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营养与食品卫生学学系2014.PPT

1、营养与食品卫生学首都医科大学 营养与食品卫生学学系2014.4实验一 食品中维生素 C的测定营养与食品卫生学首都医科大学 一、实验目的食品中的总抗坏血酸包括还原型和脱氢型两种形式。当食物放置时间较长或经过烹调处理后,其中有相当一部分抗坏血酸转变为脱氢型,脱氢型的抗坏血酸仍有 85作用的维生素 C活性,因此对这类食物常常测定总抗坏血酸。营养与食品卫生学首都医科大学 二、测定方法2,4二硝基苯肼法 样品中还原型抗坏血酸经活性碳氧化为脱氢型抗坏血酸,在一定条件下,脱氢型抗坏血酸与 2,4二硝基苯肼作用生成红色脎,脎的生成量与总抗坏血酸含量成正比,将脎溶解在硫酸中进行比色测定。营养与食品卫生学首都医科

2、大学 (一) 绘制标准曲线 抗坏血酸标准液( 1mg/ml):溶解 100mg纯抗坏血酸于 100ml 1草酸溶液中。 标准曲线绘制:加 1g活性炭于 50ml标准溶液中,摇动1min,过滤。取 10ml滤液放入 500ml容量瓶中,加5.0g硫脲,用 1草酸溶液稀释至刻度,抗坏血酸浓度为 20g/ml 。取 10、 20、 40、 60、 80ml稀释液,分别放入 7个 100ml容量瓶中,用 1硫脲溶液稀释至刻度,使最后稀释液中抗坏血酸的浓度分别为 2、 4、 8、 12、 16、 20g/ml 。 营养与食品卫生学首都医科大学 按样品测定步骤形成脎并比色。 以吸光度为纵坐标,以抗坏血酸浓

3、度(g/ml )为横坐标绘制标准曲线。营养与食品卫生学首都医科大学 (二) 样品操作步骤 1.样品制备:称取 100g鲜样和 100g 2草酸溶液,倒入打碎机中打成匀浆,取 10 40g匀浆(含 1 2mg抗坏血酸)倒入 100ml容量瓶中,用 1草酸溶液稀释至刻度,混匀。营养与食品卫生学首都医科大学 2.氧化处理:取 25ml上述滤液,加入 0.5g活性炭,振摇 1min,离心 5min,取上清夜过滤。取10ml此氧化提取液,加入 10ml 2硫脲溶液,混匀。营养与食品卫生学首都医科大学 3.成色反应:( 1)于 3个试管中各加入 4ml稀释液。一个试管作为空白,在其余试管中加入 1.0ml

4、2 2, 4二硝基苯肼溶液,将所有试管放入( 370.5 ) 恒温箱或水浴中,保温 1小时。营养与食品卫生学首都医科大学 ( 2) 1小时后取出,除空白管外,将所有试管放入冰水中。空白管取出后使其冷却到室温,然后加入 1.0ml 2 2, 4二硝基苯肼溶液,在室温中放置 10 15min后放入冰水中。其余步骤同样品。 营养与食品卫生学首都医科大学 ( 3) 85硫酸处理:当试管放入冰水后,向每一试管中加入 5ml 85硫酸,滴加时间至少需要 1min,需边加边摇动试管。将试管自冰水中取出,在室温放置 30min后比色。( 4)比色:用 1cm比色杯,以空白液调零点,于 500nm波长测吸光值。,

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