细菌对药物的敏感试验.doc

1、 近年来，由于抗生素、磺胺等抗菌药物广泛应用，导致了耐药菌株不断出现。测定细菌对药物的敏感程度，对于临床治疗中选择用药，避免滥用药、及时有效地控制感染以及细菌鉴定，具有重要意义。细菌敏感度的测定方法很多，世界卫生组织推荐的方法为 Kirby-Bauer纸片法，该方法具有操作简便、易于掌握、且重视性好的优点，本法是将含药纸片贴敷在接种细菌的琼脂平板上，利用含药纸片在琼脂上的扩散作用来测定细菌对药物的敏感性。K-B 纸片法的原理是建立在抗菌药物抑菌环直径大小与细菌的最小抑菌浓度（MIC）之间呈负相关的基础上，即抑菌环直径越大，则MIC 越小。结果判定：按抑菌环直径大小报告敏感、中度敏感或耐药。敏感

2、：是指被测菌株所引起的感染可以用常用剂量的某种抗菌药物治疗。中度敏感：是指通过提高种抗菌药物的剂量或在该药浓集的部位，细菌生长可被抑制，感染可被治愈。这类药物毒性较小，剂量可以加大。 -内酰胺类药物可出现中度敏感。耐药：是指被测菌株所引起的感染不能用常规剂量的抗菌药物所治愈。中介度：这一范围是“缓冲域”是由试验的误差造成的不作为报告形式。如确需明确的敏感度，应重复实验或做稀释法，抑菌环为中介度的药物不可提高剂量。最低抑菌浓度（MID）：抗菌药物能够抑制细菌生长所需要的最低浓度。以针形接种器沾取菌液加至药盒各孔，35培养过夜，含抗菌素浓度最低而无细菌生长的（清亮孔），即为 MIC。最低杀菌浓度（

3、MBC）：抗菌药物杀灭细菌所需要的最低浓度。经 48 小时 35培养后，含抗菌素浓度最低而无细菌生长的（清亮孔），即为 MBC。由于纸片法影响因素多，很难控制精度，现大多数医院采用 MIC 测定盒。MIC 由经典二倍肉汤稀释演化而来，具有终点判断精确，重复性好，操作简便等优点。此方法采用病美国 DYNATECH 接种器，更具科学性。使用国产“华士达微生物自动分析仪”所做的定量药敏（MIC）试验，报告自动由打印机印出，附印出抗菌素对受试菌的 MIC 外，还可提供各种药物的用量，给药途径（口服、肌注、静滴）及血和尿中可能达到的药物浓度一览表，供临床医师参考。纸片法抑菌环直径及其相当的 MIC（表

4、16-4）。表 16-4 抑菌环直径标准及其相当的 MIC（不包括嗜血杆菌和淋球菌） 1990.4.NCCLS抑菌环直径（mm） 相当的 MIC抗菌药物 纸片含药量 耐药 中介度中度敏感 敏感 耐药 敏感丁胺卡那霉素 30g 14 15-16 - 17 32 16葡萄球菌 20/10g 19 - - 20 8/4 4/2羟氨苄青霉素/棒酸 其他细菌 20/10g 13 - 14-17 16/8 16/8 8/4革兰性阴性肠道菌 10g 13 - 14-16 17 32 8葡萄球菌 10g 28 - - 29 -lactamase 0.25肠球菌 10g 16 - 17 - 16 -非肠链球菌

5、10g 21 - 22-19 30 4 0.12氨苄青霉素单核增多李斯特菌 10g 19 - - 20 4 2氨苄青霉素/青霉烷砜 革兰氏阴性肠道菌和葡萄球菌10/10g 13 - 14-16 17 32/16 8/4苯咪唑青霉素对假单胞菌 75% 17 - - 18 128 64噻肟单酰胺菌素 30g 15 - 16-21 22 32 8假单胞菌 100g 13 - 14-16 17 512 128羧苄青霉素 其他革兰氏阴性菌 100g 19 - 20-22 23 32 16氯头孢菌素 30g 14 - 15-17 18 32 8头孢羟唑 30g 14 - 15-17 18 32 8头孢唑啉

6、 30g 14 - 15-17 18 32 8头孢克肟 5g 15 - 16-18 19 4 1头孢羟苄磺唑 30g 14 - 15-17 18 32 8头孢呱酮 75g 15 - 16-20 21 64 16头孢氨噻肟 30g 14 - 15-22 23 64 8头孢双硫唑甲氰 30g 12 - 13-15 16 64 16头孢甲氧噻吩 30g 14 - 15-17 18 32 8头孢噻甲羧肟 30g 14 - 15-17 18 32 8头孢去甲噻肟 30g 14 - 15-19 20 32 8头孢三嗪噻肟 30g 13 - 14-20 21 64 8头孢呋肟 30g 14 - 15-22

