实验室生物安全.doc

1、 实验室生物安全实验室生物安全不仅仅是实验室人员的个人健康，一旦发生事故，极有可能会给人群、动物或植物带来不可预计的危害；实验室生物安全事故的发生是难以完全避免的，重要的是实验室工作人员应事先了解所从事活动的风险及应在风险已控制在可接受的状态下从事相关的活动。实验室工作人员应认识但不应过分依赖于实验室设施设备的安全保障作用，绝大多数的生物安全事故的根本原因是缺乏生物安全意识和疏于管理。1964-1988 年发生 20 多例汉坦病毒感染事件,2003 年国家 CDC 的 SARS 病毒感染事件都源于生物安全意识的淡薄；国外学者 pike 对 3921 例实验室相关感染进行统计发现，65%的不明原

2、因感染是因为病原微生物形成感染性气溶胶随空气扩散，实验室人员吸入了污染的空气感染的；2004 年发布的国务院 424 号令和国家标准 GB19489 都明确指出生物安全柜是保护工作人员必不可少的主要安全设备；医院临床检验、诊断、病理分析、肿瘤药物配制及相关生物医学研究所、实验室都应使用生物安全柜；导致生物安全的因素有：啮齿动物、昆虫等可给实验室工作人员健康带来威胁；实验室的标本或生物材料中可能携带的潜在病原微生物往往是未知而多样的；另外人的主观因素也是导致生物安全的重要因素，比如说，工作量大、时间紧及管理制度不健全等原因，导致有些检验人员对潜在的隐患认识不足，无菌观念不强，自我保护意识较差，常

3、常未按消毒隔离制度操作，未戴工作帽、手套、口罩、未及时洗手和消毒，甚至用污染的手或戴着污染的手套打接电话，在工作场所饮水、进食、吸烟或穿着工作衣进休息室等都是造成生物安全的原因，管理者应将职业安全教育放在重要位置，作为上岗培训和在职教育的重要内容，重视和加强职业安全培训，牢固防护意识，完善防护制度，加强防护基础建设，推行标准化防护管理，加强检验人员的职业防护教育，严格执行操作规程和消毒隔离制度，提高工作人员的整体防护能力。一般而言，实验室生物安全的基本概念包括：气溶胶，是指悬浮在气体介质中的粒径在 0.001-100m 之间；气锁，是指具备机械送排风系统、整体消毒灭菌条件、压力可监控的气密室，

4、其门具有互锁功能，不能同时处于开启状态；定向气流，指从污染概率小区域向污染概率大的区域走的定向气流；缓冲间，是指需要时设置机械通风系统，其门具有互锁功能；实验室防护区，该区域生物风险较大，需对密闭性、气流、人员进入、个体防护进行严格控制的区域；风险评估：是指评估风险大小以及确定是否可接受的过程；风险控制：是指为降低风险而采取的综合措施；这些都是了解生物安全的基础。实验室生物安全的设计原则和基本要求包括：符合国家、环保规定；防火、安全通道设置符合国家消防规定，考虑生物安全；有紧急撤离路线及标识；温度湿度照度噪声洁净度符合要求；动物实验室要考虑潜在的生物危险的防护；不循环使用动物实验室的空气；传染

5、病的传染性和危害性是不同的，传染病原分为四个危害等级。第一级危害群微生物：与人类成人健康和疾病无关；第二级危害群微生物：在人类所引起的疾病很少是严重的，而且通常有预防及治疗的方法；第三级危害群微生物：在人类可以引起严重或致死的疾病，可能有预防和治疗的方法；第四级危害群微生物：在人类可以引起严重或致死的疾病，但通常无预防和治疗的方法，如炭疽杆菌、霍乱弧菌、埃博拉病毒、天花病毒等。生物安全防护实验室根据微生物及其毒素的危害程度不同，分为P1、P2、P3 和 P4 共四个生物安全等级；一级实验室一般适用于对健康成年人无致病作用的微生物；P1 实验室要求：洗手池，门口应设存衣或挂衣装置，墙壁、地面等易

6、清洁，防水；设备摆放不妨碍逃生和急救；可以自然通风或机械通风；30m 内设有洗眼装置，必要时设紧急喷淋装置；若操作有毒、刺激性、放射性物质时配备适当的负压排风柜；下水应有防回流设计；必要时配备适当的消毒灭菌设备；应设应急照明装置；应有足够的电力供应；二级实验室适用于对人和环境有中等潜在危害的微生物；P2 实验室要求：符合 P1 要求之上；门可自动关闭，有进入控制室；配备洗眼装置；应在操作病原微生物的实验室配备生物安全柜；排风在室内的安全柜应具备通风换气条件；重要设备如：CO2 培养箱，超低温冰箱等应有备用电源；P2+实验室：讲究“上送下排”的层流实验室；1000 个立方的排风安全柜，其排风量相

