尿干化学分析仪讲稿.ppt

1、,尿干化学分析仪,一、尿液分析仪的分类,（一）按测试项目分类1、8项分析仪：检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿PH、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、尿潜血、尿亚硝酸盐。2、9项分析仪：检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿PH、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、尿潜血、尿亚硝酸盐、尿白细胞。,3、10项分析仪：检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿PH、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、尿潜血、尿亚硝酸盐、尿白细胞、9项分析仪：检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿PH、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、尿潜血、尿亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重。4、11项分析仪：检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿PH、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、尿潜血、尿亚硝酸盐、

2、尿白细胞、尿比重、维生素C。,（二）按自动化程度分类1、半自动尿液分析仪2、全自动尿液分析仪,二、检测原理（一）、尿液分析仪组成 尿液分析仪通常由机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。,1.机械系统：主要作用是在微电脑的控制下，将待测的试带传送到检测位置，检测后将试带传送到废物盒中。不同厂家、不同型号的仪器可能采取不同的机械装置，如齿轮传输、胶带传输、机械臂传输等。全自动的尿液分析仪还包括自动进样传输装置、样本混匀器、定量吸样针等。,2.光学系统：光学系统一般包括光源、单色处理、光电转换三部分。光线照射到反应物表面产生反射光，光电转换器件将不同强度的反射光转换为电信号进行处理。,尿液分析仪的

3、光学系统通常有3种：发光二极管系统、滤光片分光系统和电荷耦合器件。,（1）发光二极管系统：采用可发射特定波长的发光二极管作为检测光源，两个检测头上都有3个不同波长的LED，对应于试带上特定的检测项目分为红、橙、绿单色光（660nm、620nm、555nm），它们相对于检测面以600照射在反应区上。,作为光电转换的光电二极管垂直安装在反应区的上方，在检测光照射的同时接收反射光。因光路近，无信号衰减，使用光强度较小的LED也能得到较强的光信号。以LED作为光源，具有单色性好、灵敏度高的优点。,（2）滤光片分光系统：采用高亮度的卤钨灯作为光源，以光导纤维传导至两个检测头。每个检测头有包括空白补偿的1

4、1个检测位置，入射光以450角照射在反应区上。反射光通过固定在反应区上方的一组光纤传导至滤光片进行分光处理，从510nm690nm分为10个波长，单色化之后的光信号再经光电二极管转换为电信号。,（3）电荷耦合器件系统：以高压灯作为光源，采用电荷耦合器件技术进行光电转换，把反射光分解为红、绿、蓝（610nm、540nm、460nm）三原色，又将三原色中的每一种颜色细分为2592色素，这样，整个反射光分为7776色素，可精确分辨颜色又浅到深的各种微小变化。,3、电路系统：将转换后的电信号放大，经摸/数转换后送中央处理器处理，计算出最终检测结果，然后将结果输出到屏幕显示并送打印机打印。CPU的作用不

5、仅是负责检测数据的处理，而且要控制整个机械系统、光学系统的运作，并通过软件实现多种功能。,（二）、尿液分析仪试剂带单项试带是干化学发展初期的一种结构形式，也是最基本的结构形式。它以滤纸为载体，将各种试剂成分浸渍后干燥，作为试剂层，再在表面覆盖一层纤维膜，作为反射层。尿液浸入试带后与试剂发生反应，产生颜色变化。,多联试带是将多种检测项目的试剂块，按一定间隔、顺序固定在同一条带上的试带。使用多联试带，进入一次尿液可同时测定多个项目。 采用多层膜结构： 第一层：尼龙膜保护作用，防止大分子物质对反应的污染；,第二层：绒制层包括碘酸盐层和试剂层，碘酸盐层可破坏Vit C等干扰物质，试剂层与尿液所测定物质

6、发生化学反应； 第三层是固有试剂的吸水层，可是尿液均匀、快速的浸入，并能抑制尿液流到相邻反应区；,最后一层选取尿液不浸润的塑料片作为支持体。有些试剂无碘酸盐层，但相应增加了1块检测VitC的试剂块，以进行某些项目的校正。,（三）尿液分析仪检测原理 尿液中相应的化学成分使尿多联试带上各种含特殊试剂的膜块发生颜色变化，颜色深浅与尿液中相应物质的浓度成正比；将多联试带置于尿液分析仪比色进样槽，各模块依次受到仪器光源照射并产生不同的反射光，仪器接收不同强度的光信号后将其转换为相应的电讯号，再经微处理器计算出各测试项目的反射率，然后与标准曲线比较后校正为测定值，最后以定性或半定量方式自动打印出结果。,T

