在化妆品和美容保健食品中的应用J中国商办工业,2002,945468董学畅,张淑桂透明质酸的制备和应用J云

8、南化工,1994,238409生举正,凌沛学,王凤山透明质酸生物合成的研究进展J中国生化药物杂志,2009,30213513810杜平中透明质酸的皮肤保健功能J中国生化药物杂质,1998,19528328411常育,姚宏,兰英透明质酸的制备方法J延安大学学报医学科学版,2009,7312913012颜延宁鸡冠中透明质酸的提取J广西轻工业,2006,5404213朱广华,方煜平透明质酸制备方法及应用研究的进展J中国医药工业杂志,1996,2838238514杜林繁,卢家炯,马森等粘多糖的生物功能及其分离制备的研究概况J广西轻工业,2008,106715赵玉红,迟玉杰蛋壳膜中透明质酸的提取及部分特

9、性研究J食品工业科技,2008,06乌贼原料乌贼眼液02MOL/L氯化钠溶液振摇4H酶解不同温度、PH、加酶量、酶解时间透明质酸得率测定优化灭酶、离心、稀释17217416秦乾安,周小敏,励建荣鱿鱼眼提取透明质酸去蛋白质酶解工艺研究J食品工业科技,2009,0121421817姚美琴,褚俊杰,陈小娥鱿鱼眼透明质酸的提取工艺研究J食品科技,2009,34524124418王菁，杨佳玉，金淼等鱿鱼眼透明质酸降解工艺条件研究J食品科学,2009,3023824119汪健，汪清，谢镇酶解条件控制对透明质酸工业化提取的影响J2010,411202320凌沛学透明质酸M北京中国轻工业出版社198521顾其胜,严凯透明质酸与临床医学M上海,第二军医大学出版社,200322马宇翔,王春玲,郭兴凤中性蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究J粮油加工,2006,8505323刘智勇,李和生几种蛋白酶对文蛤肉的酶解工艺条件研究J天然产物研究与开发,2009,2151752424刘军海，黄宝旭，蒋德超响应面分析法优化艾叶多糖提取工艺研究J食品科学,2009,3011411825刁小琴,关海宁,马松艳等微波辅助响应面酶法优化南瓜多糖提取工艺的研究J粮油加工,2010,109295