7、23 32 4头孢氨呋肟钠 30g 14 - 15-17 18 32 8头孢噻吩 30g 14 - 15-17 18 32 8氯霉素 30g 12 13-17 - 18 4 8环丙氟呱酸 5g 15 - 16-20 21 4 1氯林可霉素 2g 14 15-20 - 21 4 0.5强力霉素 30g 12 13-15 - 16 16 4氟啶酸 10g 14 - 15-17 18 8 2红霉素 15g 13 14-22 - 23 8 0.5庆大霉素 10g 12 13-14 - 15 8 4亚胺硫霉素 10g 13 - 14-15 16 16 4卡那霉素 30g 13 14-17 - 18 25

8、 6甲氧苯青霉素对葡萄球菌 5g 9 10-13 - 14 16 8假单胞菌 75g 17 - - 18 128 64硫苯咪唑青霉素其他革兰氏阴性菌 75g 17 - 18-20 21 128 16二甲胺四环素 30g 14 15-18 - 19 16 4羟羧氧酰胺菌素 30g 14 - 15-22 23 64 8乙氧萘青霉素对葡萄球菌 1g 10 11-12 - 13 - 1乙基西梭霉素 30g 12 13-14 - 15 32 12氟嗪酸 5g 12 - 13-15 16 8 2葡萄球菌 1g 10 11-12 - 13 4 2苯唑青霉素肺炎球菌（由此可知对青霉素 G的敏感性）1g 19

9、- - 20 - 0.06葡萄球菌 10units 28 11-12 - 29 -lactmase 0.1肠球菌 10units 14 - 15 - 16 -单核增多李斯特菌 10units 19 - - 20 4 2青霉素G非肠链球菌 10units 19 - 20-27 28 4 0.12假单胞菌 100g 17 - - 18 128 64氧呱嗪青霉素 其它革兰氏阴性菌 100g 17 - 18-20 21 128 16利福平 5g 16 17-19 - 20 4 1链霉素 10g 11 12-14 - 15 - -四环素 30g 14 15-18 - 19 16 4假单胞菌 75g 14

10、 - - 15 128 64羧噻吩青霉素 其他革兰氏阴性菌 75g 14 - 15-19 20 128 16假单胞单胞菌 75/10g 14 - - 15 128/2 64/2羟噻吩青霉素/棒酸 其他革兰氏 75/10g 14 - 15-19 20 128/2 16/2阴性菌托巴霉素 10g 12 13-14 - 15 8 4TMP/SMZ 1.25/23.75g 10 - 11-15 16 8/152 2/38万古霉素 30g 9 10-11 - 12 32 4噁噌酸 100g 14 15-18 - 19 64 16萘啶酸 30g 13 14-18 - 19 32 8呋喃妥因 300g 14

11、 15-16 - 17 128 32氟呱酸 10g 12 13-16 - 17 16 4磺胺类 250or300g 12 - 13-16 17 350 100尿路感染专用抗菌药物TMP 5g 10 - 11-15 16 16 4中介度：含意为模棱两可或不定。表 16-5 嗜血杆菌抑菌环解释标准及相应 MIC 分界点抑菌环直径（mm） 相应 MIC（g/ml)a抗菌药物 纸片含药量耐药 中介度b 敏感 耐药 敏感羟氨苄青霉素/棒酸 20/10g 19 - 20 8.0/4.0 4.0/2氨苄青霉素 10g 21 22-24 25 4.0 1.0氨苄青霉素/青霉烷砜 10/10g 19 - 20

12、4.0/2 2.0/1噻肟单酰胺菌素 30g 26 2.0氯头孢菌素 30g 18 19-23 24 32 8.0头孢羟唑 30g 20 21-23 24 16 4.0头孢克肟 5g - - 30 - 1.0头孢羟苄磺唑 30g 20 21-23 24 16 4.0头孢氨噻肟 30g - - 26 2.0头孢噻甲羧肟 30g - - 26 2.0头孢三嗪噻肟 30g - - 26 2.0头孢去甲噻肟 30g - - 26 2.0头孢呋肟 30g 20 21-23 24 16 4.0氯霉素 30g 25 26-28 29 8.0 2.0环丙氟呱酸 5g - - 21 1.0亚胺硫霉素 10g -

