杂交育种与基因工程.pptx

1、,提高突变率，加快育种进程，大幅改良性状,用物理、化学或生物方法处理生物,诱变育种,操作复杂，难度大,提取，结合，导入，检测与表达,基因工程育种,多倍体育种,发育缓慢、生长期长、结实率低,明显缩短育种年限,单倍体育种,基因重组,杂交育种,缺 点,优 点,方 法,原 理,名称,杂交自交连续自交选优,基因突变,具有不定向性，有利变异少，需处理大量的材料,将不同个体的优良性状集中于一个体上,花药离体培养，再秋水仙素处理使染色体加倍,目的性强，能定向改造生物,染色体变异,秋水仙素处理萌发的种子或幼苗,需与杂交育种配合，多限于植物,染色体变异,茎秆粗壮，营养丰富,基因重组,育种周期长，工作量大,考点37

2、：生物变异在育种上应用（）,植物细胞全能性和细胞膜流动性,去壁原生质体融合杂种细胞组织培养杂种植株,克服了远缘杂交不亲和的障碍,杂种植株还不能按照人们需要表现出两亲代的优良性状,植物体细胞杂交,动物细胞核移植（克隆）,动物体细胞核的全能性,将具备所需性状的体细胞核移植到去核卵细胞中重组细胞激活重组胚胎胚胎移植新个体,改良动物品种，拯救濒危动物,难度大,成活率低,利用植物激素进行育种,适宜浓度的生长素可以促进果实的发育,在未受粉的雌蕊柱头上涂抹一定浓度的生长素类似物溶液，促进子房壁发育成无子果实,可得到无子果实,该变异类型是不遗传的,通常从F2开始选种，因为从F2开始发生性状分离,实例：用辐射方

3、法培育“黑农五号”大豆品种用X射线、紫外线照射等方法培育高产青霉菌株太空育种（利用宇宙射线进行空间诱变育种）,单倍体育种过程,1为什么以一定浓度的秋水仙素溶液滴在二倍体西瓜幼苗的芽尖?,西瓜幼苗的芽尖有丝分裂旺盛，用秋水仙素处理有利于抑制纺锤体的形成，从而形成四倍体植株。,2、为什么三倍体高度不育？,奇数的同源染色体不能正常联会，所以形成有一个完整的染色体组的配子的机率很低。,3、为什么还要给三倍体植株授粉？,为了获得生长素，刺激子房发育,4、三倍体生长发育慢，且高度不育，如何留种、扩大生产？,组织培养、营养繁殖,基因工程的概念,限制性核酸内切酶,1.来源：主要是从 中分离纯化出来的。2.功能

4、：能够识别双链DNA分子的某种 核苷酸序列，并且使每一条链中 部位的两个核苷酸之间的 断开，因此具有 性。,特定,原核生物,特定,磷酸二酯键,特异,作用结果：,产生黏性末端或平末端,G A A T T C,限制酶切割DNA分子示意图,C T T A A G,黏性末端,EcoR,C C C G G G,限制酶切割DNA分子示意图,G G G C C C,平末端,Sma,限制酶只能作用于DNA，不能作用于RNA,不同的限制酶也可能切割得到相同的黏性末端,切割目的基因和运载体时通常要求使用同一种限制酶,1。分类： 根据酶的来源不同，可分为两类：一类是从 中分离得到的，称为 连接酶；另一类是从 中分离

5、出来的，称为 连接酶。,基因的的针线DNA连接酶,大肠杆菌,E.coliDNA,T4噬菌体,T4DNA,2。两种DNA连接酶的比较：（1）相同点：都缝合 键。（2）区别：EcoliDNA连接酶只能将双链DNA片段互补的 之间连接起来，而不能将双链DNA片段 之间进行连接；而T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的 ，又可以“缝合”双链DNA片段的 。但连接平末端的之间的效率较 。,磷酸二酯,黏性末端,平末端,黏性末端,平末端,低,（3）连接的部位： 磷酸二酯键（在“梯子”的扶手处）， 不是氢键（在“梯子”的踏板处）。,运载体有哪些？应具备什么特点？,常用的运载体主要有两类： 1）质粒

