薄层显色问题综述.doc

1、1有机 TLC 板显色问题的讨论硫酸常用的有四种溶液：硫酸-水(1：1) 溶液；硫酸-甲醇或乙醇 (1：1) 溶液；1.5molL 硫酸溶液与0.5-1.5molL 硫酸铵溶液，喷后 110oC 烤 15min，不同有机化合物显不同颜色。0.5 碘的氯仿溶液 对很多化合物显黄棕色。中性 0.05高锰酸钾溶液 易还原性化合物在淡红背景上显黄色。碱性高锰酸钾试剂 还原性化合物在淡红色背景上显黄色。溶液 I： 1高锰酸钾溶液；溶液：5 碳酸钠溶液；溶液 I 和溶液 等量混合应用。 酸性高锰酸钾试剂 喷 1.6高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸)，喷后薄层于 180oC 加热1520min。酸性重

2、铬酸钾试剂 喷 5重铬酸钾浓硫酸溶液，必要时 150oC 烤薄层。 5磷钼酸乙醇溶液 喷后 120oC 烘烤，还原性化合物显蓝色，再用氨气薰，则背景变为无色。 铁氰化钾-三氯化铁试剂 还原性物质显蓝色，再喷 2molL 盐酸溶液，则蓝色加深。溶液 I： 1铁氰化钾溶液；溶液：2 三氯化铁溶液；临用前将溶液 I 和溶液等量混合。2专属性显色剂由于化合物种类繁多，因此专属性显色剂也是很多的，现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下：(1)烃类 硝酸银过氧化氢检出物：卤代烃类。溶液：硝酸银 O.1g 溶于水 lml，加 2-苯氧基乙醇 lOOml，用丙酮稀释至 200ml，再加 30过氧化氢 1滴。

3、方法：喷后置未过滤的紫外光下照射； 结果：斑点呈暗黑色。 荧光素溴检出物：不饱和烃。溶液：I荧光素 0.1g 溶于乙醇 lOOml；5 溴的四氯化碳溶液。方法：先喷(I)，然后置含溴蒸气容器内，荧光素转变为四溴荧光素( 曙红)，荧光消失，不饱和烃斑点由于溴的加成，阻止生成曙红而保留荧光，多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。 四氯邻苯二甲酸酐检出物：芳香烃。溶液：2 四氯邻苯二甲酸酐的丙酮与氯代苯(10：1)的溶液。方法：喷后置紫外光下观察。 甲醛硫酸检出物：多环芳烃。溶液：37甲醛溶液 O.2ml 溶于浓硫酸 l0ml。(2)醇类 3，5 一二硝基苯酰氯检出物：醇类。溶液：I2 本品甲苯溶液；0

4、.5氢氧化钠溶液；2O.002 罗丹明溶液。方法：先喷(I)，在空气中干燥过夜，用蒸气薰 2min，将纸或薄层通过试液()30s，喷水洗，趁湿通过()15s，空气干燥，紫外灯下观察。硝酸铈铵检出物：醇类。溶液：I 1硝酸铈铵的 0.2molL 硝酸溶液； N,N-二甲基-对苯二胺盐酸盐 1.5g 溶于甲醇、水与乙酸(128m1+25m1+15m1)混合液中，用前将(I) 与( )等量混合。喷板后于 105oC 加热 5min。 香草醛硫酸 检出物：高级醇、酚、甾类及精油。溶液：香草醛 1g 溶于硫酸 lOOml。方法：喷后于 120oC 加热至呈色最深。二苯基苦基偕肼 检出物：醇类、萜烯、羰基

5、、酯与醚类。溶液：本品 15mg 溶于氯仿 25ml 中。方法：喷后于 110oC 加热 5lOmin。结果：紫色背景呈黄色斑点。(3)醛酮类品红亚硫酸检出物：醛基化合物。溶液：I 0.01%品红溶液，通入二氧化硫直至无色； 0.05mol L 氯化汞溶液； O.05molL 硫酸溶液。方法：将 I、以 1：1：10 混合，用水稀释至 l00ml。邻联茴香胺 检出物：醛类、酮类。溶液：本品乙酸饱和溶液。2，4-二硝基苯肼检出物：醛基、酮基及酮糖。溶液：I 0.4本品的 2molL 盐酸溶液；本品 O.1g 溶于乙醇 l00ml 中，加浓盐酸 lml。方法：喷溶液 I 或 后，立即喷铁氰化钾的

