ImageVerifierCode 换一换
格式:DOC , 页数:3 ,大小:102.50KB ,
资源ID:300931      下载积分:5 文钱
快捷下载
登录下载
邮箱/手机:
温馨提示:
快捷下载时,用户名和密码都是您填写的邮箱或者手机号,方便查询和重复下载(系统自动生成)。 如填写123,账号就是123,密码也是123。
特别说明:
请自助下载,系统不会自动发送文件的哦; 如果您已付费,想二次下载,请登录后访问:我的下载记录
支付方式: 支付宝    微信支付   
验证码:   换一换

加入VIP,省得不是一点点
 

温馨提示:由于个人手机设置不同,如果发现不能下载,请复制以下地址【https://www.wenke99.com/d-300931.html】到电脑端继续下载(重复下载不扣费)。

已注册用户请登录:
账号:
密码:
验证码:   换一换
  忘记密码?
三方登录: QQ登录   微博登录 

下载须知

1: 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。
2: 试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓。
3: 文件的所有权益归上传用户所有。
4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
5. 本站仅提供交流平台,并不能对任何下载内容负责。
6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

版权提示 | 免责声明

本文(人丙氨酸氨基转移酶ALT试剂盒使用方法.DOC)为本站会员(天***)主动上传,文客久久仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容本身不做任何修改或编辑。 若此文所含内容侵犯了您的版权或隐私,请立即通知文客久久(发送邮件至hr@wenke99.com或直接QQ联系客服),我们立即给予删除!

人丙氨酸氨基转移酶ALT试剂盒使用方法.DOC

1、 人 丙氨酸氨基转移酶 (ALT)试剂 盒使用 方法 检测范围: 96T 2 U/L -60U/L 使用目的: 本试剂盒用于测定 人 血清 、 血浆及相关液体样本 中 丙氨酸氨基转移酶 (ALT)含量 。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中 人 丙氨酸氨基转移酶 (ALT)水平。用纯化的 人 丙氨酸氨基转移酶 (ALT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 丙氨酸氨基转移酶 (ALT), 再与 HRP 标记的 丙氨酸氨基转移酶 (ALT)抗体结合,形成抗体 -抗原 -酶标抗体复合物 ,经过彻底洗涤后 加 底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化

2、成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 丙氨酸氨基转移酶 (ALT)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值), 通过标准曲线 计算样品 中 人 丙氨酸氨基转移酶 (ALT)浓度。 试剂盒组成 1 30 倍浓缩洗涤液 20ml 1 瓶 7 终止液 6ml 1 瓶 2 酶 标试剂 6ml 1 瓶 8 标准 品( 120U/L) 0.5ml 1 瓶 3 酶 标包被 板 12 孔 8 条 9 标准品 稀释液 1.5ml 1 瓶 4 样品 稀释液 6ml 1 瓶 10 说明书 1 份 5 显色剂 A 液 6ml 1 瓶 11 封板膜 2 张 6 显色剂 B

3、液 6ml 1/瓶 12 密封袋 1 个 标本 要求 1标本采集后尽早进行 提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行 实验。 若不能马上进行试验,可 将标本放于 -20 保存,但 应 避免反复冻融 2不能检测含 NaN3 的样品 ,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的( HRP)活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释: 本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进 行稀释。 60U/L 5 号标准品 150l 的原倍标准品加入 150l 标准品稀释液 30U/L 4 号标准品 150l 的 5 号标准品加入 150l 标准品稀释液 15U/L 3 号标准品 150l 的 4 号标准

4、品加入 150l 标准品稀释液 7.5U/L 2 号标准品 150l 的 3 号标准品加入 150l 标准品稀释液 3.75U/L 1 号标准品 150l 的 2 号标准品加入 150l 标准品稀释液 2. 加样:分别设空白孔 (空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 、 标准孔、待测样品孔 。 在酶标 包被板上 标准品准确加样 50l, 待测样品孔中 先加样品稀释液 40l,然后再加待测样品 10l(样品最终稀释度为 5 倍)。 加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁, 轻轻 晃动 混 匀 。 3. 温育:用封板膜封板后置 37 温育 30 分钟 。 4. 配液: 将 30 倍

5、浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 5. 洗涤:小心揭掉封板膜, 弃去液体, 甩干 ,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50l,空白孔除外 。 7. 温育:操作同 3。 8. 洗涤:操作同 5。 9. 显色:每孔先加入显色剂 A50l,再加入显色剂 B50l,轻轻震 荡混匀, 37 避光显色15 分钟 . 10. 终止: 每孔加终止 液 50l, 终止反应 (此时蓝色立转黄色) 。 11. 测定:以空白空调零, 450nm 波长依序测量各孔的 吸光 度( OD 值) 。 测定应 在加终止液后 15 分钟以内进行 。 操作程序总结:

6、 计算 以标准物的浓度为横坐标, OD 值为纵坐标,在 坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以 稀释倍数 ;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以 稀释倍数 ,即为样品的实际浓度。 注意事项 1 试剂盒 从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2 浓洗涤液 可能 会有 结晶 析出,稀释时可在水 浴中加温助溶 ,洗涤时不影响结果。 3 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5

7、 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高 (样本 OD 值大于标准品孔 第一孔的 OD 值 ) ,请先 用样品 稀释 液稀释一定倍数( n 倍) 后再测定,计算时请最后 乘以 总 稀释倍数 ( n 5) 。 5 封板膜 只限一次性使用,以避免交叉污染。 6底物请避光保存。 7 严格按照说明书的操作进行, 试验结果判定必须以酶标仪读数为准 . 8所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 保存条件及有效期 1 试剂盒保存: ; 2-8 。 2有效期: 6 个月

Copyright © 2018-2021 Wenke99.com All rights reserved

工信部备案号浙ICP备20026746号-2  

公安局备案号:浙公网安备33038302330469号

本站为C2C交文档易平台,即用户上传的文档直接卖给下载用户,本站只是网络服务中间平台,所有原创文档下载所得归上传人所有,若您发现上传作品侵犯了您的权利,请立刻联系网站客服并提供证据,平台将在3个工作日内予以改正。