509-2516芩連四物湯配方顆粒品質標準.doc

1、fc6033af489b89edc9b941824b51cba8.pdf 第 1 頁，共 16 頁芩連四物湯配方顆粒品質標準【處方】 熟地黃 10.0g 當歸 10.0g 赤芍 10.0g 川芎 10.0g 黃芩 5.0g薑黃連 5.0g 【制法】 稱取熟地黃、當歸、赤芍、川芎、薑黃連、黃芩等六味淨藥材，投入多功能提取釜中，加入 80飲用水 8 倍量，97加熱提取 2.5 小時，濾過，真空濃縮，加入適量輔料，混勻，乾燥，製成 10g 顆粒，分裝，即得。【性狀】 本品為?【鑒別】 取本品適量，研細，取約 3g，加乙醇 20ml，超聲處理 30 分鐘，濾過，蒸幹，殘渣加乙醇 1ml 溶解，作為供試

2、品溶液。取芍藥苷對照品，加乙醇製成每 1ml含 2mg 的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（中國藥典2005 年版一部附錄 B）試驗，吸取供試品溶液、對照品溶液各 35l，分別點於同一矽膠 G 薄層板上，以氯仿乙酸乙酯甲醇甲酸（40：5：10：0.2）溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以 5%香草醛硫酸溶液，在 105加熱至斑點顯色清晰，置日光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點。【檢查】 按中國藥典2005 年版一部附錄 I C “顆粒”項下有關的各項規定。水份含量 按照中國藥典2005 年版一部（附錄 IX H 水分測定法，第一法）測定，水分均不超過 6.0

3、%。最低裝量差異 多劑量包裝的顆粒劑，照中國藥典2005 年版一部（附錄 X C最低裝量檢查法，重量法）檢查，每瓶裝量均不少於標示裝量的 97%，平均裝量不少於標示裝量。粒度 按照中國藥典2005 年版一部附錄 IC 顆粒劑（附錄 XI B 粒度測定法，第二法，雙篩分法）檢查，不超過 15%。溶化性 按照中國藥典2005 年版一部附錄 IC 顆粒劑“溶化性”檢查項下方法進行檢查，可溶性顆粒劑應全部溶化，允許有輕微渾濁，混懸性顆粒劑應能混懸均勻，並均不得有焦屑等異物。【微生物限度】 照中國藥典2005 年版一部（附錄 X C）微生物限度檢查法檢查，應符合規定。細菌數 細菌菌落數不得過 500 個

4、/g；fc6033af489b89edc9b941824b51cba8.pdf 第 2 頁，共 16 頁黴菌和酵母菌數 黴菌和酵母菌菌落數不得過 100 個/g；大腸埃希菌 大腸埃希菌每 1g 不得檢出。活蟎 不得檢出【重金屬限量】 按照中國藥典2005 年版一部附錄 IX D 電感耦合等離子體質譜法測定，應符合規定：序號 檢測項目 限量1 砷(As),mg/kg 不得超過 41.67mg/kg2 鉛(Pb),mg/kg 不得超過 4.97mg/kg3 汞(Hg),mg/kg 不得超過 1.00mg/kg4 鎘(Cd),mg/kg 不得超過 97.22mg/kg5* 銅(Cu),mg/kg 不

5、得超過 150.00mg/kg【農藥殘留 】 根據內部化驗方法，將樣品經溶劑萃取後再以氣相色譜及電子捕獲檢測器作檢定。名稱 測試範圍 最高殘留量(mg/kg)艾氏劑及狄氏劑(Aldrin & Dieldrin)兩者之和 0.05氯丹(Chlordane) Cis, trans- 異構體與 oxychlordane 之和 0.05滴滴涕 DDT P, p-DDT, o,p-DDT, p,p-DDE8 與p,p-TDE 之和 1.0異狄氏劑 Endrin Endrin 0.05七氯 Heptachlor Heptachlor 與 heptachlor epoxide 之和 0.05六氯苯 Hexa

6、chlorobenzene Hexachlorobenzene 0.1六六六Hexachlorocyclohexane-BHC，-BHC，-BHC 之和 0.3林丹 Lindane Lindane 0.6五氯硝基苯 Quintozene Quintozene, pentachloroaniline 與 methyl pentachlorophenyl sulphide 之和 1.0【含量測定】 照高效液相色譜法（中國藥典2005 年版一部附錄 VI D）測定。色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；乙腈0.1%磷酸（25:75）為流動相；檢測波長為 280nm；流速 1ml/