6、2molL 盐酸溶液。结果：饱和酮立即呈蓝色；饱和醛反应慢，呈橄榄绿色；不饱和羰基化合物不显色。绕丹宁检出物：类胡萝卜素醛类。溶液：I 1%5%绕丹宁乙醇溶液； 25%氢氧化铵或 27%氢氧化钠溶液。方法：先喷溶液 I，再喷溶液，干燥。(4)有机酸类溴甲酚绿检出物：有机酸类。 溶液：溴甲酚绿 0.1g 溶于乙醇 500ml 和 0.1mol/L 氢氧化钠溶液 5ml。方法：浸板。结果：蓝色背景产生黄色斑点。3高锰酸钾硫酸检出物：脂肪酸衍生物。溶液：见通用显色剂酸性高锰酸钾。过氧化氢检出物：芳香酸。溶液：0.3%过氧化氢溶液。方法：喷后置紫外光(365nm)下观察。结果：呈强蓝色荧光。2，6-二

7、氯苯酚-靛酚钠检出物：有机酸与酮酸。溶液：0.1%本品的乙醇溶液。方法：喷后微温。结果：蓝色背景呈红色。(5)酚类Emerson 试剂 (4-氨基安替比林铁氰化钾( )检出物：酚类、芳香胺类及挥发油。溶液：I 4-氨基安替比林 1g 溶于乙醇 100ml； 铁氰化钾()4g 溶于水 50ml，用乙醇稀释至 100ml。方法：先喷溶液 I，在热空气中干燥 5min，再喷溶液，再于热空气中干燥 5min，然后将板置含有氨蒸气(25氨溶液)的密闭容器中。结果：斑点呈橙-淡红色。挥发油在亮黄色背景下呈红色斑点。Boute 反应检出物：酚类、氯、溴、烷基代酚。方法：将薄层置有 NO2 蒸气(含浓硝酸)

8、的容器中 310min，再用 NH2 蒸气( 浓氨液)处理。氯醌(四氯代对苯醌)检出物：酚类。溶液：1本品的甲苯溶液。DDQ(二氯二氰基苯醌 )试剂检出物：酚类。溶液：2本品的甲苯溶液。TCNE (四氰基乙烯)试剂检出物：酚类、芳香碳氢化物、杂环类、芳香胺类。溶液：0.5%1%本品的甲苯溶液。Gibbs(2，6-二溴苯醌氯亚胺)试剂检出物：酚类。溶液：2%本品的甲醇溶液。氯化铁检出物：酚类、羟酰胺酸。溶液：1%5%氯化铁的 0.5molL 盐酸溶液。结果：酚类呈蓝色、羟酰胺酸呈红色。(6)含氮化合物FCNP(硝普钠铁氰化物)试剂检出物：脂 肪族含氮化物，如氨基氰、胍、脲与硫脲及其衍生物，肌酸及

9、肌酐。溶液：10氢氧化钠溶液、 10硝普钠溶液、 10铁氰化钾溶液与水按 1：1：1 ：3 混合，在室温至少放4置 20min，冰箱保存数周，用前将混合液与丙酮等体积混合。Dragendorff(碘化铋钾试剂)试剂检出物：芳香族含氮化合物，如生物碱类、抗心律不齐药物。溶液：I碱式硝酸铋 0.85g 溶于 10ml 冰醋酸及 40ml 水中； 碘化钾 8g 溶于水 20ml 中。 将上述溶液 I 及 等量混合，置棕色瓶中作为储备液，用前取储备液 lml、冰醋酸 2ml 与水 l0ml 混合。结果：呈橘红色斑点。4- 甲基伞形酮检出物：含氮杂环化合物。溶液：本品 0.02g 溶于乙醇 35ml，加

