1、 动物细胞培养和单克隆抗体的制备学习目标：1、 举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。学习重点:1、单克隆抗体的制备和应用。2、单克隆抗体的制备过程。一、预习案1、 动物细胞的融合（1）概念：指 或 动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称为细胞杂交。（2）结果：形成 细胞。（3）过程：不同 的两个细胞 细胞。（4）意义：克服了 杂交的不亲和性，成为研究 、 、肿瘤和生物 培育的重要手段。2、 单克隆抗体（1） 抗体：由淋巴细胞（浆细胞）产生，成分为球蛋白，具有 。从血清中分离出来的抗体产量低、纯度低、特异性差。（2） 单克隆抗体的制备a. 过程b.杂交瘤细胞的特点：既能大量 ，又能产生
2、。c.单克隆抗体的特点： 强、 高、产量大。二、探究案小组讨论。（独立思考，合作共赢）1、动物细胞的融合最有价值的应用是什么?细胞融合完成的标志是什么？。提醒：若 a 和 b 两种细胞融合，则融合的方式有三种 、 和。满足要求的为 ，所以融合后要筛选。动物细胞特有的诱导融合方式为灭火的病毒处理，其他的物理和化学方法在植物和动物细胞融合方面是通用的。3、 单克隆抗体的确切定义是什么？4、 制备单克隆抗体时，为什么要选用 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞？在融合的过程中你可以找出几种类型的细胞？5、 制备单克隆抗体的过程有两次筛选，两次筛选的目的是什么？第一次筛选是 第二次筛选是 三、
3、提升案1、单克隆抗体是指1、 单 克 隆 抗 体 ？单 ：克 隆 ：抗 体 ： 单 个 细 胞 ？无 性 繁 殖抗 原 B细 胞 抗 体特 异 性 结 合单 克 隆 抗 体A单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体 B单个淋巴细胞增殖产生的抗体C单个杂交瘤细胞增殖产生的高度单一的抗体 D单个抗体通过克隆，产生大量抗体2、细胞合成 DNA 有 D 和 S 两种途径，其中 D 途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞由这两种DNA 的合成途径，但一般不分裂增殖。骨髓瘤细胞尽管没有 S 途径，但能不断的分裂增殖，将这两种细胞在试管的培养液中混合，加聚乙二醇促融，再加入氨基嘌呤可筛选出某种细胞。在培养液中存在的细胞种类及
4、筛选出的细胞分别是(细胞融合是仅考虑两个细胞的融合) A三种 杂交瘤细胞 B五种 骨髓瘤细胞C五种 杂交瘤细胞 D一种 杂交瘤细胞3.（多选）将小鼠骨髓瘤细胞与一种 B 淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是AB 淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体C骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体 D骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 4下列用动物工程技术获取单克隆抗体的实验步骤中，不正确的是A.将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的 B 淋巴细胞B用蛋白酶处理 B 淋巴细胞和小鼠的骨髓瘤细胞C用灭活的仙台病毒做诱导剂，促使 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体 5、结合单克隆抗体制备的流程回答下列问题。 技术是单克隆抗体技术的基础。 单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是 动物细胞的融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用 选出的杂交瘤细胞即具备骨髓瘤细胞 的特点，又具备淋巴细胞的 的特点。淋巴细胞是由骨髓中的 细胞分化发育而来。杂交瘤细胞从培养基吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是