6、 2）噬菌体衍生物或某些动植物病毒,来源：细菌及酵母菌等生物本质：小型环状DNA分子特点：结构简单、能自我复制、有一个至多个限制酶切点、具有标记基因,基因工程的操作流程：,目的基因,运载体,重组DNA,受体细胞,转基因生物,（1）目的基因的获取（2）基因表达载体的构建（3）将目的基因导入受体细胞（4）目的基因的检测与鉴定,如何获取目的基因？,获取目的基因的方法有：从自然界已有的物种中分离出来通过DNA合成仪用化学方法人工合成从基因文库中获取利用PCR技术扩增目的基因反转录法合成,基因文库：含有不同基因的受体菌群。包括基因组文库和cDNA文库。,条件：引物、模板、dNTP、Taq酶、缓冲液过程：

7、高温变性、低温复性、适温延伸,RNA DNA,逆转录酶,1.什么是基因文库？,种类,基因组文库：,cDNA文库：,含有一种生物的全部基因,含有一种生物的部分基因,（1）从基因文库中获取目的基因,将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。,PCR技术扩增目的基因的过程：,PCR技术扩增过程,a、DNA变性（90-95）：双链DNA模板 在热作用下， 断裂，形成_,b、复性（55-60）：系统温度降低，引物 与DNA模板结合，形成局部_。,c、延伸（70-75）：在Taq酶的作用下，从引物的5端3端延伸，合成与模板互补的_。,

8、氢键,单链DNA,双链,DNA链,（二）基因表达载体的构建,核心,质粒,DNA分子,限制酶处理,两个切口获得目的基因,DNA连接酶,重组DNA分子（重组质粒）,同一种,一个切口两个黏性末端,复制原点+目的基因+启动子+终止子+标记基因,基因表达载体的组成包括哪些部分？,复制是从DNA分子上的特定位置开始的,这一位置叫复制原点,启动子是基因的一个组成部分，是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列,终止子是 DNA分子中终止转录的核苷酸序列,将目的基因导入受体细胞的方法有哪些？,将目的基因导入植物细胞,将目的基因导入动物细胞,将目的基因导入微生物细胞,农杆菌转化法,基因枪法,花粉管通道法,显微注

9、射法,感受态细胞（Ca2+处理法）,农杆菌转化法,农杆菌：生活在土壤中。能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物无感染能力。,过程：,构建表达载体（重组Ti质粒）,将目的基因导入植物细胞之,显微注射技术,2.将目的基因导入动物细胞之,将含有目的基因的表达载体提纯(浓度1-3%ug/mL),取卵,显微注射,人工受精,将受精卵移入子宫,感受态细胞,3、将目的基因导入微生物细胞：,(A)常用的受体细胞：,大肠杆菌(最广泛)、枯草杆菌、土壤农杆菌,(B)导入途径：,受体细胞(细菌),主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞方法,原因：繁殖快，单细胞，遗传物质少。,（-4）,因为大肠杆菌等细菌的

10、细胞壁成分主要是肽聚糖，因此一般要先用Ca2 处理，以增加细菌细胞壁的通透性。,思考：为什么要用Ca2处理细胞？,分子水平的检测,个体水平鉴定,检测转基因生物染色体的DNA 上是否插入了目的基因,检测目的基因是否转录出了mRNA,检测目的基因是否翻译成蛋白质,抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等,DNA分子杂交技术,分子杂交技术, 抗原抗体杂交,8、如何进行目的基因的检测和鉴定？,给虫喂食转基因植物的叶片，观察虫是否死亡,用相应的病菌感染转基因生物，观察该个体是否感病,将转基因生物培养在相应的环境中，观察个体是否存活,（观察杂交后是否出现杂交带）,9、（DNA）分子杂交技术的原理是什么？,碱基互补配

