1、结直肠癌诊疗规范-病理评估,标本固定标准1固定液：推荐使用1013% 中性福尔马林固定液，避免使用含有重金属的固定液。2固定液量：必须 所固定标本体积的10倍。,3固定温度：正常室温。4固定时间：内镜下切除腺瘤或活检标本：6小时，48小时。手术标本：12小时，48小时。,1活检标本核对临床送检标本数量，送检活检标本必须全部取材。每个蜡块内包括不超过5粒活检标本。将标本包于纱布或柔软的透水纸中以免丢失。,2. 内镜下切除的腺瘤标本送检标本由手术医师展平固定，标记方位。记录肿瘤的大小，各方位距切缘的距离。垂直于肠壁，每间隔0.3cm平行切开标本，分成适宜大小的组织块，推荐按同一包埋方向全部取材。记
2、录组织块对应的方位。,手术标本(1)肠壁及肿瘤沿肠壁长轴、垂直于肠壁切取肿瘤标本，肿瘤组织充分取材，视肿瘤大小、浸润深度、不同质地、颜色等区域分别取材（常规4块），肿瘤浸润最深处至少1块全层厚度肿瘤及肠壁组织，以判断肿瘤侵犯的最深层次。切取能够显示肿瘤与邻近粘膜关系的组织（常规2块）。切取远侧、近侧手术切缘。环周切缘按手术医师标记的部分切取。,记录肿瘤距远侧及近侧切缘的距离。肠标本如包含回盲部或肛管、肛门，应于回盲瓣、齿状线、肛缘取材（常规各1块）及阑尾（常规3块：环形2块+盲端1块）；如肿瘤累及上述部位，应切取充分显示病变程度的组织块。行中低位直肠癌根治术时需要完整切除直肠系膜，因此病理医师
3、需要对手术标本进行系统检查，包括系膜的完整性、环周切缘是否有肿瘤侵犯，这是评价全直肠系膜切除手术效果的重要指标。,(2)淋巴结建议外科医师根据局部解剖体征和术中所见，分组送检淋巴结，有利于淋巴结引流区域的定位；在未接到手术医师分组送检医嘱或标记的情况下，病理医师按以下原则检出标本中的淋巴结：,全部淋巴结均需取材（建议检出至少12枚淋巴结。接受过术前治疗患者的淋巴结可以低于12枚）。所有肉眼阴性的淋巴结应完整送检，肉眼阳性的淋巴结可部分切取送检。 (3)推荐取材组织块体积：不大于21.50.3cm,取材后标本处理原则和保留时限,1剩余标本的保存：取材剩余组织保存在标准固定液中，并始终保持充分的固
4、定液量和甲醛浓度，避免标本干枯或因固定液量不足或浓度降低而致组织腐变；以备根据镜下观察诊断需求而随时补充取材；以备在病理诊断报告签发后接到临床反馈信息时复查大体标本或补充取材。,2剩余标本处理的时限：建议在病理诊断报告签发1个月后，未接到临床反馈信息，未发生因外院会诊意见分歧而要求复审等情形后，可由医院自行处理。,病理类型1早期结直肠癌癌细胞限于结直肠黏膜下层者称早期结直肠癌（pT1）。WHO消化道肿瘤分类将黏膜层内有浸润的病变亦称之为“高级别上皮内瘤变”。,进展期结直肠癌的大体类型隆起型 凡肿瘤的主体向肠腔内突出者，均属本型。溃疡型 肿瘤形成深达或贯穿肌层之溃疡者均属此型。浸润型 肿瘤向肠壁
5、各层弥漫浸润，使局部肠壁增厚，但表面常无明显溃疡或隆起。,组织学类型腺癌：乳头状腺癌；管状腺癌；粘液腺癌；印戒细胞癌；未分化癌；腺鳞癌；鳞状细胞癌；小细胞癌；类癌。,分级与组织学类型的关系,低级别50% 腺管形成高级别 0.2mm,2mm。淋巴结或远处的微小转移分别归入 N1(mic) 或M1(mic) 。,孤立肿瘤细胞（ Isolated tumor cells ，ITCs）： 指单个肿瘤细胞或小团肿瘤细胞直径 0.2 mm, 通常是被特殊检查方法发现的，如免疫组化染色, 归入 N0.其生物学行为尚不清楚。 微小转移或有孤立肿瘤细胞的淋巴结数目应详细记录。,接受新辅助放化疗的肿瘤标本，应仔细
6、检查病变残留情况.,肿瘤消减只针对原发病灶; 淋巴结转移不包括在评估范围内. 接受新辅助治疗的患者标本中的无细胞粘液池考虑为肿瘤细胞被完全消除，不作为pT 分期或淋巴结阳性记数。,K-ras基因突变检测,1必须在有质量控制及保证（QC / QA）的实验室进行检测，实验室应建立完善的标准操作程序。2所有检测必须严格按该方法的标准操作要求进行。3方法建立前需进行有效性验证，每种方法选择2-3个或更多有质量保证的参比实验室进行对比验证，一致性应90%。,4每年应定期进行1-2次内部及外部质评。5进行检测的技术人员及医师必须经过必要的培训及考核。6检测相关的仪器设备必须定期维护和校验。,所有标本进行基
7、因突变检测前均先行常规病理检查和诊断（HE染色），必须经有经验的病理医师确认，用显微切割法（microdissection）(自动化机器或手工),选取以肿瘤细胞为主的、没有明显的坏死、粘液和炎症的组织进行检测。肿瘤细胞数量要求尚无统一标准，至少应有100个肿瘤细胞。,肿瘤组织的确认和筛选,显微切割肿瘤提取DNA,相应的PCR反应或杂交,相关的分析和检测,1报告时间：5-7个工作日。2突变检测报告内容：（1）患者基本信息（2）标本来源及类型（3）标本质量及大小（4）获取的肿瘤细胞数量（5）DNA提取方法及突变检测方法（6）野生型或突变型K-ras, 突变型需注明突变位点,直接测序法，上图为野生型K-ras基因，下图为突变型K-ras基因,ARMS法，左图为野生型K-ras基因，右图为突变型K-ras基因,
