1、微生物知识培训一、环境中的微生物自然环境中微生物无处不在，空气、水、食物及物体表面，包括人的体表体内等都有很多的微生物存在，大部分是非致病菌。其种类有细菌、酵母、霉菌以及更微小的支原体、病毒等，它们在我们周围遇到合适的条件大量孳生，有些是有益的，如促进动植物的代谢生长，杀灭害虫，降解有害物等；而有些是有害的，是能给人和动植物造成病害的。在我们制药行业的洁净厂房内，环境的要求对微生物是要清除的，无论是哪一种类都是不允许存在的。所以，独立的室内空调过滤除菌系统、室内正压系统及相应的操作程序和制度，都是为了保障室内的洁净度。二、微生物的生长环境：细菌借助于空气的流动、物体的相互接触等形式得到转移，如
2、果有合适的炭源、氮源和水分，细菌就会得到大量繁殖。环境中的大部分有机物都能被细菌作为食物分解利用，特别是含丰富的碳水化合物和蛋白质的农副产品，更是微生物喜爱孳生的基物。所以，生产环境要保持设备、地面、墙壁的洁净和干燥，需要勤擦勤洗。而且在厂房的设计中就最大限度的避免了产生死角，就是为了便于粉尘的清理和防止堆积。纯净水理论上没有细菌可利用的物质，细菌不能孳生，但是在存放过程会吸收空气中的 CO2、NH 3、尘埃等，在静止状态会有物质的微量堆积，给细菌的生长提供了条件。三、 灭菌（一）几个概念的区分1、灭菌是指用物理或化学方法将所有致病和非致病的微生物及其芽孢全部杀灭。2、防腐是指用低温或化学药品
3、防止和抑制微生物生长繁殖。3、消毒是指用物理和化学方法将病原微生物杀死。（二）灭菌法的分类物理灭菌法：干热灭菌法湿热灭菌法灭菌法 射线灭菌法滤过除菌法化学灭菌法：气体灭菌法化学药剂杀灭菌法无菌操作法（三）物理灭菌法1、干热灭菌法指利用火焰或干热空气进行灭菌的方法。）火焰灭菌法不适宜药品的灭菌，而适用于金属、玻璃、陶瓷等物品的灭菌。）干热灭菌法在高温干热空气中灭菌的方法。本法特点：穿透力弱、灭菌温度较高，灭菌时间较长。药典规定为 160170 需 2 小时以上；170180需 1 小时以上；250需45 分钟。热原经 25030 分钟或 200以上 45 分钟可遭破坏。适用范围：既耐热又不允许湿
4、气穿透的物品的灭菌，如注射用油、油脂性基质、玻璃容器（如安瓿瓶、西林瓶等） 、耐高温的药粉等。湿热灭菌法在饱和蒸汽、沸水或流通蒸汽中进行灭菌的方法。本法特点：灭菌效率高，因为有水分存在，蒸汽潜热大、穿透力强，使微生物的蛋白质更容易变性或凝固而死亡。）煮沸灭菌法是把待灭菌的物品放入沸水中加热灭菌的方法，通常煮沸时间为 3060min。）流通蒸汽灭菌法是在常压下用 100流通蒸汽加热杀灭微生物的方法，通常灭菌时间为 3060min。流通蒸汽法和煮沸灭菌法的灭菌效果不如热压灭菌法，不能保证杀灭所有的芽胞，但操作简便、使用安全。适用于一些不耐热且容量小的肌肉注射剂，还可以考虑加入抑菌剂。）热压灭菌法是
5、用大于常压的饱和水蒸气加热杀灭微生物的方法。（）特点灭菌可能杀灭所有细菌繁殖体和芽胞，应用广泛。（）灭菌条件 115（67kPa） ，30min；121（97kPa） ，20min；126（139kPa） ，15min。灭菌的效果以标准灭菌时间 F0 来衡量，一般 F0 应不少于 8。（）适用范围凡能耐受高压蒸汽的制剂（如输液、注射液、眼药水、合剂等） 、玻璃、金属容器、瓷器、橡胶塞、膜滤过器等均能采用此法。（）使用该法的注意事项：必须使用饱和蒸汽；必须将灭菌器内的空气排除；灭菌时间必须从全部药液温度达到要求温度时算起；为避免压力和温差太大而使物品冲出或玻璃瓶炸裂，灭菌完毕后必须使压力逐渐降到
6、0，才能放出锅内蒸气，缓慢打开灭菌锅。）影响湿热灭菌的因素（）细菌的种类与数量（）药物的性质与灭菌的时间（）蒸气的性质应使用饱和蒸气（）介质的性质）低温间歇灭菌法适用于不耐高温的制剂的灭菌。但费时、对芽胞的杀灭效果不理想，必要时应加入抑菌剂。射线灭菌法）-射线辐射灭菌法特点是不升高被灭菌产品的温度，穿透性强，适用于维生素、抗生素、激素、医疗器械、高分子材料等不耐热的物品的灭菌。还可对已包装好的制剂灭菌，可减少污染。）紫外线灭菌法最强灭菌的紫外线波长是 254nm。其灭菌的机理是，紫外线作用于微生物核酸蛋白，促使其变性，同时空气受紫外线照射产生微量臭氧，从而起共同杀菌作用。本法适用于物体表面、无
7、菌室的空气及蒸馏水的灭菌。）微波灭菌法该法适用于水性药液的灭菌，具有快速、均匀、节能、环保等特点。滤过除菌法是指用除菌滤器除去活的或死的微生物的一种方法。常用的除菌滤器有微孔薄膜滤器(孔径 0.22m)或 G6 号垂熔玻璃漏斗。本法适用于对热不稳定的药物溶液，以及水和气体的除菌。除菌过程要在无菌条件下操作，以免污染。（四）化学灭菌法 概念 用化学药品直接作用于微生物而将其杀死的方法。不能杀死芽胞，仅对繁殖体有效。目的在于减少微生物的数量，控制一定水平的无菌状态。 气体灭菌法利用环氧乙烷气体、甲醛蒸气、丙二醇蒸气等杀菌性气体进行杀菌的方法。环氧乙烷可应用于粉末注射剂、不耐热的医用器具、设施、设备等。甲醛气体、丙二醇气体适用于操作室内的灭菌。 化学药剂灭菌法利用药液杀灭微生物的方法。该法常应用于其它灭菌法的辅助措施。常用的有 0.1%0.2%苯扎溴铵溶液，2%左右的酚或煤酚皂溶液，75%的乙醇溶液。
