精子计数板的实用方法及分类.doc

1、精子计数板精子计数板Makler精子计数板产品特性 Makler 精子计数板是全球唯一具有 FDA认证，并被 WHO官方认可的精子计数板，在全球范围内获得极高的声誉。 容易使用 精液不用稀释 快速得到结果 精子计数在 10平方的网格中以 millions/mL标识浓度。不需要额外的系数 计算最佳深度 10 microns标准深度有效消除斑点干扰，精子可以自由游动，可以观察到一个焦平面的图像。内置网格 参考网格位于盖薄片上，便于在不需要的时候移开，不用在目镜中添加网格栅。经济性 重复使用，清洁简单 。准确度 确判定彩色边缘四点，提供自控制准确度测试。盖玻片永远不会被样品顶起。无需校正 重复使用完

2、全准确，永远不用校正 。专业技术 由专业级高级技师精密加工制作，所有产品均经过激光衍射测试，保证了准确度。Makler精子计数板使用方法描述：Makler 精子计数板（腔室）是一种方便使用的设备，用于快速精确的精子计数，活动性和形态学评价，使用未稀释的样品。 包括两个部分（图 1）：1. 下面的主要部分有一个金属基底（A）和两个把手 。在基底的中心有一个光学平玻璃制的平盘（D），样品放置其上。在 头数量代表着他们以 百万/mL为单位的浓度。 附件： 1. 清洁刷. 2. 无毛镜头纸. 3.腔室夹头在精子分析期间此设备应该被放置在显微镜平台上。他紧紧夹住腔室使之可以在平台上平滑移位。 当精子分析

3、结束，握住夹头把腔室滑出。要进行新的精子分析，再次把腔室滑进夹头。MAKLER 精子计数板使用说明书 一、描述：Makler 精子计数板(腔室)是一种方便精子计数的设备，用于快速精确的精子计数、活动性和形态学评价，可使用未稀释的样品。计数板包括两个部分：1. 下面的主要部分有一个金属基底(A)和两个把手(H)。在基底的中心有一个光学平玻璃制的平盘(D)，样品放置其上。在平盘周围有四个针(P)。他们的尖端比平盘高 10微米。2. 上面部分是覆盖玻璃(C)被一个金属环环绕。在他的下表面中心有一个 1 mm平方的格子，被分成 100个方格，每个是 0.1 mm 0.1mm 。当覆盖玻璃放置在四个针上

4、时，在一行上的 10个方格包围的空间就是一毫升的百万分之一。因此，在 10个方格里的精子头数量代表着他们以 百万/mL 为单位的浓度。二、腔室的准备：在把样品放在平盘上之前，确保相对表面彻底清洁且无尘，因为大多数颗粒的尺寸大于玻璃间的狭小空间。为了此目的，用镜头纸擦两个表面。清洁度可以通过把覆盖玻璃放置到四个针上，观察四个接触点彩色边纹(Newton 现象)来检查。对着荧光灯可以看到最好的效果。三、精液分析的方法：充分混合样品，注意避免产生气泡。通过木棒或移液器的帮助，在平盘中心区域放置一小滴。用手指拿起覆盖玻璃黑色点的相反面，并立即放在四根针上。轻柔按下，再次观察彩色边纹。液滴会在平盘的整个

5、区域扩散成厚度 10微米的薄层。只要针没有被淹没，多余的不会影响正常的分析。一旦覆盖玻璃就位，避免触摸、抬起以及再次覆盖。因为这会改变腔室内精子的平均分布。用把手拿起腔室并放置在显微镜平台上。可能需要用腔室夹头来进行固定。四、特别注意事项1，绝对不要对此腔室使用 40 物镜。这样盖玻片在聚焦时会被破坏。2，即使使用合适的 20 物镜，也要小心不要压到覆盖玻璃上。 一般当物镜末端距离表面 1mm的时候，图像是清晰的。如果因为不正确的使用显微镜导致覆盖玻璃损坏，我们不会负责。 3，推荐使用 20 物镜和 10 目镜。不推荐使用 10 物镜，因为精子看起来会太小，除非用 20 目镜。五、精子计数：如

6、果精子太密集和活动，他们首先需要被固定。这很容易做到，通过把样品一部分转移到另一个测试管。然后测试管插入 50-60热水中，大约 5分钟。一滴充分混合的，预热的样品放置在腔室上并盖上覆盖玻璃。在格子的方格里精子头被计数，与血液学中计数血细胞的方法一样。 在此精子的数量是最重要的，在连续一列 10个方格里对其计数。数量代表了以 百万每毫升为单位的浓度。在其他一列或两列里重复此操作，以测定平均值。可以选择用其他 2或 3滴样品进行计数以提高计数的可靠性。在精子缺乏症样品中，推荐在整个格子区域计数。在精子聚焦之后，移动显微镜平台把各自定位在视野中心。然后，调节腔室以使格子线处于水平和垂直位置。在此搜

7、索期间你可能会观察到：A)精子分别是否均匀？如果不是，样品没有混合好。B) 是否所有精子都在一个聚焦平面，没有模糊？如果不是，可能表面没有清洁或两个表面之间有大的颗粒。任意情况，都要从开始重复。六、活动性评价：推荐在样品准备好 3-5分钟之内进行活动性评价，以避免从周边移动过来的精子的干扰。计数 9或 16格内所有不能动的精子。然后计数相同区域内能动的精子且评估移动等级+1 到+4. 在格子的另一个区域重复此过程，以及另外 3到 4滴样品并计算平均值。这样的评估比原始载玻片上的要精确很多，因为那里精子被盖玻片压缩且活动性被损害。Makler 精子计数板提供了标准条件，对所有分析样品精子都可以在

8、一个光滑的水平面自由移动。七、形态学：快速精子形态学评价可以从一个湿的未染色的样品进行，其包含固定的精子。推荐使用一个相差显微镜。在格子的一个特定区域计数所有正常和不正常精子，且从其他样品重复此过程以达到总计数 200。显然，精子缺乏症样品扫描的精子数可以更低。腔室不适合染色的，干的样品进行形态学测定。八、特殊情况：气泡：格子区域如果出现气泡，推荐换一滴样品，除非气泡非常小，不影响分析。大的灰尘颗粒，纤维等，也会通过改变空间大小来影响计数，也应该更换一滴样品。如果样品没有混合完全，高度粘稠，或腔室有颗粒或灰尘；在同一样品不同滴之间计数会出现较大差别。凝聚：在腔室里有时周围的精子会聚集，如果在计

9、数之前过去了太久。这种情况下，更换此滴样品为适当混合的新样品。在个别情况下，在格子区域内会出现胶状聚集，此时应更换样品。结晶：样品时间过长可能包含晶体，可能不会影响计数，但使计数更困难。有时候，这些晶体太大，可能会损坏表面区域。因此，分析包含晶体的样品时需特别注意。九、为了重复使用的清洗和准备：不要用自来水淋洗或浸泡腔室。把刷子蘸水或非腐蚀性杀菌溶液，并擦玻璃的两个面。然后，挤压刷子擦掉剩下的水。最后用无毛镜头纸擦干表面，尽量避免触摸针的尖端。腔室现在可以重复使用了。一般来说，一旦检查固定，不需要改变聚焦。无需提高物镜，简单的把腔室滑进滑出即可。十、附 件： 清洁刷 无毛镜头纸 腔室夹头在精子分析期间此设备应该被放置在显微镜平台上。紧紧夹住腔室使之可以在平台上平滑移位。当精子分析结束，握住夹头把腔室滑出。要进行新的精子分析，再次把腔室滑进夹头。 英文说明书