11、对原则,原理,基因治疗：,把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗的目的。,（导入外源基因后，病人体内的缺陷基因仍然存在）,基因诊断（检测）：,运用基因工程设计制造的“DNA探针”检测病毒感染及遗传缺陷。,10、举例说明转基因植物的生产流程（如抗虫棉的培育）,（苏云金杆菌）抗虫基因,（农杆菌Ti质粒）T-DNA,重组质粒,农杆菌,导入,导入,DNA连接酶,（双子叶、裸子植物）组织细胞,基因工程,脱分化,愈伤组织,再分化,胚状体,转基因植物,植物组织培养技术,含有外源基因的植物可看做是杂合子，通过杂交、自交等手段可获得纯合的转基因植物,11、举例说明转基因动物的生产流程（

12、如利用转基因动物生产药物）,药用蛋白基因,乳腺蛋白基因的启动子等调控组件,基因表达载体,显微注射法,受精卵,基因工程,早期胚胎,体外胚胎培养,胚胎移植,代孕母体,转基因动物,胚胎工程,雌性动物分泌的乳汁中含有药用蛋白,乳腺生物反应器,12、举例说明转基因工程菌的生产流程（如利用大肠杆菌生产人的胰岛素）,（1）常选择大肠杆菌等原核生物作为基因工程受体细胞的原因：,繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,（2）过程：,人的胰岛素基因,细菌质粒,重组质粒,Ca2+,大肠杆菌,细胞壁的通透性增大（感受态细胞）,重组质粒与感受态细胞混合，并促进感受态细胞吸收DNA分子,目的基因随受体细胞的繁殖而复制,在大

13、肠杆菌中合成的人的胰岛素没有活性，需经过加工、激活。,蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基 础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质，以满足人类对生产和生活的需求。,1.概念：,第二代基因工程蛋白质工程,2.基本原理 ： 确定蛋白质的功能,蛋白质应有的高级结构,蛋白质应具备的折叠状态,应有的氨基酸序列,应有的碱基排列,创造自然界不存在的蛋白质。,3.蛋白质工程的前提条件：,4.蛋白质工程的关键技术：,了解蛋白质的结构和功能的关系,基因工程,5.蛋白质工程的目的：,定向改造天然蛋白质，创造自然界不存在的蛋白质,6.蛋白质工程的实质：,对编码蛋

14、白质的基因进行改造,细胞工程,指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过某种工程学手段，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。,细胞工程,植物细胞工程,植物组织培养,植物体细胞杂交,动物细胞工程,植物组织培养的概念：,在无菌和人工控制的条件下将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予一定的培养条件，诱导产生愈伤组织和胚状体，最终形成完整的植株。,脱分化,再分化,一、植物组织培养,（分化）,条件？,适宜温度、pH和无菌环境、 无光。无机物、有机物和植物激素（生长素，细胞分裂素等），琼脂,无定形状态薄壁细胞高度液泡

15、化排列疏松、无规则无叶绿体,不进行光合作用,分化程度低脱分化较易,理论基础：,细胞的全能性,植物组织培养的培养基,无机营养成分：无机盐离子有机营养成分： 含N物质：包括维生素和氨基酸 碳源：2%5%的蔗糖溶液，调节渗透压 琼脂：起支持作用 激素：生长素，细胞分裂素和赤霉素PH值：5.06.0,细胞的全能性,1. 概念:,已高度分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能。,2. 原因：,生物体细胞含有本物种所特有的全套遗传信息。,3. 全能性高低：,受精卵胚胎干细胞生殖细胞体细胞植物细胞动物细胞,1、植物细胞表现出全能性的条件有哪些？2、在植物组织培养过程中，为什么要进行一系列的消毒，灭菌，并且要求无

16、菌操作？3、为什么切取胡萝卜根的形成层，其他部分也能培养成小植株吗？,细胞离体、一定的营养物质、激素和其他外界条件。,避免杂菌在上面迅速生长消耗营养，且有些杂菌会危害培养物的生长。,想一想,形成层更容易诱导成愈伤组织，其他部分如叶、花也能培养成小植株，只是稍微困难些。,4、脱分化和再分化对光照有什么要求？为什么？5、决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么？6、请同学们根据上述过程概括出植物组织培养 技术的流程图，并与同学交流。,脱分化避光，因为避光更易形成愈伤组织。再分化需要光照来合成叶绿素。,植物激素。,当生长素含量高于细胞分裂素时，有利于根的形成。,当生长素含量低于细胞分裂素时，有利于芽的