13、 - 16 4.0氟嗪酸 5g - - 16 - -利福平 5g 16 17-19 20 4.0 1.0四环素 30g 25 26-28 29 8.0 2.0TMP/SMZ 1.25/23.75g 10 11-15 16 4.0/76 0.5/9.5a.此值为与抑菌环相应的 MIC 近似值。b.“中介度”如予报告，其含意为模棱两可，不定或接近轻敏，如药物能在感染部位浓集可用于治疗。表 16-6 淋球菌抑菌环解释标准及相应的 MIC 1990.4.NCCLS抑菌环直径（mm） 相应的MIC（g/ml）抗菌药物 纸片含药量耐药 中介度 中度敏感 敏感 耐药 敏感头孢三嗪噻肟 30g - - - 3

14、5 - 0.25青霉素 10U 26 - 27-46 47 2 0.06放线壮观霉素 100g 14 15-17 - 18 128 32四环素 30g 30 - 31-37 38 2 0.25近年来，由于抗生素、磺胺等抗菌药物广泛应用，导致了耐药菌株不断出现。测定细菌对药物的敏感程度，对于临床治疗中选择用药，避免滥用药、及时有效地控制感染以及细菌鉴定，具有重要意义。细菌敏感度的测定方法很多，世界卫生组织推荐的方法为 Kirby-Bauer纸片法，该方法具有操作简便、易于掌握、且重视性好的优点，本法是将含药纸片贴敷在接种细菌的琼脂平板上，利用含药纸片在琼脂上的扩散作用来测定细菌对药物的敏感性。K

15、-B 纸片法的原理是建立在抗菌药物抑菌环直径大小与细菌的最小抑菌浓度（MIC）之间呈负相关的基础上，即抑菌环直径越大，则MIC 越小。结果判定：按抑菌环直径大小报告敏感、中度敏感或耐药。敏感：是指被测菌株所引起的感染可以用常用剂量的某种抗菌药物治疗。中度敏感：是指通过提高种抗菌药物的剂量或在该药浓集的部位，细菌生长可被抑制，感染可被治愈。这类药物毒性较小，剂量可以加大。 -内酰胺类药物可出现中度敏感。耐药：是指被测菌株所引起的感染不能用常规剂量的抗菌药物所治愈。中介度：这一范围是“缓冲域”是由试验的误差造成的不作为报告形式。如确需明确的敏感度，应重复实验或做稀释法，抑菌环为中介度的药物不可提高

16、剂量。最低抑菌浓度（MID）：抗菌药物能够抑制细菌生长所需要的最低浓度。以针形接种器沾取菌液加至药盒各孔，35培养过夜，含抗菌素浓度最低而无细菌生长的（清亮孔），即为 MIC。最低杀菌浓度（MBC）：抗菌药物杀灭细菌所需要的最低浓度。经 48 小时 35培养后，含抗菌素浓度最低而无细菌生长的（清亮孔），即为 MBC。由于纸片法影响因素多，很难控制精度，现大多数医院采用 MIC 测定盒。MIC 由经典二倍肉汤稀释演化而来，具有终点判断精确，重复性好，操作简便等优点。此方法采用病美国 DYNATECH 接种器，更具科学性。使用国产“华士达微生物自动分析仪”所做的定量药敏（MIC）试验，报告自动由打

17、印机印出，附印出抗菌素对受试菌的 MIC 外，还可提供各种药物的用量，给药途径（口服、肌注、静滴）及血和尿中可能达到的药物浓度一览表，供临床医师参考。纸片法抑菌环直径及其相当的 MIC（表 16-4）。表 16-4 抑菌环直径标准及其相当的 MIC（不包括嗜血杆菌和淋球菌） 1990.4.NCCLS抑菌环直径（mm） 相当的 MIC抗菌药物 纸片含药量 耐药 中介度中度敏感 敏感 耐药 敏感丁胺卡那霉素 30g 14 15-16 - 17 32 16葡萄球菌 20/10g 19 - - 20 8/4 4/2羟氨苄青霉素/棒酸 其他细菌 20/10g 13 - 14-17 16/8 16/8 8

18、/4革兰性阴性肠道菌 10g 13 - 14-16 17 32 8葡萄球菌 10g 28 - - 29 -lactamase 0.25肠球菌 10g 16 - 17 - 16 -非肠链球菌 10g 21 - 22-19 30 4 0.12氨苄青霉素单核增多李斯特菌 10g 19 - - 20 4 2氨苄青霉素/青霉烷砜 革兰氏阴性肠道菌和葡萄球菌10/10g 13 - 14-16 17 32/16 8/4苯咪唑青霉素对假单胞菌 75% 17 - - 18 128 64噻肟单酰胺菌素 30g 15 - 16-21 22 32 8假单胞菌 100g 13 - 14-16 17 512 128羧苄青

