真菌培养基.doc

1、沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂，沙堡弱培养基，SDA（一） 组成葡萄糖 40.0g蛋白胨 10.0g琼脂 12.015.0g蒸馏水 1000ml（二） 制法上述混合后加入 200mg 氯霉素， 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。（三） 目的是常用的分离或保存菌种的培养基。沙氏液基，SDB（一） 组成葡萄糖 40.0g蛋白胨 10.0g蒸馏水 1000ml（二） 制法上述混合后加入 200mg 氯霉素， 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，SDA with antibiotic（一） 组成葡萄糖 40.0g蛋白胨 10.0g琼脂 12.015.0g蒸馏水 1000ml

2、（二） 制法上述混合后加入 200mg 氯霉素。 250mg 放线菌酮，121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，modified SDA（一） 组成葡萄糖 20.0g蛋白胨 10.0g琼脂 12.015.0g蒸馏水 1000ml（二） 制法上述混合后 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。（三） 目的保存菌种培养基。马铃薯葡萄糖琼脂，PDA（一） 组成马铃薯 200.0g葡萄糖 20.0g琼脂 12.015.0g蒸馏水 1000ml（二） 制法先将马铃薯洗净去皮切片，加水 180ml，煮沸 30 分钟后过滤，再加葡萄糖、琼脂，将过滤液补足到 1000ml，121 摄氏

3、度灭菌后备用。（三） 用途此培养基是培养真菌较好的培养基，同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。玉米吐温 80 琼脂，CMA with T w80（一） 组成玉米粉 40.0g琼脂 15.0g蒸馏水 1000ml吐温 80 10ml（二） 制法先将玉米粉混于水中，65 摄氏度水浴一小时，过滤，再补足水量，然后加入琼脂和吐温80，121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。（三） 用途用于观察白念珠菌厚壁孢子及假菌丝；红色毛癣菌在此培养基产色素较好。米饭培养基 rice grain medium(一) 组成大米 300.0g蒸馏水 1000ml（二）制法将 3g 大米放入试管

4、中，加入 10ml 蒸馏水，高压 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。（三）用途用于区分奥杜盎小孢子菌和犬小孢子菌，前者在米饭培养基上生长差，犬小孢子菌生长良好，产生黄色素和典型大分生孢子。麦芽浸汁琼脂，MA（一） 组成麦芽浸膏 25.0g琼脂 15.0g蒸馏水 1000ml(二) 制法上述混合后，121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。（三）用途用于观察酵母产生子囊孢子。脑心浸膏琼脂。BHI（一） 组成脑心浸膏 35.0g琼脂 15.0g蒸馏水 1000ml（二） 制法上述混合后，121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。（三） 用途双相真菌可在该培养基上呈酵母相。皮肤癣菌鉴定培养基，DTM（一

5、） 组成葡萄糖 10.0g蛋白胨 10.0g琼脂 15.0g酚红 0.2g0.8N 盐酸 6.0g放线菌酮 0.5g庆大霉素 0.1g氯霉素 0.125g蒸馏水 1000ml（二） 制法将葡萄糖、蛋白胨和琼脂混于 1000ml 水中，加入 40ml 酚红并震荡（酚红 0.5g 溶于 15ml 0.1NaOH 中加水至 100ml） ，然后加入 6ml0.8N HCL 并震荡；放线菌酮 0.5g 溶于 2ml 丙酮中，倒入培养基中；庆大霉素及氯霉素溶于 2ml 水中，然后加入培养基。 121 摄氏度 15 分钟灭菌后备用。（三） 用途分离和鉴定皮肤癣菌。尿素培养基，Christensen ure

6、a agar(一) 组成A 溶液：葡萄糖 1.0g蛋白胨 1.0gNaCl 5.0gKH2PO4 2.0g尿素 20.0g酚红 0.012g蒸馏水 100mlB 溶液：琼脂 15.0g蒸馏水 900ml(二) 制法将 A 溶液混匀，过滤灭菌；加热溶解 B 液，然后 121 摄氏度 15 分钟灭菌后。将 B 液冷却至 50 摄氏度后与 A 液混合后分装。(三) 用途用于鉴定须癣毛癣菌和隐球菌，可使橘红色培养基变成紫红色。察氏培养基，CZA（一） 组成硝酸钠（NaNO 3） 3.0g磷酸二氢钾（KH 2PO4） 1.0g硫酸镁（MgSO 4.7H2O） 0.5g氯化钾（KCl） 0.5g硫酸亚铁（

7、FeSO 4.7H2O） 0.01g葡萄糖 30.0g琼脂 15.0g蒸馏水 1000ml（二） 制法将以上成分依次混入 1000ml 水中，加热直到完全溶解，高压 121 摄氏度，15 分钟灭菌后备用。（三） 用途分离和鉴定青霉、曲霉。咖啡酸琼脂，CAA（一） 组成硫酸铵（NH 4） 2SO4 5.0g磷酸二氢钾（KH 2PO4） 0.8g硫酸镁（MgSO 4.3H2O） 0.7g咖啡酸 0.18g枸橼酸铁 0.002g酵母浸膏 2.0g葡萄糖 5.0g琼脂 15.0g蒸馏水 1000ml（二） 制法将以上成分依次混入 1000ml 水中，枸橼酸铁先配成原液，然后加入。高压 121 摄氏度，