17、形成。,1、定义：,将两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，且把杂种细胞培育成新的植物体的过程。,2、优势：,克服了远缘杂交不亲和的障碍，拓展了可用于杂交的亲本组合范围,植物体细胞杂交,(2),(3),(4),(5),植物体细胞杂交过程示意图,标志,去壁,你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合，遇到的第一个障碍是什么？,细胞壁,有没有一种温和的去壁方法呢？,酶解法（用纤维素酶和果胶酶）,原生质体如何融合的呢？,人工诱导原生质体融合的方法有物理法和化学法两大类：物理法是利用离心、振动、电刺激等促使原生质体融合；化学法是用聚乙二醇(PEG)等试剂作为诱导剂诱导融合 。,如何将杂种细胞培育成杂

18、种植株？,如果两个来源不同的原生质体发生了融合，下一部该做何处理？,应该诱导其再生壁,（融合完成的标志）,植物组织培养,杂种细胞,（AABB）,去壁,（AABB）,植物体细胞杂交（细胞工程育种）,纤维素酶、果胶酶,促融,物理法：离心、振动、电刺激,化学法：PEG（聚乙二醇）,原生质体,融合完成标记：再生细胞壁,杂种植株的染色体数是两亲本细胞染色体之和,脱分化,再分化,杂种植株分析：(1)杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征。原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。(2)杂种植株的染色体组成和基因型：分析方法：体细胞杂交即两个细胞融合成一个细胞，不管染色体、基因组还是染色体组都采用直接相加的方

19、法。实例：若一植物细胞含有2X条染色体，2个染色体组，基因型为Aabb，另一植物细胞含有2Y条染色体，2个染色体组，基因型为ccDd，则新植株应为四倍体，其体细胞中染色体数为2X+2Y，基因型为AabbccDd。,甲 乙（2n=20 ） （2n=20),植物体细胞杂交技术,丙（4n=40）,可育的四倍体,细胞中有4个染色体组，其中2个来自甲，2个来自乙，可分别形成同源染色体，进行正常减数分裂。称为异源四倍体，可育。,白菜 甘蓝（2n=20） （2n=20),配子：,n=10,n=10,n+n=20（细胞中有2个染色体组，但不同源，不可育）,秋水仙素处理,2n+2n=40（细胞中有4个染色体组，

20、形成异源四倍体，可育）,植物细胞工程的实际应用,【速记卡片】1.植物组织培养：(1)条件：离体组织、器官或细胞(外植体)、适宜的营养、植物激素。(2)原理：细胞全能性。(3)过程：脱分化、再分化。(4)结果：得到个体或细胞产物。,2.植物体细胞杂交：(1)原理：细胞膜的流动性、细胞全能性。(2)过程：去细胞壁、融合、植物组织培养。(3)融合方法：物理法(离心、振动、电激等)、化学法(聚乙二醇等)。(4)结果：杂种植株。(5)意义：克服了远缘杂交的不亲和的障碍。,动物细胞培养,动物细胞融合,单克隆抗体制备,细胞核移植,动物细胞工程技术,动物细胞工程的基础,一、动物细胞培养,概念:就是从动物机体中

21、取出相关的组织,将它分散成单个细胞，然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。,一、动物细胞培养,选材：,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养。,在进行动物细胞培养时，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的pH为7.27.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。,分散成单个细胞,细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂

22、增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。,动物细胞生长特性：,一、动物细胞培养,动物机体组织,单个细胞,原代培养,稀释,分装,传代培养,培养过程：,原代培养,培养过程：,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,细胞悬浮液,胰蛋白酶,10代细胞,原代培养,传代培养,无限传代,单个细胞,加培养液,动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。,（分解弹性纤维）,动物细胞培养不能最终培养成生物体,1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？,、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗？,、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？,、如何将动物组织分散成单