10、水至 100ml。方法：喷板后置 25氨水蒸气的容器中 ,取出后于紫外灯(365nm)下观察。碘铂酸钾检出物：生物碱类及有机含氮化物。溶液：10六氯铂酸溶液 3ml 与水 97ml 混合，加 6碘化钾溶液，混匀。临用前配制。硫酸高铈铵硫酸检出物：生物碱及含碘有机化物。溶液：硫酸铈 1g 混悬于 4ml 水中，加三氯乙酸 1g，煮沸，逐滴加入浓硫酸直至混浊消失。方法：喷后薄层于 1l0oC 加热数分钟。结果：阿朴吗啡、马钱子碱、秋水仙碱、罂粟碱、毒扁豆碱与有机碘化物均能检出。Ehrlich (对二甲氨基苯甲醛盐酸)试剂检出物：吲哚衍生物及胺类。溶液：1本品的浓盐酸溶液与甲醇按 1：1 混合。方法

11、：喷后板于 50oC 加热 20min。结果：呈不同颜色的斑点。(7)胺类硝酸乙醇检出物：脂肪族胺类。溶液：50 滴 65硝酸于乙醇 100ml 中。方法：需要时 120oC 加热。2，6-二氯醌氯亚胺检出物：抗氧剂、酰胺(辣椒素)、伯、仲脂肪胺、仲、叔芳香胺、芳香碳氢化物、药物、苯氧基乙酸除草剂等。溶液：新鲜制备的 0.52 本品乙醇溶液。方法：喷后薄层于 110oC 加热 10min，再用氨蒸气处理。茜素检出物：胺类。溶液：O.1本品的乙醇溶液。丁二酮单肟氯化镍检出物：胺类。溶液：I丁二酮单肟 1.2g 溶于热水 35ml 中，加氯化镍 095g ，冷却后加浓氨水 2ml； 盐酸羟胺 0.

12、12g 溶于 200ml 水中。方法：将溶液 I 及 混合，放置 1 天，过滤。Pauly (对氨基苯磺酸)试剂检出物：酚类、胺类和能偶合的杂环化合物。5溶液：磺酸 45g 溶于温热的 12molL 盐酸 45ml 中，用水稀释至 500ml，取 lOml 于冰中冷却，加45亚硝酸钠冷溶液 lOml，于 OoC 放置 15min。用前加等体积 10碳酸钠溶液。硫氰酸钴()检出物：生物碱、伯、仲、叔胺类。溶液：硫氰酸铵 3g 与氯化钴 1g 溶于水 20ml。结果：白色至粉红色背景上呈蓝色斑点，2h 后颜色消退。若将薄层喷水或放入饱和水蒸气容器内，可重现色点。1，2-萘醌-4-磺酸钠检出物：芳香

13、胺类。溶液：本品 0.5g 溶于 95ml 水，加乙酸 5ml，滤去不溶物即得。方法：喷后反应 30min 显色。葡萄糖磷酸检出物：芳香胺类。溶液：葡萄糖 2g 溶于 85磷酸 l0ml 与水 40ml 混合液中，再加乙醇与正丁醇各 30ml。方法：喷后于 115加热 l0min。(8)硝基及亚硝基化合物-萘胺检出物：3 ，5 一二硝基苯甲酸酯、二硝基苯甲酰胺。溶液：I O5-萘胺乙醇溶液； 10 氢氧化钾甲醇溶液。方法：先喷溶液 I，再喷溶液。结果：呈红褐色斑点。二苯胺氯化钯检出物：亚硝胺类。溶液：1.5二苯胺乙醇溶液与 0.1g 氯化钯的 0.2氯化钠溶液 lOOml，按 5：1 混合。方

14、法: 喷后置紫外光(254nm)下观察。结果：显紫色斑点。(9)氨基酸及肽类茚三酮检出物：氨基酸、胺与氨基糖类。溶液：本品 O.2g 溶于乙醇 l00ml 中。方法：喷后于 110oC 加热。结果：呈红紫色斑点。茚三酮乙酸镉检出物：氨基酸及杂环胺类。溶液：茚三酮 1g 及乙酸镉 2.5g 溶于 l0ml 冰醋酸中，用乙醇稀释至 500ml。方法：喷后于 120oC 加热 20min。1，2-萘醌-4-磺酸钠检出物：氨基酸。溶液：临用前将本品 O.02g 溶于 5%碳酸钠 l00ml 中。方法：喷后室温干燥。结果：不同氨基酸呈不同色点。靛红乙酸锌6检出物：氨基酸与某些肽类。溶液：靛红 1g 与乙