7、m 试剂块对测定波长的反射强度Ts 试剂块对参考波长的反射强度Cm 标准块对测定波长的反射强度Cs 标准块对参考波长的反射强度R%= Tm * Cs/ Ts * Cm *100%式中R反射率,尿液分析仪测试原理的本质是光的吸收和反射。试剂块颜色的深浅对光的吸收、反射是不一样的。颜色越深，吸收光量值越大，反射光量值越小，反射率越小；反之，颜色越浅，吸收光量值越小，反射光量值越大，反射率也越大。换言之，特定试剂块颜色的深浅与尿样中特定化学成分浓度成正比 。,不同厂家的尿液分析仪对光的判读形式不一样，但不同强度的反射光都需经光电转换器件转换为电信号进行处理却是一致的。 1.采用发光二极管光学系统的尿

8、液分析仪 2.采用滤光片光学系统的尿液分析仪 3.采用电荷耦合器件光学系统的尿液分析仪,二、检测参数及意义,（一）、酸碱度 1、原理：采用酸碱指示剂法，测试模块中含有甲基红（PH4.6-6.2）和溴麝香草酚蓝（PH6.7-7.6），两种酸碱指示剂适量配合可反映尿液PH4.59.0的变异围，颜色由橙红经黄绿到蓝色变化。,2、临床意义：PH检测主要用于了解反映肾脏调节体液酸碱平衡的能力情况。正常随机尿PH4.6-8.0，平均6.0。（1）尿PH降低：见于酸中毒、慢性肾小球肾炎、痛风、糖尿病等排酸增加；呼吸性酸中毒，因CO2潴留尿多呈酸性。,（2）尿PH升高：频繁呕吐丢失胃酸、服用重碳酸盐、尿路感染

9、、换气过度及丢失CO2过多的呼吸性碱中毒，尿呈碱性。,3、注意事项：（1）检测时使用尿液标本必须新鲜，标本放置过久，尿中细菌繁殖分解尿素产生氨，使尿液呈碱性；或尿中CO2自然扩散造成的丢失，尿液呈碱性。（2）严格按照说明书进行操作，试剂带上不能浸入过量尿液，防止试剂带间影响。,（3）低钾血症性碱中毒时，由于肾小管分泌H+增加，尿酸性增强；反之，高钾性酸中毒时，排K+增加，肾小管分泌H+减少，可呈碱性尿。（4）变形杆菌性尿路感染时，由于尿素分解成氨，尿呈碱性。,影响尿液PH的常见因素,影响因素 酸性尿液 碱性尿液肾功能 肾小球滤过增加， 肾小球滤过正常， 肾小管保碱能力正常 肾小管保碱能力丧失食

10、物 肉类（含硫、磷）及混合性食物 蔬菜、水果（含钾、钠）生理活动 剧烈运动、大汗、应激状态、饥饿 饭后、消化高潮疾病 酸中毒、肾炎、糖尿病 膀胱炎、碱中毒、肾盂肾炎药物 氯化钙、氯化钾 小苏打、碳酸钾、碳酸镁其他 尿内含酸性磷酸盐 尿内混入多量脓、血、 细菌污染、分解尿素,（二）比蜜 1、原理：模块中主要含有两种成分：一种是电解质共聚体，即甲氧乙烯顺丁烯二酸的共聚合体，另一种是酸碱指示剂溴麝香草酚蓝。干化学法尿比重测试原理主要步骤：,（1）、从高分子电解质共聚体释放出质子H+： 试剂带中的甲氧乙烯顺丁烯二酸的共聚合体是弱酸性离子交换体。在测试过程中，尿液中以盐类形式存在的电解质（M+X-），在

11、水溶媒中解离出阳离子（以Na+为主），并和电解质共聚体离子交换体的H+置换，在水溶液中释放出H+。,（2）、释放出的H+和酸碱指示剂反应溴麝香草酚蓝持有解离子成离子性质，变化范围6.27.6，以分子型和离子型比例共存，其比例与相应的色泽起变化。分子型是酸性呈黄色，离子型多碱性呈兰色。,尿比重偏高时，尿液中所含盐类成分多，试剂带中电解质共聚体释放出H+增多，则使溴麝香草酚蓝为分子型，呈现黄色；尿比重偏低时，尿液中所含盐类成分少，试剂带中电解质共聚体释放出H+减少，则使溴麝香草酚蓝为离子型，呈现蓝色。根据不同的颜色变化换算尿比重值。,2、临床意义：尿比蜜是指在4C时尿液与同体积纯水重量之比，主要了

12、解尿液中固体物质的浓度，估计肾脏的浓缩功能。 晨尿比密1.015-1.025；随机尿1.003-1.035。,（1）高比密尿：见于高热、脱水、心功能不全、周围循环衰竭等尿少时；糖尿病及使用碘造影剂时。（2）低比密尿：见于慢性肾小球肾炎、肾盂肾炎、尿崩症。（3）用于糖尿病与尿崩症鉴别。 24小时连续监测尿比密有助于了解肾浓缩稀释功能。,3、注意事项：（1）、标本必须新鲜，强碱、强酸物质均影响尿比重。当尿液PH=7.0时，应在干化学测定结果基础上增加0.005补偿由于强碱性尿造成的损失（尿液存在OH+中和尿液成分使电解质聚合体释放出的H+不与酸碱指示剂反应，致结果偏低）。,（2）、干化学法是测定尿