7、min。理論塔板數按黃芩苷計算fc6033af489b89edc9b941824b51cba8.pdf 第 3 頁，共 16 頁應不低於 4000。對照品溶液的製備 精密稱取黃芩苷對照品適量，加稀乙醇製成每 1ml 含黃芩苷對照品 60g 的溶液，即得。供試品溶液的製備 取本品適量，研細，取約 0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇 25ml，稱重，超聲處理（功率 250W，頻率 50kHz）30 分鐘，取出，放冷，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，過濾，取續濾液作為供試品溶液。測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各 5l，注入超高效液相色譜儀，測定，即得。本品每 1g 含黃芩，

8、以黃芩苷（C 21H18O11）計，不得少於 4.30mg。fc6033af489b89edc9b941824b51cba8.pdf 第 4 頁，共 16 頁化驗方法及起草說明【處方】 熟地黃 10.0g 當歸 10.0g 赤芍 10.0g 川芎 10.0g 黃芩 5.0g薑黃連 5.0g 【炮製】熟地黃：取淨地黃，置適宜容器內，通水蒸汽，蒸至黑潤，取出，乾燥至八成幹，切厚片或塊，乾燥。 （乾燥溫度 805）當 歸：除去雜質，切成片或段。赤 芍：除去雜質，切厚片。川 芎：除去雜質，切片。薑黃連：除去雜質，切段或片。取生薑洗淨，搗爛，加水適量，壓榨取汁，薑渣再加水適量重複壓榨一次，合併汁液，即為

9、“薑汁” 。如用幹薑，搗碎後加水煎煮二次，合併煎液，濾過，取濾液。取淨藥材，加薑汁拌勻，置鍋內，用文火炒幹，取出，晾乾。每 100kg 淨藥材用生薑 10kg 或幹薑 3kg。黃 芩：除去雜質，切片或段。【制法】提取：稱取熟地黃、當歸、赤芍、川芎、薑黃連、黃芩等六味淨藥材，投入多功能提取釜中，加入 80飲用水 8 倍量，97加熱提取 2.5 小時，濾過，備用。濃縮：濾液真空濃縮,真空度為-0.060-0.085MPa,溫度 6010,濃縮至相對密度為 1.101.20 時（605測）,收取濃縮液，稱量，測水分。乾燥、制粒、包裝：濃縮液噴霧乾燥，得幹膏，粉碎，加入熟糊精混勻，得細粉，幹法制粒（必

10、要時可加入適量硬脂酸鎂） ，用 12 目、40 目篩整粒，得中間產品，送檢，檢驗合格後包裝即得成品，全檢。fc6033af489b89edc9b941824b51cba8.pdf 第 5 頁，共 16 頁工藝流程圖如下：【性狀】 以感官法作視覺外觀檢測產品的顏色、氣味等情況，綜合描述如下：本品為？結果見表 1。表 1 三批芩連四物湯配方顆粒性狀描述批號 性狀A071056A071820A081224【鑒別】儀器與試藥：芍藥苷對照品，購於中國藥品生物製品檢定所；芩連四物湯配方顆粒由農本方有限公司提供；矽膠 G（層析用） ，青島海洋化工廠；CAMAG 薄層點板儀， 瑞士 CAMAG 儀器；所用試劑

11、均為分析純。取本品適量，研細，取約 3g，加乙醇 20ml，超聲處理 30 分鐘，濾過，濾液蒸幹，殘渣加乙醇 1ml 溶解，作為供試品溶液。取芍藥苷對照品，加乙醇製成每 1ml含 2mg 的溶液，作為對照品溶液。陰性對照溶液是按處方比例稱取除赤芍藥材外其餘藥味，按制法制成赤芍藥材陰性製劑，以相同製備方法處理，作為陰性對照溶液。吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液各 35 l，分別點於同一矽膠 G 薄層板上，以氯仿乙酸乙酯甲醇甲酸（40：5：10 ：0.2）溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以 5%香草醛硫酸溶液，在 105加熱顯色清晰，置日光燈下檢視。三批樣品試驗結果表明，供試品色譜中，在

