实验三 观察DNA和RNA在细胞中的分布.doc

1、观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布学习指导核酸存在于所有生物的细胞中，它是生物体内与生物的生长、发育、 遗传、变异有关的一类十分重要的化合物。核酸包括脱氧核糖核酸（简称 DNA）和核糖核酸（简称 RNA）。在真核细胞内，DNA 主要分布在 细胞核中，占细胞中 DNA 总量的 98%以上。DNA 呈双螺旋长链状态，与蛋白 质结合， 这个复合物称为染色质。在线粒体、叶绿体内也含有少量的环状 DNA。RNA 主要存在于细胞质中，约占细胞中 RNA 总量的 90%。细胞内的 RNA主要有三种。其中分子量最小的是转移 RNA（tRNA）。tRNA 的主要功能是在蛋白质合成中起携带活化的氨基酸的作用

2、。另一种为核糖体 RNA（rRNA）。rRNA与蛋白质结合而构成核糖体。核糖体是合成蛋白质的细胞器。第三种是信使RNA（mRNA）。mRNA 携 带着遗传信息，在蛋白 质 合成中起着决定氨基酸顺序的模板作用。实验报告【实验目的】1尝试使用吡罗红、甲基绿混合染色剂显示细胞中 DNA 和 RNA 分布的方法。 2说出 DNA 主要分布在 细胞核中，RNA 主要分布在细胞质中。【实验原理】甲基绿和吡罗红两种染色剂对 DNA 和 RNA 的亲和力不同，甲基绿使 DNA呈现绿色，吡罗红使 RNA 呈现红色。利用甲基 绿和吡 罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示 DNA 和 RNA 在细胞中的分布。盐酸能够

3、改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的 DNA 与蛋白 质分离，有利于 DNA 和染色剂结合。【材料器具】1材料：人的口腔上皮细胞，洋葱表皮细胞。2用具：大小烧杯，温度计，滴管，消毒牙签，载玻片，盖玻片， 铁架台，石棉网，火柴，酒精灯，吸水纸 ，显微镜。 3试剂及配制方法：(1）试剂 质量分数为 09%的 NaCl 溶液，质量分数为 8%的盐酸，乙酸钠，乙酸，蒸馏水，吡罗红甲基绿混装粉。如果化学 试剂 商店没有吡罗红甲基绿混装粉，可以分别购买甲基绿和吡 罗红 G，然后按 A 液的第二种方法配制。（2）染色剂的配制染色剂 A 液的两种配制方法第一种方法：取吡罗红甲基绿粉 1 g

4、，加入到 100 mL 蒸馏水中溶解，然后用滤纸过滤，将滤液放入棕色瓶中备用。第二种方法：取甲基绿 2 g 溶于 98 mL 蒸馏水中，取吡罗红 G 5 g 溶于 95 mL 蒸馏 水中。取 6 mL 甲基绿溶液和 2 mL 吡罗红溶液加入到 16 mL 蒸馏水中，即为 A 液，放入棕色瓶中 备用。染色剂 B 液的配制方法 B 液是一种缓冲液，由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠 164 g，用蒸馏水溶解至 1 000 mL 备用；再取乙酸 12 mL，用蒸馏水稀释至 1 000 mL 备用。取配好的乙酸钠溶液 30 mL 和稀释的乙酸 20 mL，加蒸馏水 50 mL，配成 pH 为 48 的

5、 B 液（缓冲液）。 染色剂的配制染色 剂是由 A 液、B 液混合配制而成的。取 A 液 20 mL 和B 液 80 mL 混合，就是实验 中所用的吡罗红甲基绿染色剂。应该注意的是该试剂应现用现配。【实验过程】1.取口腔上皮细胞（1）在洁净的载玻片上，滴一滴质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液。（2）用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下，把牙签上附有碎屑的一端，放在载玻片的液滴中涂抹几下。取人的口腔上皮细胞时，用牙 签的钝头稍稍用力刮取，既可避免划伤黏膜，又可刮取到形态完整、自然脱落之前的 细胞（3）点燃酒精灯，将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。烘干时要注意观察，当涂片将要干时即可。

6、2.水解（1）在小烧杯中加入 30 mL 质量分数为 8%的盐酸，将烘干的载玻片放入小烧杯中。往小烧杯中倒入盐 酸时， 动作要轻要慢，防止盐酸溅在皮肤上。（2）在大烧杯中加入 30 温水。（3）将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温 5 min。（如下图所示）3.冲洗涂片用滴管吸取蒸馏水，让蒸馏水从倾斜的载玻片上缓缓流过涂层，反复冲两三次 ，约 10 秒左右。4.染色（1）用吸水纸吸去载玻片上的水分。（2）将吡罗红甲基绿染色剂滴 2 滴在载玻片上，染色 5 min。（3）吸去多余染色剂，盖上盖玻片。5.观察（1）先在低倍物镜下，寻找染色均匀，色泽浅的区域，观察细胞结构，观察清晰后移至视野中

