液相色谱分析分离甲地孕酮中2β-甲基化杂质【开题报告】.doc

1、毕业设计开题报告 应用化学 液相色谱分析分离甲地孕酮中 2 -甲基化杂质 一、选题的背景和意义 选题背景 ： 高效液相色谱法是 20世纪 70年代迅速发展起来的一种高效、快速的新型分析分离技术 。 高效液相色谱因其独特的优点已经广泛应用于药物的含量测定、组成分析、物质分离、质量控制等方面 。 在药典的所有分析方法中它是发展最快的一种分析方法 。 高效液相色谱法在药物分析方面的应用主要包括定性分析、杂质的检查、含量测定、药物的稳定性研究、中草药成分及 中成药成分分析、抗生素各组分的分离和测定及临床血药尿药浓度检测等方面 。可见其应用 的广泛性和重要性。 高效液相色谱法 （ HPLC） 法具有分离

2、效率高、应用范围广、分析速度快、样品用量少而且灵敏度高、分离和测定一次完成、易于自动化 , 可在工业流程中使用， 凸显出我们选择高效液相色谱法这个课题的重要意义。 选题意义： 在现今的 医药原料药的生产过程中，伴随着主产物通常会有许多副产物的生成，副产物的含量虽小可也会对人体造成极大的伤害。 为了控制这类副产物，在 药品 标准中有相应的检查项目，把这些副产物控制 在安全范围内 。 所以，在申报新药的过程中，需要对药物中微量杂质进行分离提纯。此乃本课题的重要意义。 二、研究目标与主要内容 （含论文提纲） 研究目标： 本课题是对甲地孕酮中 2 -甲基化杂质进行高效液相色谱法分析并分离提纯。 主要内

3、容： 1、 将甲地孕酮中 2 -甲基化杂质进行富集，找出合适的方法，液相检测富集含量不少于 10%。 2、 摸索出液相色谱分析分离该目标产物的最佳条件。 3、 将液相柱（ C18 柱）换为 C18 半制备柱，以加大进样量，收集 2 -甲基化杂1 质。 4、 对 2 -甲基化杂质收集液进行浓缩，分析，继而分离，直至纯度达到 75%以 上。 论文提纲 ： 1前言 1.1 研究背景 1.2 色谱分离的发展过程 1.3 色谱分离的研究方向 2 高效液相色谱法 2.1 HPLC 分离原理及其分类 2.1.1 液固吸附色谱法 2.1.2 液液分配色谱法 2.1.3 离子交换色谱法 2.1.4 离子对色谱法

4、 2.1.5 离子色谱法 2.1.6 空间排阻色谱法 2.2 高效液相色谱法的特点 2.3 高效液相色谱仪 2.4 高效液相色谱的简单应用 2.4.1 黄酮类化合物 2.4.2 苷类化合物 2.4.3 有机酸类化合物 3实验内容 3.1 实验仪器 3.2 实验试剂 3.2.1 基本试剂 3.2.2 2 -甲基化杂质的定位 3.3 前处理操作 3.4 摸索分离的最佳条件 3.4.1 最佳条件的选择 2 3.4.2 最佳条件的确定 3.5 2 -甲基化杂质的收集与纯度分析 4结论 参考文献 致谢 附录 三、拟采取的研究方法、研究手段及技术路线、实验方案等 研究方法： 首先查阅相关资料了解由高效液相

5、分离法分离该产品的最佳条件的大致范围，再设计实验方案（如下）。我们在摸索最佳条件过程中依次分别取四组流动相，分别为： 1) 甲醇 :水 =80%:20% （色谱纯甲醇和纯净水） 2) 甲醇 :水 =70%:30% （色谱纯甲醇和纯净水） 3) 甲醇 :水 =67%:33% （色谱纯甲醇和纯净水） 4) 甲醇 :水 =65%:35% （色谱纯甲醇和纯净水） 保持其他参数一致，通过液相色谱仪走样得到谱图，然后对谱图进行分析得出最佳条件。 实验方案： 1、对 甲地孕酮中 2 -甲基化杂质进行富集操作。 2、运用液相色谱仪 摸索出液相色谱分析分离该目标产物的最佳条件。 详细操作如下：打开液相色谱仪，运

6、行液相 LCsolution 电脑软件，对其进行参数设定。 a、 分析波长： 254nm b、流动相：色谱纯甲醇，纯净水 c、流动相流量： 1.000mL/min d、检测时间： 100min e、流动相比例：取四组分析，分别为 : 1) 甲醇 :水 =80%:20% 2) 甲醇 :水 =70%:30% 3) 甲醇 :水 =67%:33% 4) 甲醇 :水=65%:35% 在这四组条件中取第三组为例说明实验过程，设定好这些参数后点击 download 键，载入设置，等待基线走稳后，按开始键进行实验。用液相微量进样针吸取目标分离物约10-15L并保证没有气泡在内，将其从注射孔中打入色 谱仪内，检

7、测自动开始。等待其出峰，液相软件自动绘制谱图，再根据谱图分析最佳条件。 3、得出 分离该目标产物的最佳条件后，在最佳条件下将液相柱（ C18 柱）换为 C18 半制备柱，以加大进样量，收集 2 -甲基化杂质。 3 4、 对 2 -甲基化杂质的收集液进行浓缩，分析，继而分离，直至纯度达到 75%以上。 四、中外文参考文献 1王志祥 ,莫芬珠 ,余国琼 ,制备型液相色谱分离技术进展 J,化工时刊 ,1997,11:12-17. 2魏莉 ,张焜 ,方岩雄 ,等 .制备型高效液相色谱技术的研究进展 J,广东化工 ,2005,11:5-7. 3李瑞萍 ,黄骏雄 ,高效制备液相色谱柱技术的研究进展 J,化

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11、alysis, 2010,53:517-525. 五、研究的整体方案与工作进度安排 （内容、步骤、时间） 2010.12.1-2010.12.15 查阅文献，确定可行 的实验方案 2010.12.16-2011.1.1 文献综述，开题报告，外文翻译的书写，修改 2010.12.16-2011.2.5 实验方案的实施阶段，包括实验优化等 2011.1.5-2011.2.10 书写毕业论文，并上交完整初稿 2011.2.10-2011.3.1 毕业论文第一次修改，补做部分实验数据 2011.3.5-2011.4.10 毕业论文第二次修改 4 2011.4.11-2011.4.15 毕业论文定稿，并完成网上提交 2011.4.9-2011.5.7 答辩 ppt 的制作 2011.5.9-2011.5.16 论文答辩 六、研究的主要特点及创新点 本实验研究选择用高效液相色谱法（ HPLC），因其有 分离效率高、分析速度快、灵敏度高、分离和测定一次完成等优点，所以使本研究有了较高的准确性，较好的工作效率，能准确的分离甲地孕酮中 2 -甲基化杂质，有效地控制杂质的影响，保证了研究的目的性和重要性。