副溶血性弧菌.doc

1、副溶血性弧菌 副溶血性弧菌（Vibrio Parahemolyticus），为革兰氏阴性杆菌，呈弧状、杆状、丝状等多种形状，无牙孢 1 。进食含有该菌的食物可致食物中毒，也称嗜盐菌食物中毒。临床上以急性起病、腹痛、呕吐、腹泻及水样便为主要症状。副溶血性弧菌是一种海洋细菌，主要来源于鱼、虾、蟹、贝类和海藻等海产品。此菌对酸敏感，在普通食醋中 5 分钟即可杀死；对热的抵抗力较弱 1 。副溶血性弧菌 外文名 Vibrio Parahemolyticus 类 型 细菌 隶 属 海洋细菌1简介副溶血性弧菌（Vibrio Parahemolyticus,VP）是一种嗜盐性细菌。 副溶血性弧菌食物中毒，是进

2、食含有该菌的食物所致，主要来自海产品，如墨鱼、海鱼、海虾、海蟹、海蜇，以及含盐分较高的腌制食品，如咸菜、腌肉等。本菌存活能力强，在抹布和砧板上能生存 1 个月以上，海水中可存活 47 天。临床上以急性起病、腹痛、呕吐、腹泻及水样便为主要症状。本病多在夏秋季发生于沿海地区，常造成集体发病。由于海鲜空运，内地城市病例也渐增多。此菌对酸敏感，在普通食醋中 5 分钟即可杀死；对热的抵抗力也较弱。副溶血性弧菌食物中毒多发生在610 月，海产品大量上市时。中毒食品主要是海产品，其次为咸菜、熟肉类、禽肉、禽蛋类，约有半数中毒者为食用了腌制品后。中毒原因主要是烹调时未烧熟煮透或熟制品被污染。2生物学特征副溶血

3、弧菌系弧菌科弧菌属，革兰染色阴性，兼性厌氧菌，为多副溶血弧菌形态杆菌或稍弯曲弧菌。本菌嗜盐畏酸。最适宜的培养基：温度为 3037 ，含盐 2.5%3%(若盐浓度低于 0.5%则不生长），pH 值为 8.08.5。本菌对酸较敏感，当 pH6 以下即不能生长，在普通食醋中 l一 3min 即死亡。在固体培养基上菌落常隆起，圆形，表面光滑，湿润。在 3%一 35%含盐水中繁殖迅速，每 89min 为一周期。对高温抵抗力小，50 20 min； 65 5 min 或 80 1 min 即可被杀死。本菌对常用消毒剂抵抗力很弱，可被低浓度的酚和煤酚皂溶液杀灭。3临床表现潜伏期自 1 小时至 4 天不等，多

4、数为 10 小时左右。起病急骤，常有腹痛、腹泻、呕吐、失水、畏寒及发热。腹痛多呈陈发性绞痛，常位于上腹部、脐周或回盲部。腹泻每日 320 余次不等，大便性状多样，多数为黄水样或黄糊便。约 2%16%呈典型的血水或洗肉水样便，部分病人的粪便可为脓血样副溶血性弧菌或粘液血样，但很少有里急后重。由副溶血性弧菌引起的食物中毒一般表现为急发病，潜伏期 224h，一般为 10h 发病。主要的症状为腹痛，优势腹痛在脐部附近剧烈。腹痛是本病的特点，多为阵发性绞痛，并有腹泻、恶心、呕吐、畏寒发热，大便似水样。便中混有黏液或脓血，部分病人有里急后重，重症患者因脱水，使皮肤干燥及血压下降造成休克。少数病人可出现意识

5、不清、痉挛、面色苍白或发绀等现象，若抢救不及时，呈虚脱状态，可导致死亡。由于吐泻，患者常有失水现象，重度失水者可伴声哑和肌痉挛，个别病人血压下降、面色苍白或发绀以至意识不清。发热一般不如菌痢严重，但失水则较菌痢多见。国内报道的副溶血弧菌食物中毒，临床表现不一，可呈典型、胃肠炎型、菌痢型、中毒性休克型或少见的慢性肠炎型型 2 。本病病程自 16 日不等，可自限，一般恢复较快。预防措施与其他细菌所致者似。1、动物性食品应煮熟煮透再吃。2、隔餐的剩菜食前应充分加热 1 。3、防止生熟食物操作时交叉污染。4、梭子蟹、蟛蜞、海蜇等水产品宜用饱和盐不浸渍保藏（并可加醋调味杀菌），食前用冷开水反复冲洗。4来