12、芍藥苷對照品色譜相應的位置上，顯相同的斑點，薄層色譜分離效果好，斑點清晰，比移值適中，重現性和專屬性好，陰性無幹擾，結果見圖 1。藥渣棄去熟地黃等七味淨藥材濾液 濃縮液加水提取一次真空濃縮噴霧乾燥幹膏幹法制粒、整粒 中間產品 送檢 包裝 成品（全檢）濾過藥渣棄去粉碎加熟糊精混勻 細粉fc6033af489b89edc9b941824b51cba8.pdf 第 6 頁，共 16 頁圖 1 芩連四物湯配方顆粒薄層色譜圖1-3 芩連四物湯配方顆粒 4 陰性樣品 5 芍藥苷對照品【檢查】按中國藥典2005 年版一部附錄 I L“顆粒”項下有關的各項規定，對粒度、水分、裝量差異、溶化性、微生物限度等專案

13、進行檢查，結果均符合藥典規定。檢查方法和所測資料如下：水份含量按照中國藥典2005 年版一部（附錄 IX H 水分測定法，第一法）測定：取本品2 5g，平鋪於乾燥至恒重的扁形稱量瓶中，精密稱定，打開瓶蓋在 100105乾燥5 小時，將瓶蓋蓋好，移置乾燥器中，冷卻 30 分鐘，精密稱定，再在上述溫度乾燥1 小時，冷卻，稱重，至連續兩次稱重的差異不超過 5mg 為止。根據減失的重量計算供試品的含水量（%） ，檢查結果見表 2。表 2 三批芩連四物湯配方顆粒的水分檢查結果批號 A071056 A071820 A081224水分（%） 3.5% 2.3% 1.6%最低裝量差異多劑量包裝的顆粒劑，照中國

14、藥典2005 年版一部（附錄 X C 最低裝量檢查法，重量法）檢查。取供試品 3 瓶，除去外蓋及標籤清潔瓶子外壁並乾燥，分別稱定重量。除去內容物，洗淨瓶子並乾燥，再分別稱定空瓶子的重量，求出每瓶內容物的裝量與平均裝量，每瓶裝量均不少於標示裝量的 97%，平均裝量不少於標示裝量。fc6033af489b89edc9b941824b51cba8.pdf 第 7 頁，共 16 頁檢查結果見表 3。表 3 三批芩連四物湯配方顆粒裝量檢查結果批號 A071056 A071820 A081224裝量 1 201.4g 201.7g 198.8g裝量 2 200.7g 199.8g 201.5g裝量 3 2

15、01.8g 200.5g 201.2g平均裝量 201.3g 200.7g 200.5g結果 符合標準 符合標準 符合標準粒度按照中國藥典2005 年版一部附錄 IC 顆粒劑（附錄 XI B 粒度測定法，第二法，雙篩分法）檢查：取本品 30g，稱定重量，置藥篩內過篩，保持水平狀態過篩，左右往返，邊篩邊輕叩 3 分鐘，取不能通過一號篩和能通過五號篩顆粒及粉末，稱定重量，計算所占百分比。檢查結果見表 4。表 4 三批芩連四物湯配方顆粒的粒度檢查結果批號 A071056 A071820 A081224粒度 3.5% 4% 6%溶化性按照中國藥典2005 年版一部附錄 IC 顆粒劑“溶化性”檢查項下方

16、法進行檢查，可溶性颗粒剂应全部溶化，允许有轻微浑浊，混悬性颗粒剂应能混悬均匀，并均不得有焦屑等异物。本品三批樣品全部溶化，無焦屑等異物存在。【微生物限度】 照中國藥典2005 年版一部（附錄 X C）微生物限度檢查法檢查，應符合規定。結果見表 5。細菌數 細菌菌落數不得過 500 個/g黴菌和酵母菌數 黴菌和酵母菌菌落數不得過 100 個/g大腸埃希菌 大腸埃希菌每 1g 不得檢出fc6033af489b89edc9b941824b51cba8.pdf 第 8 頁，共 16 頁活蟎 活蟎不得檢出表 5 三批芩連四物湯配方顆粒微生物檢查結果批號 A071056 A071820 A081224細菌

17、 10 個/g 10 個/g 10 個/g黴菌和酵母菌 10 個/g 10 個/g 10 個/g大腸埃希菌 每 1g 未檢出 每 1g 未檢出 每 1g 未檢出活蟎 未檢出 未檢出 未檢出結果 符合標準 符合標準 符合標準【重金屬】按照中國藥典2005 年版一部附錄 IX D 電感耦合等離子體質譜法測定本品三批樣品，結果見表 6。表 6 三批芩連四物湯配方顆粒重金屬檢查結果檢測項目 限量 A071056 A071820 A081224砷(As) 不得超過 41.67mg/kg 0.00mg/kg 0.208mg/kg 0.63mg/kg鉛(Pb) 不得超過 4.97mg/kg 0.24mg/k

