人工感染3种致病弧菌对大黄鱼7种酶活性的影响【开题报告】.doc

1、毕业论文开题报告水产养殖人工感染3种致病弧菌对大黄鱼7种酶活性的影响一、选题的背景与意义大黄鱼PSEUDOSCIAENACROCEA（RICHARDSON）是我国主要海产经济鱼类之一，随着大黄鱼人工育苗技术的完善，其养殖规模也迅速扩大，但随着养殖密度的加大及日常不科学的管理措施，疾病的流行和危害也日益严重。近年来浙江、福建等各省网箱养殖的大黄鱼经常发生一种皮肤溃烂病，其主要症状为体表褪色、呈浅黄色、有出血点，头部、尾部皮肤溃烂，病鱼的尾柄被严重腐蚀，大多数病鱼都露出尾椎骨；肌肉充血，部分病鱼的身体一侧或两侧鳞片成片脱落，下颌、鳍基部充血，病鱼离群独游。解剖发现肝脏肿大、土黄色，有腹水，肠与腹部

2、粘连。许多学者已对网箱养殖大黄鱼溃疡病的病原菌进行了分离鉴定等研究，引起该病的病原菌主要是溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌。鱼类作为低等脊椎动物，在感染各种病原细菌时，主要依赖先天性的非特异免疫来抵御病原细菌感染。然而，有关大黄鱼抗感染的非特异性免疫机能研究很少，仅有的报道也是针对一种病原菌的感染后分析，尚未见有关引起大黄鱼溃疡病的不同病原菌之间的毒力差异及对大黄鱼免疫功能影响的差异性比较研究。从免疫学角度，提高鱼体非特异性免疫机能从而提高其抗病力，减少疾病发生已成为水产动物疾病预防与控制研究领域的热点。本研究通过人工感染引起大黄鱼溃疡病的多种病原菌后，分析大黄鱼血清7种酶活性的变化特点，比较

3、研究其致病机理和规律，对丰富大黄鱼免疫防御机制的理论基础、免疫增强剂的筛选及提高免疫防治技术都具有重要理论意义和应用价值。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题研究的基本内容1解明人工感染副溶血弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌后，分别对大黄鱼7种免疫酶指标的影响。2比较引起大黄鱼溃疡病的不同病原菌对大黄鱼机体损伤的毒力差异。3比较引起大黄鱼溃疡病的不同病原菌对大黄鱼各项非特异性免疫指标之间的差异及相关性。4评价大黄鱼抗感染的非特异性免疫防御功能及其机理。拟解决的主要问题17种非特异性免疫酶指标的选定2大黄鱼抗感染的非特异性免疫防御功能及其机理分析三、研究的方法与技术路线（一）研究方法以腹腔注射的方式，

4、分别人工感染副溶血弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌后，0H，6H，12H，24H，48H，72H，96H后各取6尾大黄鱼，尾静脉取血，4静置过夜后取血清。按以下方法进行大黄鱼溃疡病的7种免疫酶指标变化分析。1溶菌酶LZM的测定采用HULTMARK等的方法进行测定。2碱性磷酸酶AKP、酸性磷酸酶ACP、超氧化物歧化酶SOD、过氧化物酶POD、髓过氧化物（MPO）等总抗氧化能力的测定均采用南京建成生物工程研究所试剂盒进行。3酚氧化酶PO的测定采用参考ASHIDA的方法进行，并加以改进。（二）技术路线四、研究的总体安排与进度碱性磷酸酶AKP酸性磷酸酶ACP超氧化物歧化酶SOD过氧化物酶POD髓过氧化物（M

5、PO）酚氧化酶PO溶菌酶LZM大黄鱼患溃疡病后非特异性免疫机能的影响分析人工感染副溶血弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌，对照组大黄鱼溃疡病病原菌的选定非特异性免疫指标的选定20091220101毕业论文选题2010120103进行文献查阅和资料收集，制定具体研究计划和试验方案。2010320104撰写综述和开题报告20104开题报告答辩20104201012实地采样、试验研究、数据处理和分析2011220103完成外文翻译2011320114论文撰写2011420115提交并答辩五、主要参考文献1陈昌福,罗宇良,蔡冰,等饲养水温对草鱼溶菌酶活性的影响J中国水产科学,1996,3326282金珊,王国