15、酸锌 1g 溶于 95异丙醇 l00ml 中，加热至 80oC，冷却后加乙酸 1ml，冰箱保存。方法：喷后于 8085“C 加热 30min。 茚三酮冰醋酸检出物：二肽及三肽。 溶液：1茚三酮吡啶溶液与冰醋酸按 5：1 混合。方法：喷后于 l00oC 加热 5min。香草醛检出物：氨基酸及胺类。溶液：I本品 1g 溶于丙醇 50ml 中;1mol L 氢氧化钾溶液 lml，用乙醇稀释至 lOOml。方法：先喷溶液 I 后于 110oC 干燥 l0min，再喷溶液，于 110oC 再干燥 l0min，于紫外光(365nm)下观察。(10)甾类香草醛硫酸检出物：甾体激素。溶液：1香草醛浓硫酸溶液。

16、方法：喷后于 105加热 5min。氯化锰检出物：雌激素类。溶液：氯化锰 0.2g 溶于含硫酸 2ml 的甲醇 60ml 中。方法：喷后置紫外光(365nm)下观察。高氯酸检出物：甾体激素。溶液：5高氯酸甲醇溶液。方法：喷后于 110oC 加热 5min，置紫外光(365nm)下观察。三氯化锑乙酸 检出物：甾类与二萜类。溶液：三氯化锑 20g 溶于乙酸 20ml 与氯仿 60ml 混合液中。方法：喷后于 100oC 加热 5min，紫外光长波下观察。结果：二萜类斑点呈红黄-蓝紫色。对甲苯磺酸检出物：甾族化合物、黄酮类与儿茶酸类。溶液：20本品的氯仿溶液。方法：喷后于 100oC 加热数分钟，紫

17、外光长波下观察。结果：斑点呈荧光。氯磺酸乙酸:检出物：三萜、甾醇与甾族化合物。溶液：氯磺酸 5ml 在冷却下加乙酸 l0ml 溶解。方法：喷后于 130oC 加热 5l0min，置紫外光长波下观察。结果；斑点显荧光。(11)糖类茴香胺、邻苯二酸试剂检出物：碳氢化合物。溶液：1.23g 茴香胺及 1.66g 邻苯二酸于 l00ml 95乙醇中的溶液。7方法：喷雾或浸渍。结果：己糖呈绿色、甲基戊糖呈黄绿色、戊糖呈紫色、糖醛酸呈棕色。四乙酸铅2 ， 7 一二氯荧光素检出物：甙类、酚类、糖酸类溶液：I 2四乙酸铅的冰醋酸溶液； 1 2，7 一二氯荧光素乙醇溶液。 取溶液 I、 各 5ml 混匀，用干燥

18、的苯或甲苯稀释至 200ml，试剂溶液只能稳定 2h。方法：浸板。邻氨基联苯磷酸检出物：糖类。溶液：O.3g 邻氨基联苯加 85磷酸 5ml 与乙醇 95ml。方法：喷板后 llOoC 加热 1520min 。结果：斑点呈褐色。苯胺二苯胺磷酸检出物：还原糖。溶液：4g 二苯胺、4ml 苯胺与 20ml 85磷酸共溶于 200ml 丙酮中。方法：喷后于 85加热 l0min。结果：产生各种颜色。1，4-己醛糖、低聚糖呈蓝色。双甲酮磷酸检出物：酮糖。溶液：双甲酮(5，5-二甲基环己烷-1，3-二酮)10.3g 溶于 90ml 乙醇与 l0ml 85磷酸中。方法：喷板后于 110oC 加热 1520

19、min 。结果：日光下观察，白色背景上呈黄色斑点，紫外光长波下呈蓝色荧光。联苯胺三氯乙酸检出物：糖类。溶液：0.5g 联苯胺溶于 l0ml 乙酸，再加 10ml40三氯乙酸水溶液，用乙醇稀释至 l00ml。方法：喷后置紫外光下照射 15min。结果：斑点呈灰棕-红褐色。对二甲氨基苯甲醛乙酰丙酮检出物：氨基糖类。溶液：I. 5ml 50氢氧化钾溶液与 20ml 乙醇混匀，取此溶液 0.5ml，加乙酰丙酮 0.5ml 与正丁醇 50ml 的混合液 l0ml，此两种溶液均需新鲜配制，临用前混合； . 1g 对二甲氨基苯甲醛溶于 30ml 乙醇中，再加 30ml 浓盐酸，需要时此溶液可用正丁醇 180

