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大鼠急性心肌缺血模型制备详细图解.doc

1、模型的背景,心肌缺血模型分全心缺血和左心室缺血两种,全心缺血主要靠注射药物(如异丙肾上腺素等),左心室缺血主要靠手术对动物的冠状动脉左降支进行紧扎实现。由于左心室缺血对临床的意义更大,所以研究心肌缺血药物时这个模型是必须的。 ( 1)术前 12小时给动物禁食 ( 2)将动物注射 10%水合氯醛( 0.4mL/100g)麻醉后固定在手术台上 ( 3)用笔型静脉置留针进行气管插管,插好后可用手术刀柄靠近气管,如果见气雾,就证明成功,连接动物呼吸机,参数为:呼吸频率 85;呼吸比 1: 1;潮气量为 18ml ( 4)胸部被毛、酒精棉 消毒,在胸部左侧 34肋间剪开皮肤,如图 1 ( 5)分离肌肉露

2、出肋骨,切口位置有两块肌肉,胸浅肌和胸深肌,注意按照肌肉的纹路分离可以避免将肌肉扯烂,如图 2 ( 6)在第三根肋骨下用止血钳将肌肉分离开,然后左手用止血钳挑住肋骨,右手持剪刀剪开第三根肋骨,如图 3 ( 7)用止血钳将剪断的肋骨夹住掰开,放入开睑器,用止血钳剥离心包膜,如图 4 ( 8)用止血钳将胸腺(心脏上面白的像脂肪一样的东西)夹住拉出,如图 5 ( 9)在左心耳与肺动脉圆锥间穿 60号线,拉紧丝线,形成心肌缺血,观察线扎紧的部位上下大约2mm范围的心肌是发白色的,如图 6 ( 10)闭合胸腔,注意将胸腔内的空气挤出(这点非常关键,这个模型最容易失败导致大鼠死亡的就是这个地方),对肌肉和

3、皮进行缝合,挤空气的手法如图 7 ( 11)结扎术后 6小时可进行 TTC染色:将大鼠脱颈处死,打开胸腔,将心脏剪下,用生理盐水将心脏清洗干净并排出心脏内的淤血,沿冠状沟将心房切除留下心室,用刀片将心脏切成 1mm厚的切片,放入 0.1%的 TTC磷酸盐缓冲液( pH 7.4) 37 水浴 710分钟,取出切片用生理盐水冲洗数次,观察结果。非梗死区因脱氢酶还原 TTC而呈红色,梗死区因脱氢酶流失而呈白色,将梗死区和非梗死区分离并分别称重,梗死范围以梗死心肌占缺血心肌重量的百分比表示。下图是染色的结果,图 8 结扎位置,梗死的地方其实肉眼大致能看出,和其他地方相比发白,图 9: 下面再发正常大鼠和梗死大鼠的心电图区别,是用的 PowerLab 做的,正常的如下 22小时后的心电

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