6、源和传播途径分布极广，主要分布在海水和水产品中，我国华东地区沿岸的海水的副溶血性弧菌检出率为 47.5%66.5%，海产鱼虾的平均带菌率为 45.6%48.7%，夏季可高达 90%以上。除了海产品以外，畜禽肉、咸菜、咸蛋、淡水鱼等都发现有副溶血性弧菌的存在。海水是本菌的污染源，海产品、海盐、带菌者等都有可能成为传播本菌的途径，另外有肠道病史的居民、渔民带菌率偏高，也是传染源之一。预防措施包括：动物性食品应煮熟煮透再吃；隔餐的剩菜食前应充分加热；防止生熟食物操作时交叉污染；海产品宜用饱和盐水浸渍保藏（并可加醋调味杀菌），食前用冷开水反复冲洗。5发病机理吞服 10 万个以上活菌即可发病，个别可呈败

7、血症表现。该菌有侵袭作用，其产生的 TDH 和 TRH 的抗原性和免疫性相似，皆有溶血活性和肠毒素作用，可引致肠袢肿胀、充血和肠液潴留，引起腹泻。 TDH 对心脏有特异性心脏毒，可引起心房纤维性颤动、期前收缩或心肌损害。有人发现脲酶病腹泻有关。患者体质、免疫力不同，临床表现轻重不一，呈多型性。山区、内陆居民去沿海地区而感染者病情较重，临床表现典型；沿海地区发病者病情一般较轻。6流行病学1、传染源传染源为病人，集体发病时往往仅少数病情严重者住院，副溶血性弧菌而多数未住院者可能成为传染源，但由于病人仅在疾病初期排菌较多，其后排菌迅速减少，故不至因病人散布病菌而造成广泛流行。2、传播途径本病经食物传

8、播，主要的食物是海产品或盐腌渍品，常见者为蟹类、乌贼、海蜇、鱼、黄泥螺等，其次为蛋品、肉类或蔬菜。进食肉类或蔬菜而致病者，多因食物容器或砧板污染所引起。3、地区分布特点：日本及我国沿海地区为副溶血性孤菌食物中毒发病率的高发区。据调查，我国沿海水域、海产品中副溶血性弧菌检出率较高，尤其是气温较高的夏秋季节。但近年来随着海产食品的市场流通，内地也有副溶血性弧菌食物中毒的散在发生。4、季节性特点及易感性：7 9 月常是副溶血性弧菌食物中毒的高发季节。男女老幼均可患病，但以青壮年为多，病后免疫力不强，可重复感染。5、食物的种类：主要是海产品，其中以墨鱼、带鱼、虾、蟹最为多见，如墨鱼的带菌率达 93%，

9、其次为盐渍食品。食品中副溶血性弧菌的来源：人群带菌者对各种食品的直接污染。沿海地区饮食从业人员、健康人群及渔民副溶血性弧菌带菌率为 11.7%左右，有肠道病史者带菌率可达 31.688.8%。间接污染，沿海地区炊具的副溶血性弧菌带菌率为 61.9%，被副溶血性弧菌污染的食物，在较高温度下存放，食用钱加热不彻底或者生吃，或熟制品受到带菌者、带菌的生食品、带菌容器及工具等的污染 2 。7PCR 检测用于检测 Vp 的 PCR 方法主要有任意引物 PCR(abritrarilyprimedPCR，Ap-PCR)、针对副溶血性弧菌任意引物 PCR、多重 PCR(muhiplex-PCR)、实时 PCR

10、(Real-timePCR)。 1、任意引物 PCRMatsumoto等采用任意引物 PCR 对 Vp 进行检测。他们针对 V。p 的 tdh 基因和 trh 基因一段特异的序列，设计两条引物，引物 1：5-GGTGCGGGAA-3，引物 2：5 一 GTTTCGCTCC 一 3，对 19771998 年所收集的 227 株 Vp 进行 PCR。通过电泳分析发现，1996-1998 年收集的 22 株血清型为 03：K6 菌株与 1996 年以前收集的 03：K6 血清 型菌株基因序列有所不同，为 03；K6 血清型新出现的变异株，并最初出现在孟加拉国。这是目前最简单的以基因为基础的细菌亚分型