20、ml 稀释。 方法：先喷 I 后于 105oC 加热 5min，再喷，然后于 90干燥 5min。结果：斑点呈红色。(12)杀虫剂 甲基黄检出物：氯化杀虫剂及抗菌化合物。溶液：O.1g 甲基黄于 70ml 乙醇中，加 25ml 水并用乙醇稀释至 l00ml。方法：喷板后于室温干燥，并在无滤光片紫外光下照射 5min。结果：黄色背景上呈红色斑点。 溴四氯化碳 检出物：有机磷杀虫剂。溶液：10溴的四氯化碳溶液。8方法：薰溴蒸气。 锰水杨醛检出物：有机硫代磷杀虫剂。溶液：I100mg 氯化锰溶于 100ml 80乙醇； 溶解 1.3g 2-肼喹啉于小量热乙醇中，溶 1g 水杨醛于 5ml 乙醇并加

21、12 滴冰醋酸，合并两溶液并回流 30min，冷却后析出水杨-2-醛-2-喹啉腙沉淀，并用乙醇重结晶。用 50mg 此衍生物溶于 100ml 乙醇中。方法：等量溶液 I 及混合后，喷板。 二苯胺氯化锌检出物：氯化杀虫剂(DDT 、CPCA 、氯-DDT、克菌丹、甲氧氯、毒杀芬 )。溶液：二苯胺及氯化锌各 0.5g 溶于 100ml 丙酮中。方法：喷后 200oC 加热 5min。 溴荧光素硝酸银检出物：杀虫剂。溶液；I5 溴的四氯化碳溶液； 1ml 0.25荧光素的二甲基甲酰胺溶液，用乙醇稀释至 50ml； 1.7g 硝酸银溶于 5ml 水中，加 2-苯氧基乙醇，用丙酮稀释至 200ml。方法

22、：展开后的薄层置试液 I 容器中薰 30s，取出先喷溶液，再喷溶液，再置紫外光下 7min。(13)黄酮类 乙醇胺二苯硼酸盐检出物：黄酮类。溶液：I. 1乙醇胺二苯硼酸盐的甲醇溶液； . 5聚乙二醇的乙醇溶液。方法：先喷溶液 I，再喷溶液使荧光稳定，再在紫外光长波下照射 2min。结果：紫外灯下观察荧光。 三氯化锑检出物：黄酮类。溶液：10三氯化锑的氯仿溶液。方法：喷板。结果：紫外光长波下呈荧光。 三氯化铝 检出物：黄酮类。溶液：1 三氯化铝乙醇溶液。方法：喷板。结果：紫外光长波下显黄色荧光。 Benedict(硫酸铜枸橼酸钠 )试剂检出物：含邻二羟基的黄酮类及香豆精类。溶液：1.73g 硫酸

23、铜(CuS04 5H20)：17.3g 枸橼酸钠及 10g 无水碳酸钠溶于水并稀释至 1 00ml。方法：喷板。结果：紫外光长波下观察，含邻二羟基的化合物，斑点荧光减弱或猝灭。 (14)含硫化合物 硝普钠检出物：巯基-SH 基(半胱氨酸)、双硫化物、-s-s-基( 胱氨酸)及精氨酸。溶液：I. 1.5g 硝普钠溶于 5ml 2molL 盐酸溶液及 95ml 甲醇中，加 10ml 25氢氧化铵溶液，过滤，即9得； . 2g 氰化钠溶于 5ml 水，用甲醇稀释至 100ml。方法：先喷溶液 I、再喷溶液。结果：巯基化合物呈红色；精氨酸由橙变为灰蓝色；双硫化物在黄色背景上显红色。 FCNP(硝普钠铁