7、当于 5 匹的空调，一般房间 2.5 匹，所以 5 匹+2.5 匹（准备间）+2.5匹（过度间） ，共需要 10 匹；加装外排管道时，直排：需要加装截止阀，防止在密闭的空间中抽成负压引起倒灌，这种情况建议配置开放式的接口；联动排（系统排）：需要加联动装置，如果管道长需要大功率的三相风机的话，加装定流量阀，独立控制风机流量；三级实验室适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素；P3 实验室分为细胞水平的和动物水平的两类，我国的第一个 P3 实验室建于 1987 年，当时主要用于艾滋病研究。P3 实验室要求：负压实验室，操作 3 级生物因子，分辅助工作区和防护区，共约

8、 5 个房间，房间内传递窗的轴承受能够承压力和密闭性符合所在区域要求。气流由低风险区向高风险区流动，定向气流，防止涡流；空气经过滤器后排出或补入；水系统设有防回流装置；防护区各房间的最小换气数应不小于 15pa；安装消毒灭菌装置；启动实验室通风系统时，应先启动实验室排风，后启动实验室送风；关停时，应先关生物安全柜和排风支管密闭阀，再关实验室送风及密闭阀，最后关实验室排风及密闭阀；四级实验室适用于对人体具有高度的危险性，通过汽溶胶途径传播或传播途径不明、目前尚无有效疫苗或治疗方法的致病微生物或其毒素；P4 实验室是指生物安全四级实验室，专门用于开展烈性传染病的研究，是全球生物安全最高级别的实验室

9、。GB19489 对生物安全的通用要求规范：第一：加强安全设施建设，提供足够的生物安全设备，以应对突发事件的发生。第二：努力做好生物安全隔离制度及个人防护用品工作。在实验室的每个进出口处标明国际通用的危险标志牌。建立好各项试验记录和制定出相应的操作规程及管理文件，加强个人防护，包括物理防护和疫苗免疫两种，物理防护主要是对呼吸道和眼睛的防护，如防风镜、口罩、防护面罩、正压头盔和正压工作服等。第三：做好标本采集接收和废弃物处置，及分类收集工作。严格实行密封化、标志化、无菌化的规范管理原则，按照规定的时间和路线运送至指定地点，由专人进行焚烧。第四：加强对人员的培训是预防和控制实验室感染，确保生物安全

10、的个重要环节，严格建立各项操作规范，个人行为规范，良好的内务规范以及实验及检测后的清场、消毒、灭菌的规范，使工作人员从思想上认识到生物安全的重要性，把生物安全预防落实到每天的工作中去。努力强化责任意识，做到自我监督、控制和管理。生物安全柜选购注意事项，1、如果生物试验中只涉及微生物样品，可以使用基本类型的生物安全柜；2、如果生物试验中涉及了微生物样品和微量化学试剂（非腐蚀性） ，使用装备外排管道的安全柜是必要的。因为 HEPA 过滤器并不能有效过滤清除化学气体，如果不能外排，将对实验室内工作人员和环境造成威胁；3、如果生物试验中涉及了细胞毒素类药物，例如各类癌症治疗药物，必须使用的细胞毒素安全

11、柜，如使用力康牌的 B2 型二级生物安全柜。另外，需要明确了解生物安全柜与通风柜/超净工作台的区分。通风柜和超净工作台不属于生物安全柜，不可使用在涉及微生物材料的实验或生产过程中。通风柜（通风橱）是为在化学实验过程中清除腐蚀性化学气体和有毒烟雾而设计的。由于没有装备 HEPA 过滤器，通风柜不能有效清除微生物介质。放置在通风柜内微生物样品会散播到柜外，污染实验室环境。超净工作台（超净台）是为了保护试验品或产品而设计的，通过吹过工作区域的垂直或水平层流空气防止试验品或产品受到工作区域外粉尘或细菌的污染。一旦微生物样品放置于工作区域，层流空气将把带有微生物介质的空气吹向前台工作人员而产生危险。综上所述：生物安全需要我们工作人员不但在主观意识上提高，了解生物安全实验室建设规范以及管理流程，还要配备合理的生物安全设备，严格按照生物安全通用流程执行；