11、方法。2、针对任意引物 PCR 由于临床分离株绝大多数含有 tdh 基因，因此绝大部分研究者都根据 tdh 设计引物进行特异扩增。1993 年，Lee 等根据 tdh 基因设计引物 ，对 36 株 TDH+株、89 株 TDH-株以及 46 株其他弧菌和肠道菌进行 PCR 检测。结果显示，36 株 TDH+株全部特异扩增出来，其余菌株都没有扩增；而检测灵敏度高，最低检测量可至 40pgDNA，并可直接检测粪便标本，无需分离培养，方便快速。 1999 年，Kim 等选择 toxR 基因序列设计两对引物，5-GTCTTCTGACGCAATCGTTG-3 和 5一ATACGAGTGGTTGCTGTC

12、ATG 一 3，对 14 株 Vp、 14 株其他弧菌进行 PCR。结果显示，14 株 Vp 都得到一条 368bp 的特异扩增亮带，而其他菌株没有特异扩增。此外，Venkateswaran 等选择 gyrB 基因设计引物对 Vp 进行 PCR、Cordova 等选择 pR72H 基因设计引物进行 PCR，特异性、灵敏度都很好。3、多重 PCR 由于不是全部副溶血性弧菌都含；tdh 基因或， trh。基因，所以只针对 tdh 或 trh 的单一PCR，有时会漏检。多重 PCR(multiplex-PCR)能全方位高效率地检测 Vpo1994 年，Bej 白等针对“、tdh、trh设计不同的引物

13、对，在同一 PCR 反应体系内同时扩增 tl、tdh、trh。结果显示，所有的 V。p 都扩增出“基因，tl 基因是 Vp 特异的；54%的 Vp 扩增出 tdh 基因；只有 3873% 的 Vp 扩增出 trh 基因；该法灵敏度高，能把 log 牡蛎培养肉汤里 10100 个 Vp 检测出来。与其他常规生化方法相比，多重 PCR 更快速，仅 8h就能完成检测，结果更为准确、可靠，而且还可改进成定量竞争 PCR，对标本中靶序列进行定量。4、实时 PCR 常规 PCR 检测，需要从反应体系中吸取产物做电泳或 Southern 杂交等试验进行鉴定，转移过程中易污染，造成假阳性，而且耗费时间。199

14、6 年，Tyagi 开创了一种实时 PCR(Real-timePCP,)。实时PCR 是在，PCR 反应体系中加入标记有报告基团和淬灭 基团的线性 Taqman。探针或茎环型荧光分子信标探针，在墓因扩增过程中，与产物杂交，此时，报告基团和淬灭基团分开，根据能量共振转移现象，报告基团发出荧光而被检测。这种方法操作简单，闭管检测，减少污染，灵敏度高，并且可以在 PCR 结束或 PCR 过程进行同步定性或定量检测，面且可以进行临床大规模快速检测。8治疗措施1、支持及对症治疗 脱水者需输入生理盐水及葡萄盐水，或口服补液盐，以纠正失水。血压下降者，除被动补充血容量，纠正酸中毒等外，可酌用血管活性药。2、

15、抗菌药物 轻度患者可不用抗菌药物，较重者可给复方新诺明或庆大霉素、阿米卡星和诺氟沙星等喹诺酮类抗菌药物【上述抗生素类可能使细菌产生耐药性，使用须谨慎】。3、发生中毒后要立即停止食用可疑中毒食品，并到医院医治。副溶血性弧菌对氯霉素敏感。呕吐、腹泻严重者要补充水和盐。9中毒预防加工海产品的案板上副溶血弧菌的检出率为 87.9%。因此，对加工海产品的器具必须严格清洗、消毒。海产品一定要烧熟煮透，加工过程中生熟用具要分开。烹调和调制海产品拼盘时可加适量食醋。食品烧熟至食用的放置时间不要超过 4 个小时。主要病理变化为空肠及回肠有轻度糜烂，胃粘膜炎、内脏（肝、脾、肺）淤血等。辅助检查1、白细胞计数总数多在 1 万 mm3 以上，中性粒细胞偏高。2、便检查镜检可见白细胞或脓细胞，常伴有红细胞，易被误诊为菌痢。粪便培养可检出副溶血弧菌，绝大多数迅速转阴，仅少数持续阳性 24 天。