18、g 0.143mg/kg 0.39mg/kg汞(Hg) 不得超過 1.00mg/kg 0.003mg/kg 0.001mg/kg 0.005mg/kg鎘(Cd) 不得超過 97.22mg/kg 0.08mg/kg 0.024mg/kg 0.12mg/kg銅(Cu) 不得超過 150.00mg/kg 0.96mg/kg 0.736mg/kg 1.13mg/kg檢測結果 符合標準 符合標準 符合標準【農藥殘留】 根據內部化驗方法，將樣品經溶劑萃取後再以氣相色譜及電子捕獲檢測器作檢定。 （+內部標準操作方法） 【含量】 照高效液相色譜法（中國藥典2005 年版一部附錄 VI D）測定。1. 儀器與試

19、藥ACQUITY UPLC 高效液相色譜儀（美國Waters），PDA檢測器，GR-202電子分析天平(日本)；數控超聲波清洗器（KQ-500DE型 昆山市超聲儀器有限公司） 。乙腈（色譜純） 、水（雙蒸水）,其他為分析純。黃芩苷對照品（含量測定用，批號：110715-200514，中國藥品生物製品檢定所fc6033af489b89edc9b941824b51cba8.pdf 第 9 頁，共 16 頁提供） ，芩連四物湯配方顆粒（批號：A081224-01，由農本方有限公司提供），缺黃芩藥材的芩連四物湯配方顆粒陰性樣品（由農本方有限公司提供）。2. 色譜條件與系統適用性試驗2.1 色譜條件色譜

20、柱為AQ-C 18 4.6250mm 5m；以乙腈0.1% 磷酸（25:75）為流動相；檢測波長為280nm；流速1.0ml/min。理論塔板數按黃芩苷 計算應不低於4000。2.2 系統適用性試驗2.2.1 對照品溶液的製備精密稱取黃芩苷對照品12.1mg，置20ml的量瓶中，加甲醇使溶解，並稀釋至刻度，搖勻，即得(濃度為0.605mg/ml)；精密量取上述對照品溶液 1ml，置10ml量瓶，加稀乙醇至刻度，搖勻，即得（濃度為60.5g/ml)。2.2.2 供試品溶液的製備取本品適量，研細，取約 0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇25ml，稱重，超聲處理（功率250W，頻率5

21、0kHz）30分鐘，取出，放冷，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，過濾，取續濾液作為供試品溶液。2.2.3 陰性樣品溶液的製備取缺黃芩藥材的陰性樣品適量，研細，取約 0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加稀乙醇25ml，稱重，超聲處理（功率250W，頻率 50kHz）30分鐘，取出，放冷，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，過濾，取續濾液作為陰性樣品溶液。2.2.4 測定法分別吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液各5l進樣。在上述系統適應性的色譜條件下，供試品中黃芩苷色譜峰與對照品色譜峰保留時間一致，並與其他共存成分分離度大於1.5，主峰與雜質峰達到基線分離，且陰性樣品在相應的位置沒有色譜峰幹擾

22、。色譜圖見圖2、3、4。fc6033af489b89edc9b941824b51cba8.pdf 第 10 頁，共 16 頁色譜條件：儀器名稱 ACQUITY UPLC 超高效液相色譜儀（美國 Waters）工作站型號 Empower 2檢測器 PDA 檢測器流動相 乙腈0.1%磷酸（25:75）檢測波長 280nm色譜柱 十八烷基矽烷鍵合矽膠色譜柱（AQ-C 18 4.6250mm 5m）色譜柱溫度 室溫流速 1.0ml/min 分 -14.97AU0.0.20.40.60.80.1 分.2.04.06.08.010.12.014.016.018.020.2.024.026.028.030.圖 2 黃芩苷對照品色譜圖色譜條件：儀器名稱 ACQUITY UPLC 超高效液相色譜儀（美國 Waters）工作站型號 Empower 2檢測器 PDA 檢測器流動相 乙腈0.1%磷酸（25:75）檢測波長 280nm色譜柱 十八烷基矽烷鍵合矽膠色譜柱（AQ-C 18 4.6250mm 5m）流速 1.0ml/min