1、15 种杀菌剂对山茶枯斑病菌的室内毒力测定摘要:为了研究不同药剂对山茶枯斑病菌的毒力作用,对山茶枯斑病的防治提供帮助。采用生长速率法进行了试验,测定了 20%井.唑.多菌灵、75%百菌清、72%农用硫酸链霉素、68%精甲霜.锰锌和 35%快克 5 种药剂在不同浓度下对山茶枯斑病病菌的影响。结果表明:75%的百菌清对病原菌的抑菌的抑制效果最好,EC50 为 145.6829 g/mL;其次是 20%井唑多菌灵,EC50 为 257.9576 g/mL;35%快克的抑菌效果最差,EC50 为13563.7054 g/mL。 关键词:山茶;枯斑病病菌;杀菌剂;毒力 中图分类号:S685 文献标识码:
2、A 文章编号:16749944(2017)03011102 1 引言 山茶(Camellia japonica L.)是山茶花科的常绿灌木,又名曼阳罗树、红茶花等,小乔木或灌木,叶卵形或椭圆形,边有细锯齿,革质,表面亮绿色。花瓣多,呈圆形,花的颜色多样,花期因品种不同而异。山茶花具有观赏价值和药用价值1。 山茶枯斑病菌,由交链格孢菌(Alternaria alternata)侵染山茶叶片而引起。病斑症状多发生于叶面,由暗绿色斑纹扩大成不规则大斑,颜色由褐色变为黑色,病斑扩散到整个叶片,从而引起大落叶。因此本试验通过室内毒力测定方法测定了 5 种杀菌剂对山茶枯斑病病菌的毒力,2旨在为山茶枯斑病病
3、菌的防治提供理论依据。 2 材料与方法 2.1 菌种来源 山茶枯斑病样本分别采自贵州遵义桐梓县松坎镇、正安县土坪镇及遵义市区凤凰山、三阁公园,采集有山茶枯斑病典型症状的山茶叶部样本经分离、纯化和致病性鉴定2,最终确定是由交链格孢菌(Alternaria alternata)引起的,将其置于 4的环境下保存备用。 2.2 供试药剂 毒力测定所采用的 5 种实验药剂名称、剂型、生产厂家见表 1。 2.3 试验方法 以大田施用浓度为参考值,按有效成分从高浓度到低浓度逐步测试,每种药剂选定 5 个浓度进行测定,每个处理重复 3 次,通过预实验得出杀菌剂的浓度梯度如表 2。然后将供试菌株接种于 PSA
4、培养基上,25 培养 5 d,待菌丝长满培养皿后,用无菌的打孔器打取直径 为 5 mm 的菌饼备用3。 采用生长速率测定法,测定致病菌的菌丝在上述 5 种药剂中的敏感性,从而筛选高效的药剂。将上述药剂分别配制成所需浓度 10 倍的药剂,取 1 mL 加入 9 mL 约 50 的 PSA 中混匀,倒入培养皿中制成含药平板,中央接入直径为 5 mm 的菌饼,27 下培养 3 d 后测量菌落直径,计算抑菌率4,5: 抑菌率(%)=(对照菌落直径-5)-(处理菌落直径-5) (对照菌落直径-5)100 3将抑菌率换算成抑制几率值,以设定的药剂浓度的对数值为横坐标,抑制几率值为纵坐标,作回归曲线,求得杀
5、菌剂对该菌的抑制回归方程Y=A+BX 和抑制浓度(EC50)及相关系数(r) 。EC50 值与药剂毒力大小成反比,EC50 值越小,说明毒力越强68。试验结果如表 3。 4 试验结果 试验结果表明(图 1,表 2) ,5 种药剂对山茶枯斑病菌菌丝生长均有一定的抑制作用,5 种药剂的 EC50 值结果显示,35%快克菌灵最大,13563.7054ug/ml,75%百菌清最小,为 145.6829ug/ml。综合杀菌剂的EC50 值,对山茶枯斑病病菌菌丝生长的抑制作用 75%百菌清最强,其次是 20%井.唑.多菌灵,35%快克最弱。 5 讨论与结论 本试验以 5 种药剂对山茶枯斑病病原菌进行了毒力
6、测定,这 5 种药剂对该病原菌都有一定的抑制作用,但抑制效果不同。通过本试验,可以初步确定 75%百菌清和 20%井唑多菌灵者两种杀菌剂为防治山茶枯斑病的高效药剂。在综合考虑病害防治成本的前提下,应该合理确定田间使用浓度,本研究是在室内离体条件下进行的,但在试验过程中得到的试验数据是否可以运用于实际生产中,还待进行田间试验明确供试药剂对山茶枯斑病的防效,为生产上山茶枯斑病防治药剂的选择提供理论依据。表 2 不同杀菌剂对山茶枯斑病菌的室内测定 药剂毒力回归方程 Y=A+BX EC50/(g/mL)相关系数/r20%井唑多菌灵 y=0.4840+1.8726x257.9576r=0.914975%
7、百菌清 参考文献: 41张艳芳,屈爱桃.山茶花的研究进展J.中国名族医药杂志,2012,10(10):4144. 2方中达.植病研究方法(第三版)M.北京:中国农业出版社,1994. 3纪兆林,刘娟,童蕴慧,等.不同杀菌剂对桃流胶病的毒力测定J.中国南方果树,2012,41(4):3941,46. 4陆铮铮,肖仲久,蒋选利.几种杀菌剂对辣椒胶孢炭疽菌的室内毒力测定J.植物医生,2010,23(4):810. 5李小霞,肖仲久,李凤华.5 种杀菌剂对苏铁叶枯病病菌的室内毒力测定J.江苏农业科学,2012,40(4):143144. 6李石磊,?昂,赵莹,等.6 种杀菌剂对油菜主要病害的室内毒力测定J.中南林业科技大学学报,2013,33(9):6062. 7胡秀荣,鹿连明,蒲占?,等.7 种杀菌剂对柑橘炭疽病菌的室内毒力测定J.中国农学通报,2010,26(11):272275. 8鲁鹏,肖仲久,李小霞,等.白术白绢病菌的生物学特性及杀菌剂对其室内毒力测J.贵州农业科学,2010,38(8):9093.