19、霉素 其他革兰氏阴性菌 100g 19 - 20-22 23 32 16氯头孢菌素 30g 14 - 15-17 18 32 8头孢羟唑 30g 14 - 15-17 18 32 8头孢唑啉 30g 14 - 15-17 18 32 8头孢克肟 5g 15 - 16-18 19 4 1头孢羟苄磺唑 30g 14 - 15-17 18 32 8头孢呱酮 75g 15 - 16-20 21 64 16头孢氨噻肟 30g 14 - 15-22 23 64 8头孢双硫唑甲氰 30g 12 - 13-15 16 64 16头孢甲氧噻吩 30g 14 - 15-17 18 32 8头孢噻甲羧肟 30g 1

20、4 - 15-17 18 32 8头孢去甲噻肟 30g 14 - 15-19 20 32 8头孢三嗪噻肟 30g 13 - 14-20 21 64 8头孢呋肟 30g 14 - 15-22 23 32 4头孢氨呋肟钠 30g 14 - 15-17 18 32 8头孢噻吩 30g 14 - 15-17 18 32 8氯霉素 30g 12 13-17 - 18 4 8环丙氟呱酸 5g 15 - 16-20 21 4 1氯林可霉素 2g 14 15-20 - 21 4 0.5强力霉素 30g 12 13-15 - 16 16 4氟啶酸 10g 14 - 15-17 18 8 2红霉素 15g 13

21、14-22 - 23 8 0.5庆大霉素 10g 12 13-14 - 15 8 4亚胺硫霉素 10g 13 - 14-15 16 16 4卡那霉素 30g 13 14-17 - 18 25 6甲氧苯青霉素对葡萄球菌 5g 9 10-13 - 14 16 8假单胞菌 75g 17 - - 18 128 64硫苯咪唑青霉素其他革兰氏阴性菌 75g 17 - 18-20 21 128 16二甲胺四环素 30g 14 15-18 - 19 16 4羟羧氧酰胺菌素 30g 14 - 15-22 23 64 8乙氧萘青霉素对葡萄球菌 1g 10 11-12 - 13 - 1乙基西梭霉素 30g 12 1

22、3-14 - 15 32 12氟嗪酸 5g 12 - 13-15 16 8 2葡萄球菌 1g 10 11-12 - 13 4 2苯唑青霉素肺炎球菌（由此可知对青霉素 G的敏感性）1g 19 - - 20 - 0.06青霉素 葡萄球菌 10units 28 11-12 - 29 -lactmase 0.1肠球菌 10units 14 - 15 - 16 -单核增多李斯特菌 10units 19 - - 20 4 2G非肠链球菌 10units 19 - 20-27 28 4 0.12假单胞菌 100g 17 - - 18 128 64氧呱嗪青霉素 其它革兰氏阴性菌 100g 17 - 18-20

23、 21 128 16利福平 5g 16 17-19 - 20 4 1链霉素 10g 11 12-14 - 15 - -四环素 30g 14 15-18 - 19 16 4假单胞菌 75g 14 - - 15 128 64羧噻吩青霉素 其他革兰氏阴性菌 75g 14 - 15-19 20 128 16假单胞单胞菌 75/10g 14 - - 15 128/2 64/2羟噻吩青霉素/棒酸 其他革兰氏阴性菌 75/10g 14 - 15-19 20 128/2 16/2托巴霉素 10g 12 13-14 - 15 8 4TMP/SMZ 1.25/23.75g 10 - 11-15 16 8/152

24、2/38万古霉素 30g 9 10-11 - 12 32 4噁噌酸 100g 14 15-18 - 19 64 16萘啶酸 30g 13 14-18 - 19 32 8呋喃妥因 300g 14 15-16 - 17 128 32氟呱酸 10g 12 13-16 - 17 16 4磺胺类 250or300g 12 - 13-16 17 350 100尿路感染专用抗菌药物TMP 5g 10 - 11-15 16 16 4中介度：含意为模棱两可或不定。表 16-5 嗜血杆菌抑菌环解释标准及相应 MIC 分界点抑菌环直径（mm） 相应 MIC（g/ml)a抗菌药物 纸片含药量耐药 中介度b 敏感 耐药 敏感羟氨苄青霉素/棒酸 20/10g 19 - 20 8.0/4.0 4.0/2氨苄青霉素 10g 21 22-24 25 4.0 1.0氨苄青霉素/青霉烷砜 10/10g 19 - 20 4.0/2 2.0/1噻肟单酰胺菌素 30g 26 2.0