13、液离子浓度，而比重计法和折射仪法是测定尿液中固体物的浓度，致结果存在差异。（3）、尿蛋白对尿比重结果的影响：由于蛋白分子本身是两性电解质，在一定的PH环境下释放出的H+，对比重测定造成影响。,（4）干化学法不宜用于新生儿尿比重检查，可能由于新生儿尿比重太低，仅在1.002-1.004之间。（5）干化学法不能反映较小的比重变化，只适于过高或过低尿比重筛选，对于系统性观察的病例以折射仪法更理想。,（三）、尿糖 1、原理：模块内葡萄糖氧化酶作用于尿中葡萄糖，形成葡萄糖醛酸和过氧化氢，H2O2催化释放出O，使色源呈现不同的颜色变化。,2、临床意义：（1）血糖增高性糖尿1）饮食性糖尿：短时间内摄入大量糖

14、类或静脉输注葡萄糖。2）一过性糖尿 ：亦称应激性糖尿。颅脑外伤、脑血管意外、情绪激动等情况，出现暂时性高血糖和糖尿。,3）持续性糖尿：见于糖尿病，尿糖测定是判断糖尿病治疗效果的重要指标之一。如并发肾小球动脉硬化症，肾小球滤过滤减低，肾糖阈升高，此时血糖虽超过一般的肾糖阈值，但尿糖仍可呈阴性。,4）其他血糖增高性糖尿：甲状腺功能亢进、肢端肥大症、嗜铬细胞瘤（2）血糖正常性糖尿：肾性糖尿、妊娠后期及哺乳期妇女。（3）其他：乳糖尿、果糖尿,3、注意事项：（1）维生素C的影响：本法特异性强，一般浓度为2.8mmol/L抗坏血酸和浓度为1.0mmol/L以下的乙酰乙酸对本试验影响不大，大量可致假阴性。,

15、（2）尿液在低葡萄糖浓度（14mmol/L）时，Vit C与试带中的试剂发生竞争性抑制反应，使干化学法产生假阴性反应。,（3）尿液被过氧化物、次氯酸盐等污染可使尿糖呈现假阳性结果。（4）尿糖测定为酶法，应严格遵循使用说明书，在规定的温度下按规定时间比色，试剂带应妥善保存于阴凉、干燥处。,（5）高浓度酮体尿可引起假阴性；尿液比重增高，可降低试剂带对糖的敏感性。（6）对于动态观察的糖尿病病人，最好使用湿化学定量分析。,（四）、尿蛋白质 1、原理：模块中含有溴酚蓝，在一定的PH条件下，溴酚蓝产出阴离子，与带阳离子的蛋白质（主要是白蛋白）结合发生颜色变化，颜色深浅与蛋白质含量成正比。,2、临床意义(1

16、)病理性蛋白尿：可分为肾前性、肾性、肾后性蛋白尿。1）肾前性：本周蛋白、血红蛋白尿、肌红蛋白。,2）肾性：肾小球或肾小管疾病蛋白尿。3）肾后性：肾盂、输尿管、膀胱等引起的蛋白尿。,3、影响因素：（1）尿液PH对尿蛋白的影响：当尿液呈碱性时（PH=9.0），超过了试剂带本身的缓冲能力，会出现假阳性。（2）、尿液所含蛋白成分对尿蛋白的影响：当尿中球蛋白浓度达5500mg/L时，结果可出现假阳性。,（3）尿中干扰物对尿蛋白的影响1）尿液内青霉素浓度超过4万u/L时可产生假阴性。2）静脉输注青霉素时，应注意速度和浓度。（4）尿中含较多的细胞或分泌物时，可引起假阳性。,（5）尿液存放时间过久而致细菌生长

17、繁殖可出现假阳性。,（五）酮体 1、原理：模块中的亚硝基铁氰化钠，在碱性条件下可与尿中的乙酰乙酸、丙酮起反应，呈现紫色。,2、临床意义：尿酮体检查主要用于糖代谢障碍和脂肪不完全氧化的疾病或状态的诊断及其他相关疾病的诊断和治疗。,3、影响因素：（1）干化学法对乙酰乙酸的敏感性50-100mg/L，对丙酮为400-700 mg/L，不与羟丁酸反应。（2）标本新鲜：由于尿中的乙酰乙酸和丙酮具有挥发性，乙酰乙酸受热易分解成丙酮，尿中细菌污染繁殖使酮体消失。,（3）不同病程酮体成分的变化对结果的影响：糖尿病酸中毒早期，酮体的主要成分为-羟丁酸，尿糖试验阴性或含量低，当中毒症状缓解后，乙酰乙酸含量反而比初