6、良,赵青松,等海水网箱养殖大黄鱼弧菌病的流行病学研究J水产科学,2005,24117193林克冰,周宸,刘家富,等海水网箱养殖大黄鱼弧菌病的病原菌J台湾海峡,1999,18303423474苏跃中,游岚网箱饲养的大黄鱼病害防治J水产科技情报,2000,2721791835苏永全,张彩兰,王军,等大黄鱼养殖M北京海洋出版社,2004,1106孙建和,严亚贤,陈怀青,等鲫鱼的细胞免疫应答研究J上海农学院学报,1998,16289917孙峰,张煜,李立德,等感染嗜水气单胞菌对鲫鱼非特异性免疫功能的影响J中国海洋大学学报,2005,3558158188王军,苏永全,张朝霞,等闽南地区养殖大黄鱼细菌性疾

7、病的病原生物学研究J厦门大学学报自然科学版,2001,4085919王军,鄢庆枇,苏永全,等免疫添加物对大黄鱼血液白细胞数量及其吞噬功能的影响J海洋科学,2001,259444610王军,鄢庆枇,苏永全,等免疫添加物对大黄鱼血液白细胞数量及其吞噬功能的影响J海洋科学,2001,259444611吴志鹏,王三英三联疫苗对大黄鱼常见细菌性疾病免疫保护的实验研究J厦门大学学报自然科学版,2004,43111511812厦门大学,国家海洋局第三海洋研究所大黄鱼养殖病害与性早熟防治技术研究国家863计划项目验收报告13肖克宇,邓时铭,向建国,等水产动物免疫与应用M北京科学出版社,200713919014

8、薛飞,刘涛,周维仁,等绿原酸对异育银鲫血液非特异性免疫因子的影响J江西农业科学,2007,214815115鄢庆枇,王军,苏永全,等网箱养殖大黄鱼弧菌病研究J集美大学学报自然科学版,2001,6319119616鄢庆枇,张俊杰,邹文政,等人工感染溶藻弧菌对大黄鱼免疫功能的影响J水产学报,2007,31225125617鄢庆枇,王军,苏永全,等大黄鱼病原菌溶藻弧菌的ELISA快速检测研究J海洋科学,2001,259475018鄢庆枇,苏永全,王军,等大黄鱼弧菌病的荧光抗体快速诊断研究J集美大学学报,2001,6429129519鄢庆枇,苏永全,王军,等口服免疫添加剂对养殖大黄鱼免疫机能影响的初步

9、研究J集美大学学报自然科学版,2001,6313413720鄢庆枇,苏永全,王军,等溶藻弧菌脂多糖对大黄鱼的毒性与免疫保护性试验J台湾海峡,2003,222016316721杨文川,李立伟,石磊,等福建海水养殖鱼类寄生贝尼登虫病原学研究J台湾海峡,2001,20220520922张辉,张海莲碱性磷酸酶在水产动物中的作用J河北渔业,20035121323张继泽,吴天星,王进波共轭亚油酸对大黄鱼免疫功能的影响J水生态学志,2009,23869024郑天伦,王国良,金珊网箱养殖大黄鱼弧菌病的中草药防治J水产科学,2005,242242525赵维信鱼类生理学M北京高等教育出版社,19922122152

10、6CHENXH,LINKB,WANGXWOUTBREAKSOFANIRIDOVIUSDISEASEINMARICULTUREDLARGEYELLOWCROAKER，PSEUDOSCIAENACROCEA（RICHARDSON）,INCHINAJJFISHDIS,2003,2661561927CHRISTOPHERJBAYNE,LENAGERWICKTHEACUTEPHASERESPONSEANDINNATEIMMUNITYOFFISHJDEVELOPMENTALANDCOMPARATIVEIMMUNOLOGY,2001,2572574328JIANJC,WUZHEFFECTSOFTRADITI

11、ONALCHINESEMEDICINEONNONSPECIFICIMMUNITYANDDISEASERESISTANCEOFLARGEYELLOWCROAKER,PSEUDOSCIAENACROCEARICHARDSONJAQUACULTURE,2003,2181929VILLAMILL,FIGUERASA,ARANGURENR,ETALNONSPECIFICIMMUNERESPONSEOFTURBOT,SCOPHTHALMUSMAXIMUSL,EXPERIMENTALLYINFECTEDWITHAPATHOGENICVIBRIOPELAGIUSJJFISHDIS,2003,2632132930YILDIZHYEFFECTSOFEXPERIMENTALINFECTIONWITHPSEUDOMONASFLUORESCENSONDIFFERENTBLOODPARAMETERSINCARPCYPRINUSCARPIOLJISRJAQUACULTBAMIDGEH,1998,508285