24、氰化物)试剂检出物：脂肪族含硫化台物，如氨基氰、硫脲及其衍生物。溶液：10氢氧化钠溶液、10硝普钠溶液，10铁氰化钾溶液与水按 1：1：1：3 混合，用前与等体积丙酮混合，用时新鲜配制。 3 氯化铁磺基水杨酸检出物：硫代磷酸酯类。溶液：I1 氯化铁的 80乙醇溶液；1 磺基水杨酸的 80乙醇溶液，方法：薄层先置溴蒸气中 10min 后，喷溶液 I，干燥 15min，再喷溶液。结果：紫色背景上呈白色。 、 ： 叠氮化碘检出物：含硫氨基酸、硫化物与青霉素。溶液：叠氮碘溶液-叠氮钠 3g 溶乎 100ml 0.05molL 碘溶液中(新鲜配制，固体叠氮碘有爆炸性)。 靛红硫酸检出物：噻吩衍生物。溶液

25、；0.4g 靛红溶于 100ml 浓硫酸中。方法：喷板后 120oC 加热。结果：呈不同颜色。(15)类脂化合物 磷钼酸检出物：胆酸、类脂化物、脂肪酸及甾类。溶液：250mg 磷钼酸于 50ml 乙醇中。方法：唆后予 120oC 加热。 罗丹明 6G检出物；类脂化物。溶液：lg 罗丹明 6G 溶于 100ml 丙酮中方法：喷后置紫外光长波下观察。 溴百里酚蓝检出物：类脂化物。溶液：O04g 溴百里酚蓝溶于 100ml O01molL 氢氧化钠溶液中。(16)阳离子 双硫腙检出物：金属离子。溶液：20mg 双硫腙溶于 100ml 丙酮中，置棕色瓶中于冰箱内保存。方法：上述溶液喷板后再喷 25氢氧

26、化铵溶液。 红氨酸 (二硫代草酰胺)检出物：重金属离子。溶液：0.5红氨酸乙醇溶液。方法：先喷上述溶液，稍干后置薄层于氨蒸气中。 。 茜素10检出物：众多阳离子、稀土及铀。溶液：茜素乙醇饱和溶液。方法：喷板后直接放入氨蒸气中。 亚铁氰化钾检出物：Fe3+、Cu2+、Cl、Mo、V、W 离子。溶液：新配制的 2亚铁氰化钾溶液。 二苯卡巴肼检出物：Ag+、pb2+、Hg2+、Cu2+、Sn2+、Mn2+、Zn2+、Ni2+、Co2+及 Ca2+离子。溶液：I1 2二苯卡巴肼乙醇溶液；25氢氧化铵溶液。方法：先喷溶液 I，再喷溶液。结果：Ni2+ 呈蓝色、Co2+呈橙褐色、 Zn2+呈红紫色，Ag+

27、、pb2+、Cu2+、Sn2+、Mn2+呈褐色、乙酸汞加成物于 80oC 加热片刻，斑点呈蓝色。(17)阴离子 硝酸银检出物：含硫阴离子、砷酸盐、亚砷酸盐磷酸盐、亚磷酸盐及除氟外的卤素。 溶液：0.10.5molL 硝酸银溶液中加氨水直至沉淀溶解。临用前配制、储存会形成易爆物质。方法：喷后于 110120oC 加热 l0min，必要时置紫外光下 l0min。 硝酸银氢氧化铵荧光素检出物：卤素离子。溶液：I1g 硝酸银溶于 l00ml O.5molL 氢氧化铵溶液中；1g 荧光索溶于 l00ml 乙醇中。方法：先喷溶液 I，稍干，再喷溶液。 钼酸铵亚硫酸钠检出物：硫化物、硫代硫酸盐与磷酸盐。 ：溶液：I5 钼酸铵的 lmolL 硫酸溶液；5 亚硫酸钠溶液。方法：先喷溶液 I，再喷溶液，于 105加热 30min。结果：硫化物及硫代硫酸盐呈深蓝色，磷酸盐呈蓝灰色。 番木鳖碱检出物：溴酸盐、硝酸盐、氯酸盐。溶液：I0.02番木鳖碱的 lmolL 硫酸溶液；2mol L 氢氧化钠溶液。方法：先喷溶液 I，再喷溶液。结果：溴酸盐、氯酸盐呈血红色，硝酸盐呈橙黄色。