18、期急性期高，易对病情估计过重，应注意。,（4）试剂带受潮可使尿酮体检测呈现假阴性结果；尿中含有酞、苯丙酮等可呈假阳性结果。,（六）胆红素与尿胆原 1、原理：试带中主要成分是二氯苯胺重氮盐，在强酸介质中，直接胆红素与二氯苯胺重氮盐起偶联反应生成红色复合物。 尿胆原在强酸性条件下，与重氮盐偶联生成紫红色染料。,2、临床意义：尿胆红素、尿胆原检测主要用于消化系统肝脏、胆道疾病及其它相关疾病的诊断、治疗，尤其对于黄疸的鉴别有特殊意义。,3、影响因素：（1）标本新鲜，以免胆红素光照-胆绿素，尿胆原氧化-尿胆素。（2）尿中含高浓度的维生素C和亚硝酸盐时，可抑制偶氮反应成假阴性。（3）一些药物可引起假阳性结

19、果，应注意。,（4）阻塞性黄疸尿胆原减少的病人，不能使用干化学法测定。（无阴性设置）（5）正常人尿胆原排出量在下午2-4时达到高峰，为提高阳性检出率，可预先给患者服用碳酸氢钠以碱化尿液。,（七）尿红细胞或血红蛋白 1、原理：HB具有过氧化物酶样作用，可使过氧化物分解释放新生态氧，再氧化指示剂（邻甲联苯胺）出现颜色变化，颜色深浅与血红蛋白成正比。,2、意义：尿隐血主要用于肾脏、泌尿道疾病及其相关疾病的诊断、治疗。3、影响因素：（1）尿标本必须新鲜，以免细胞破坏致干化学法与镜检法结果人为的误差。,（2）尿液中含对热不稳定过氧化物酶或菌尿可引起假阳性；（3）尿液中含大量维生素C可竞争性抑制反应呈假阴

20、性。（4）细胞破坏造成假阴性现象。（5）不同厂家或不同型号的试剂带敏感度不同，应注意批间差。,（八）亚硝酸盐 1、原理：尿液中有大肠埃希菌感染可将硝酸盐还原为亚硝酸盐，后者与芳香族氨基磺酸发生重氮反应生成重氮化合物，与四氢苯并喹啉-3-酚偶联，生成红色偶氮染料。,2、临床意义：尿亚硝酸盐主要用于尿路细菌感染的快速筛检实验。尿亚硝酸盐实验是细菌感染的指标，阳性结果产生取决于3个条件：（1）尿液中的致病菌须含硝酸盐还原酶（2）体内有适量硝酸盐存在（3）尿液在膀胱停留时间4小时,3、影响因素：（1）本试验与病原微生物种类（是否含硝酸盐还原酶）、体内适量硝酸盐的存在和尿液标本留取的时间（尿液应在膀胱停

21、留4小时以上）有关。（2）一些药物的影响：大量维生素C可致假阴性，高比重尿降低敏感性。,（3）标本放置过久，尿液被亚硝酸盐或偶氮剂污染可呈假阳性结果（4）体内硝酸盐的来源主要是食物中的硝酸盐、体内蛋白质代谢和体内氨内源性合成三个方面。,（九）白细胞 1、原理：粒细胞胞桨内含有酯酶，可作用于模块中吲哚酚酯，产生吲哚酚，与重氮盐反应形成紫色偶氮物。,2、意义：主要用于肾脏、泌尿道疾病的诊断、治疗。3、影响因素：（1）尿标本必须新鲜，以免细胞破坏致干化学法与镜检法结果人为的误差。（2）干化学法测白细胞只与粒细胞反应，而不与淋巴细胞反应。,（3）高浓度胆红素可产生假阳性（4）尿蛋白5g/L或含大剂量先锋4或庆大霉素，可使结果出现假阴性。（5）尿液标本污染甲醛、高浓度胆红素或使用某些药物可出现假阳性结果。,（十）Vit C 1、原理：维生素C在酸性条件下，能将氧化态红色的2，6-二氯靛酚染料还原为无色的2，6-二氯二对酚胺。,2、意义：尿液中Vit C含量的高低对血红蛋白、胆红素、葡萄糖及亚硝酸盐可产生严重的负干扰，干扰的程度随维生素C浓度的增加而增加。因此，维生素C检测的作用在于提示其它项目检测结果的准确性，防止假阴性的出现。,3、影响因素：碱性条件下维生素C不稳定分解，留尿后及时测定。,四、质量控制,（一）、分析前的质量控制,（二）、分析中的质量控制,（三）、分析后的质量控制,