大鼠脑的立体定位技术,浙江大学医学院生理学系 梁华为,目的,了解脑立体定位技术的原理,初步掌握确定某一中枢核团的方法,原理,某些颅外标记与颅内结构具有相对固定的位置关系前囟(bregma):位于冠状缝和矢状缝的交接处人字缝尖(lambda):位于后囟人字缝与矢状缝交会点,脑图谱,应用核团微量注射电位引导核团的刺激或损毁,材料,大鼠,立体定位仪,哺乳类手术器械,牙科钻,20%氨基甲酸乙酯,生理盐水,2%滂胺天蓝溶液,方法和步骤,麻醉 20%氨基甲酸乙酯 0.6 ml/100g, i.p. 固定将大鼠头部固定于脑立体定位仪上,门齿杆 -3.3 mm3个标准检测是否固定成功(鼻对正中,头部不动,提尾不掉),切头皮,剥开皮下组织, 将骨缝暴露清晰,用铅笔在前囟和后囟各做一标志核团定位,做标志, 钻孔 LV(AP: -1.3 R 2.0 H: 3.5)mm小心安放微量注射器,针尖斜面中点进入孔内时,记高度。缓慢进针至LV ,注入10 l 2%滂胺天蓝溶液(2 l/min),留针10 min后缓慢拔针,确定注射位置取下动物,腹腔注射过量的20%氨基甲酸乙酯使动物死亡以咬骨钳咬开颅骨,小心取出大脑,顺着注射点将大脑切开,观察染料是否在侧脑室内,注意事项,立体定位仪为精密仪器,实验时应小心操作,以免损坏微量注射器取出后应立即清洗,以防堵塞,