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iNOS、CD34在喉鳞状细胞癌组织中的表达与血管形成的关系.docx

1、iNOS、CD34 在喉鳞状细胞癌组织中的表达与血管形成的关系【摘要】 目的 探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和 CD34 在喉鳞状细胞癌中的表达及其发病过程中的作用。方法 采用免疫组化 Elivision 法检测 30 例喉鳞状细胞癌、10 例声带非典型增生中 iNOS 和 CD34 的表达,并检测 MVD。结果 30 例喉鳞状细胞癌中 iNOS 的阳性表达率为 8033 (25/30) ,声带非典型增生中iNOS 的阳性表达率为 10%(1/10)。CD34 在喉鳞状细胞癌和声带非典型增生的阳性表达率分别为80(24/30) ,30(3/10)。iNOS、CD34 阳性表达两组间差异有统

2、计学意义(P10。按 Weidner 法进行微血管计数,任何被 CD34 染成棕黄色或棕褐色的内皮细胞或细胞簇作为一个微血管计数,这些血管之间必须要有清楚的分离,先在 40 倍光镜下挑选微血管分布最密区域,200 倍视野下计数 5 个不重复视野中的阳性血管数,取其平均值作为每例的 MVD。14 统计学方法 计数资料用率() 表示,组间差异采用 2、t 检验;所有数据在 SPSSl10 统计软件上进行,以 P005 为差异有统计学意义。2 结果iNOS 主要表达于喉鳞状细胞癌组织细胞的细胞质和细胞膜内,少数表达于细胞核,iNOS 表达阳性的细胞分布无明显规律,阳性细胞分布不均,癌巢周边及浸润前缘

3、细胞密集,癌巢中央特别是有明显角化的细胞表达低。iNOS 在喉鳞状细胞癌的阳性表达率为 8033(25/30)。iNOS 在声带非典型增生细胞内仅 1例阳性表达,阳性表达率为 10%(1/10)。iNOS 在喉鳞状细胞癌及声带非典型增生的表达存在显著统计学差异(P0001)。CD34 在喉鳞状细胞癌的阳性表达率为 80(24/30)。CD34 在声带非典型增生细胞内的阳性表达率为 30(3/10)。CD34 在喉鳞状细胞癌及声带非典型增生的表达存在统计学差异(P0005)。喉鳞状细胞癌及声带非典型增生的微血管密度分别为 43451006,21 34631,两者相比有显著统计学差异(P0001

4、)。表 1 iNOS、CD34 在喉鳞状细胞癌及声带非典型增生中的表达和微血管密度3 讨论 一氧化氮(NO)是近年来发现的生物体内重要的细胞内信使分子,分子量极小,但在人体的生理、病理过程中起着重要作用,与多种疾病,特别是肿瘤的发生发展过程密切相关。一氧化氮合酶是催化 NO 生物合成的关键酶,在正常组织中很少表达,可由炎症、缺氧等刺激因素诱导巨噬细胞、炎性中性粒细胞及肿瘤细胞等产生。目前已知体内有 3 种 NOS,其分别为神经型(nNOS),内皮型(eNOS)和诱导型(iNOS)。nNOS、eNOS 属于结构型 NOS(constructiveNOS,cNOS),其活性变化受 Ca2+和钙调蛋

5、白调节,又称钙离子依赖型。一般认为,cNOS 催化生成的 NO 主要参与维持血管舒张和神经信息传递等;而 iNOD 不受Ca2+和钙调蛋白调节,生理状态下不具备活性,但在各种刺激因素下诱导活化,参与多种病理过程2 。近年来人们在对 NO 与肿瘤生物学行为的研究中发现,NO 合成关键酶 NOS 与肿瘤的生长有直接关系。 即在多种肿瘤细胞中存在活性增高的现象。NO 可以促进肿瘤血管生成,增强肿瘤组织的血液供应,从而促进肿瘤细胞生长。喉鳞状细胞癌细胞异常增殖和凋亡。肿瘤血管形成是肿瘤生长和侵袭转移等生物学行为的病理基础,喉鳞状细胞癌的发生发展需要新生血管化参与,大量的血管形成是喉鳞状细胞癌向周边发展