8、15 分钟灭菌后备用。（三） 用途鉴定新生隐球菌和其他隐球菌。前者成为黑色或深棕色。高盐培养基，Takashio medium(一) 组成磷酸二氢钾（KH 2PO4） 1.0g硫酸镁（MgSO 4.7H2O） 1.0g葡萄糖 2.0g蛋白胨 1.0g琼脂 15.0g蒸馏水 1000ml(二) 制法将以上成分依次混入 1000ml 水中，高压 121 摄氏度，15 分钟灭菌后备用。(三) 用途用于观察皮肤癣菌的有性时期。子囊孢子培养基，ascospore agar(一) 组成醋酸钾 10.0g酵母浸膏 2.5g葡萄糖 1.0g琼脂 15.0g蒸馏水 1000ml(二) 制法将以上成分依次混入 1

9、000ml 水中，高压 121 摄氏度，15 分钟灭菌后备用。(三) 用途鉴定产子囊孢子的真菌。酵母浸膏磷酸盐培养基，yeast extract phosphate agar（一） 组成A 液 ：酵母浸膏 1.0g琼脂 15.0g蒸馏水 1000mlB 液 ：磷酸二氢钾（KH 2PO4） 6.0g磷酸二氢钠（NaH 2PO4） 4.0g蒸馏水 30mlC 液 ：氢氧化铵（NH 4OH） 1.0g（二） 制法先将 A 液混匀，将 B 液 PH 调节至 6,然后取 2ml 加入 A 液，高压 121 摄氏度，15 分钟灭菌后备用，每次用时加入少许氢氧化铵。（三） 用途鉴定和培养组织胞浆菌，和皮炎芽

10、生菌。石蕊牛乳培养基，litmus milk agar（一） 组成脱脂奶粉 100.0g石蕊 750.0g酵母浸膏 5.0g葡萄糖 3.0g蒸馏水 1000ml（二） 制法混合上述物质，高压 121 摄氏度，15 分钟灭菌后备用。（三） 用途用于鉴定放线菌。Bennett 琼脂（一） 组成酵母浸膏 1.0g牛肉浸膏 1.0g酪蛋白氨基酸 2.0g葡萄糖 10.0g琼脂 15.0g蒸馏水 1000ml（二） 用途用于需氧放线菌产生孢子。诺卡菌鉴定培养基，identification agar for Nocardia（一） 组成1、液化明胶 脑心浸汁 25.0g明胶 120.0g蒸馏水 1000

11、ml（PH 7.47.6）2、水解淀粉 淀粉 2.0g葡萄糖 6.0g蛋白胨 10.0g琼脂 15.0g蒸馏水 1000ml3、水解酪蛋白A 液 ：脱脂奶粉 10.0g蒸馏水 90mlB 液 ：琼脂 3.0g蒸馏水 17ml分别高压，然后混匀。4、酪氨酸（黄嘌呤）琼脂 营养琼脂 23.0g酪氨酸（黄嘌呤） 5.0（4.0）g水 1000ml5、营养琼脂 牛肉浸膏 3.0g蛋白胨 5.0g琼脂 15.0g蒸馏水 1000ml（二） 制法高压 121 摄氏度，15 分钟灭菌后备用（三） 用途用于鉴定诺卡菌和链丝菌。合成毛霉琼脂，synthetic agar for Mucor（一） 组成磷酸二氢钾

12、（KH 2PO4） 0.5g硫酸镁（MgSO 4.7H2O） 0.25g葡萄糖 40.0g天门冬酰胺 2.0g硫胺 0.5g琼脂 15.0g蒸馏水 1000ml（二） 制法将以上成分依次混入 1000ml 水中，高压 121 摄氏度，15 分钟灭菌后备用。（三） 用途鉴定接合菌。无碳源培养基，yeast nitrogen base（一） 组成硫酸铵（NH 4） 2SO4 5.0g磷酸二氢钾（KH 2PO4） 1.0g硫酸镁（MgSO 4.7H2O） 0.5g酵母浸膏 0.2g琼脂 15.0g蒸馏水 1000ml（二） 制法将以上成分依次混入 1000ml 水中，高压 121 摄氏度，15 分钟

13、灭菌后备用。（三） 用途糖同化试验基础培养基。先转种菌种在培养基上，3 天后重复转种一次。将菌悬液与上述培养基混合后制成平皿。将含 20的糖滤片置于平皿中，观察同化现象。先用蔡氏滤液过滤糖溶液。Leeming 和 Notman 培养基 （一） 组成蛋白胨 10.0g葡萄糖 5.0g酵母浸膏 1.0g牛胆盐 4.0g甘油 1.0g单硬脂酸甘油酯 0.5g吐温 60 0.5ml全脂牛奶 10.0g橄榄油 20.0ml琼脂 12.0g放线菌酮 0.5g氯霉素 0.05g蒸馏水 1000ml（二） 用途用于培养马拉色菌。七叶苷琼脂，esculin agar（一） 组成Leeming 和 Notman 培养基加入 0.2枸橼酸铁和 0.1七叶苷。（二） 用途用于鉴定马拉色菌。橄榄油培养基，olive oil medium for Malassizia sp.（一） 组成蛋白胨 10.0g葡萄糖 40.0g酵母浸膏 0.1g单硬脂酸甘油酯 2.5g吐温 80 2.0ml橄榄油 40.0ml琼脂 18.0g放线菌酮 0.5g氯霉素 0.05g蒸馏水 1000ml（二） 用途用于培养马拉色菌。其中如果没有橄榄油，也可以用菜籽油代替。