23、个的细胞呢？,没有,是,成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖,先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理。,思考题,、细胞膜的主要成份是什么？,、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？,、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？,蛋白质和磷脂,能,注意时间的控制,思考题,、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？,胰蛋白酶水解蛋白质,细胞间的成份是蛋白质,、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？,、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官，请解释原因？,不能，因为两者的最适pH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适pH较接近,胚胎

24、组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛,思考题,11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？,12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？,13、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？,易于培养细胞贴壁，进行生长增殖,当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。,将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后继续增殖。,这样的过程叫做传代培养,思考题,14、如何理解原代培养和传代培养？,15、传代培养的细胞能一直传代下去吗？,16、有些为何能一直传下去？,上述过程中，在第一培养瓶中培养就是原代培养，之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养,不都能,

25、发生突变，朝着癌细胞方向发展,思考题,17、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？,保存10代以内的细胞，因为1050部分细胞的细胞核型可能发生变化，有少部分还发生突变向癌细胞方向发展,思考题,18、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？,不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体,1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基）,保证细胞顺利的生长增殖,培养条件：,动物细胞培养液的主要成分：,葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等

26、。,与植物培养基相比其特点是：,（1）液体培养基,（2）含有血清、血浆,动物体细胞大都生活在液体的环境,培养条件：,3、温度和pH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.44、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）,培养条件：,1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基）,思考题,动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？,主要成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。,独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有血清、血浆

27、等,概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物,核移植,（难度高）,受体细胞：M期的卵母细胞,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,细胞分化程度低，恢复全能性容易,动物克隆（动物细胞核移植技术）,核移植过程涉及动物细胞培养、显微注射技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等手段。,动物体细胞核具有全能性,（1）供体细胞：,采用传代10代以内的细胞,原因：,培养的动物细胞一般当传代至1050代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，其细胞遗传物质可能会发生突变，而10代以内的细胞一

28、般能保持正常的二倍体核型。,（2）受体细胞：,去核的卵母细胞【减数第二次分裂中期（M期）的次级卵母细胞,原因：,a. 卵母细胞体积大，便于操作。,b. 卵黄多，营养物质丰富。,c. 含有激发细胞分裂分化的物质，使细胞核易于表达全能性。,（3）克隆属于无性繁殖，产生的新个体的性别、基因型及绝大多数性状与供核亲本一致,克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞,（4）克隆动物的研究意义,1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白2.改良动物品种 3.治疗人类疾病，作为供体4.保护濒危动物,局限性：1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异

29、常肥胖，发育困难，免疫失调等。2.成功率非常低及克隆动物食品的安全性问题。,、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？,为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用价值的动物提供的细胞。,、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，为什么？,10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型，未发生突变,思考题,3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？,不是，克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞,思考题,4.动物克隆实例很多，为何多莉就举世闻名呢？,在1997年2月

30、英国罗斯林研究所维尔穆特博士科研组公布体细胞克隆羊“多莉”培育成功之前，胚胎细胞核移植技术已经有了很大的发展。实际上，“多莉”的克隆在核移植技术上沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程，但这并不能减低“多莉”的重大意义，因为它是世界上第一例经体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研究的巨大突破。这一巨大进展意味着：在理论上证明了，同植物细胞一样，分化了的动物细胞核也具有全能性,思考题,动物细胞融合,细胞A,细胞B,杂种细胞,灭活的病毒,物理法化学法,动物细胞融合,单克隆抗体,由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特点：特异性强、灵敏度高,单克隆抗体制备过程,细胞融合、筛选,足够数量的、能产生特定抗体的细胞群,单克隆抗体,2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤,植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较,最常规（简捷）的：最快速的：能创造新性状的：能得到无子果实的：能创造新物种的：能在种间进行育种的：,杂交育种,单倍体育种,诱变育种基因工程,多倍体育种（三倍体无子西瓜）、利用植物激素育种（二倍体无子番茄）,多倍体育种、植物体细胞杂交,基因工程育种、植物体细胞杂交,归纳总结,（变异频率低且变异不定向，因此最不容易获得理想品种）,（定向改造生物性状）,