6、侵袭的必备条件。有研究表明 VEGF、CD34 在喉鳞状细胞癌组织中有高表达,与血管形成有关。本研究结果表明,iNOS 在喉鳞状细胞癌中有高表达,提示 iNOS 参与了喉鳞状细胞癌的血管形成过程,可能与喉鳞状细胞癌的发生发展及侵袭转移有关。具体机制可能是 iNOS 催化产生的 NO 促进新生血管形成;或是 iNOS 及其催化产生的 NO 促进血管内皮生长因子形成,活性增高,通过与内皮细胞上的特殊受体作用,直接刺激内皮细胞分化增殖和迁移,促进血管构建及生成,加快基底膜降解,诱导内皮细胞细胞膜成窗,促进内皮细胞移动,即直接参与了血管形成过程;并通过增强血管通透性,促进血浆纤维蛋白外渗形成血管外纤维

7、蛋白基质,为血管生成过程中多种细胞迁移提供一个纤维网架35。有研究证明,在角膜肿瘤血管模型研究显示,给兔饮用含有 NOS 抑制剂 N 硝基L 精氨酸的水后,肿瘤新生血管减少,体积缩小,敲除 iNOS 基因的小鼠接种 B16F1 细胞后,成瘤率降低,并伴有 VEGF 表达降低6。 血管生成 CD34 存在于微血管的内皮细胞,它能通过抗体与其相应的血管内皮细胞结合,增加内皮细胞的化学趋向性,促进血管内皮的分裂和毛细血管出芽生长,诱导蛋白溶解酶生成,有利于内皮细胞穿过基质,促进新生血管形成78。因此,CD34 被认为是血管最特异的标记物,因此 CD34 的含量变化直接反映了喉鳞状细胞癌血管的多少。本

8、组的结果表明喉鳞状细胞癌的微血管密度明显高于声带非典型增生,提示喉鳞状细胞癌有明显的血管新生,在癌巢周边及浸润前缘血管新生更加明显,可能与喉鳞状细胞癌的侵袭转移有关,丰富的血管不仅增加了肿瘤细胞进入血液循环的几率,而且还可以沿邻近与毛细血管伴行的淋巴管,进一步促进经淋巴转移。 综上所述,iNOS 和 CD34 在喉鳞状细胞癌组织中高表达,可能与喉鳞状细胞癌的发生发展及侵袭转移有关,同时也提示选择性 NOS 抑制剂可以阻断新生血管形成,从而影响喉鳞状细胞癌的发生发展和侵袭转移。【参考文献】1 冯红杰,陈伟良,李劲松,等.诱导型一氧化氮合酶在颌骨肉 瘤中的表达及意义J. 临床口腔医学杂志,2006

9、,22(4):209-211.2 林 震,陈仕平,叶传忠,等.一氧化氮合酶在膀胱癌中的表达及与肿瘤血管形成的关系J.中华泌尿外科杂志,2003,24(2):99-101.3 Konopka TE,Barker JE,Bamford TL,et alNitric oxide synthase II gene disruption:implications for tumor growth and vascular endothelial growth factor productionJCancer Res,2001,61(7):3182-3187.4 Franchi A,Gallo O,Pag

10、lierani M,et al.Inducible nitric oxide synthase expression in laryngeal neoplasia:correlation with angiogenesisJ.Head Neck,2002,24(1):16-23.5 Kojc N,Zidar N,Vodopivec B,et alExpression of CD34, alphamooth muscle actin,and transforming growth factor beta l in squamous intraepithelial lesions and squa

11、mous cell carcinoma of the larynx and hypopharynxJHum Pathol,2005,36(1):16-21.6 Kon K,Fujii S,Kosaka H,et alNitric oxide synthase inhibition by N(G)nitroLarginine methyl ester retards vascular sprouting in angiogenesisJMicrovasc Res,2003,65(1):2-8.7 刘晓翌,夏 冬,张玉霞,等.大鼠肺癌癌变过程中癌组织内微血管的定量研究J.现代肿瘤医学,2006,14(6):649-650.8 王乾兴,谭兵兵,谭晓珊,等.FVIIIRAg 和 CD34 标记早孕胎盘绒毛微血管的比较研究J.遵义医学院学报,2006,29(1):38-39.9 Franchi A,Gallo O,Paglierani M,et al. Inducible nitric oxide synthase expression in laryngeal neoplasia:correlation with angiogenesisJHead Neck,2002,24(1):16-23.

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