7、央。（2）转动转换器，换用高倍物镜，并 调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。【实验结论】请你把观察到的实验现象记录在下表中，分析得出结论。选用材料 细胞核的颜色 细胞质的颜色人的口腔上皮细胞洋葱鳞片叶表皮细胞自选材料结 论结论：通过各种动植物实验材料的观察，在细胞核部分被染成了绿色，而在细胞质部分被染成了红色。 说明 DNA 主要分布在细 胞核中，RNA 主要分布在细胞质中。【实验研讨】1、各实验小组的学生交流实验结果请你和其他实验小组交流实验现象和结论，你们 得出的结论是一样 的吗？提示：各个小组通过对不同实验材料的观察发现，同学们观察到的结果非常相似，所以都得出了同样的 结论，即

8、 DNA 主要分布在细胞核中，RNA 主要分布在细胞质中。2、分析实验中盐酸的作用是什么？提示：盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的 DNA 与蛋白质分离，有利于 DNA 和染色剂结合。3、小组间讨论为什么要烘烤玻片？提示：烘烤玻片是为了把细胞固定在玻片上，防止冲洗时被水流冲走，影响实验结果。同时也可以固定 细胞的形态。教师评价评价领域 考核点 教师评价说出核酸的种类基础知识简述核酸的分子结构和功能尝试进行自主学习和合作学习学会运用比较、归纳等方法分析实验结果技能和方法学会以特定的染色剂染色的方法情感态度与价值观参与小组合作与交流，培养学生自主、探究、合作式的学习方

9、式认识生物科学的价值，乐于学习生物科学，养成质疑、求实、创新及勇于实践的科学精神和科学态度思考与研究【典例剖析】1 下列关于“ 观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布”实验的说法正确的是（ ）A. 甲基绿和吡罗红对 DNA 和 RNA 的亲和力不同，实验中应分别加入甲基绿和吡罗红B. 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞C. 该实验用口腔上皮细胞而不用叶肉细胞，是因为叶肉细胞不含RNAD. 盐酸有利于染色体中 DNA 与蛋白质分开，不利于 DNA 与染色剂结合【解析】选 B。实验中加入质 量分数为 8%的盐酸的重要作用：一是改变细胞膜的通透性，加速染色 剂进入细胞；二是使染色体中的

10、DNA 与蛋白质分开，有利于 DNA 与染色 剂结合，故 B 正确，D 错误 ；甲基绿和吡罗红对DNA 和 RNA 的亲和力不同， 实验中应配成甲基绿 吡罗红混合染液，故 A 错误；叶肉细胞含有叶绿体， 绿色会干扰实验结果，故 C 错误。例 2、“观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布”实验中没有用到的 试剂是（ ）A. 质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液 B.质量分数为 8%的盐酸C.吡罗红 甲基绿染色剂 D.斐林试剂【解析】选 D。斐林试剂常用来 检测还原糖的存在，与还原糖水浴加热反应可生成砖红色沉淀。【自我评价】1、“观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布”实验中，下列操作正确的

11、是（ ）A.染色时先用甲基绿染色，再滴加吡 罗红染液B.将涂片用 质量分数为 8%的盐酸处理后，接着用染色剂染色C.观察 时应选择染色均匀、色 泽较浅的区域D.先用低倍镜找到较清晰的细胞，然后直接 换上高倍物镜【解析】选 C。染色时，甲基绿和吡罗红是混合配成染液的；染色前需要将涂片烘干，再用 8%的盐酸处理， 处理后用蒸馏水冲洗，用吸水纸吸去载玻片上的水分再染色；观察时选择染色均匀、色泽较浅的区域，找到较清晰的细胞，需要将其移到视野中央再换高倍镜。2、在“观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布”实验中，将口腔上皮细胞置于质量分数为 8%的盐酸溶液中的主要目的是（ ）A.使细胞中的 DNA 水解成脱氧核苷酸B.用盐 酸改变生物膜的通透性，加速染色 剂进入细 胞C.使细 胞中的物质全部水解D.使染色体中的 DNA 与蛋白质分离，有利于吡罗红与 DNA 的结合【解析】选 B。细胞膜能阻碍染色 剂进入细胞，质量分数 为 8%的盐酸溶液的作用主要与盐酸改变生物膜的通透性，加速染色剂进入细胞有关，也与使染色体中的 DNA 与蛋白质分离，有利于甲基 绿与 DNA 的结合有关。