1、河 北 农 业 大 学本 科 毕 业 论 文题 目:复方中药枳术汤对雏鸡生产性能及免疫器官的影响学 院: 动物医学院 专业班级: 动物医学 1002 班 学 号: 2010084020208 学生姓名: 曹莹莹 指导教师姓名: 赵兴华 指导教师职称: 副教授 2014 年 06 月 05 日1复方中药枳术汤对雏鸡生产性能及免疫器官的影响学生: 曹莹莹 指导老师:赵兴华(河北农业大学动物医学院,河北,保定,071000)摘要:实验旨在研究复方中药枳术汤对雏鸡生产性能和免疫器官的影响。选择 175 只一日龄海蓝灰雏鸡随机分为 5 组:采用标准日粮进行饲喂。经母源抗体检测后,、四组于 10 日龄首免
2、鸡新城疫 C30-86 冻干苗,每只鸡滴鼻点眼 2 羽份,在 10 日龄时按照日饲料量的 1%(组)、2%(组)饲喂复方中药枳术汤(ZZT) ,28 日龄二次免疫(剂量和方法同首次免疫) 。组为空白对照组,不免疫不给药,正常饲养。于 17、24、31、38、45 日龄时,早晨 8 点喂料之前进行称重,然后每组分别随机抽取 7 只鸡,心脏采血,静置两小时后,3000 转/分钟离心 10 分钟分离血清待用,采集免疫器官并计算免疫器官指数。通过测定试验雏鸡的日增重、料肉比、免疫器官指数、IL-2 血清 ND 抗体水平、 IFN- 的影响。结果显示,枳术汤对雏鸡生产性能和免疫器官指数具有整体性优势。关
3、键词:复方中药枳术汤;免疫器官指数;IL-2;雏鸡;生产性能;Effect of compound Chinese herbal medicine of Zhizhu Decoction on production performance and immune organs in chickensStudent: yingying cao Advisor: xinghua zhao(College of Animal Science and Technology, Agricultural University of Hebei ,Baoding 071001)Abstract:The exp
4、eriment was conducted to study the effects of compound Chinese medicine of Zhizhu Decoction on production performance and immune organs in chickens. 175 day old blue gray chickens were randomly divided into 5 groups:the standard diet fed. The detection of maternal antibodies, , , , , four groups at
5、10 days of age the first immunization of Newcastle disease virus C30-86 vaccine, intranasal instillation of 2 per chicken feather, at the age of 10 daysin accordance with the amount of feed of 1% (group I), 2% (Group II) fed withcompound Chinese medicine Zhizhu soup (ZZT), 28 days (two times of immu
6、nization dose and method with the first immune). V group was the blank control group, is not immune to the medicine, the normal feeding. In 17, 24, 31,38, 45 days, 8 points before morning feeding were weighed, and each groupwere randomly selected from 7 chickens, heart blood, standing for two hours,
7、centrifuged at 3000 rpm for 10 minutes to separate serum stand-by, collect and calculate the immune organ index of immune organs. Through the test of thedaily weight gain, feed and meat chickens than, immune organ index, serum NDantibody levels of IL-2, IFN- . The results showed that, with the overa
8、ll advantages of Zhizhu Decoction on production performance and immune organ index of chicksKey words: Compound Chinese medicine of Zhizhu Decoction; immune organ index; IL-2;chicken; production performance1.前言1.1 研究目的及意义Comment S1: 参考文献编号都写为上标。下同2随着社会发展与经济进步,畜产品的安全问题引起人们越来越广泛的关注,而要保证畜产品的卫生安全,必须从畜牧生
9、产的源头抓起,在生产环节严格控制直至杜绝抗生素、化学促生长物等作为饲料添加剂的使用,这已成为国内外畜牧业界的共识和研究的热点。中国传统的中草药在寻找抗生素与化学促生长物的研究中占据了重要的位置,中草药作为动物保健剂和饲料添加剂在畜牧生产中得到越来越普遍的应用并受到养殖者们的欢迎。但是,以中草药作为饲料中基本成分持续使用的研究报道还不多见。中草药是我国特有的中医药理论与实践的产物,而作为饲料添加剂使用,具有不易产生耐药性、无残留、毒副作用小、功能全面等优点,引起了畜牧业工作者的极大关注。因此,中草药饲料添加剂的研制开发,对于发展绿色畜牧业、保证人类的身体健康、促进畜产品的出口创汇,具有重要的经济
10、效益和社会效益。抗生素作为饲料添加剂在饲料工业中的应用已有几十年的历史,曾对畜牧业的发展起到了积极的推动作用 1。枳实为芸香科植物酸橙及其栽培变种或甜橙的干燥幼果,枳实属理气中药,有破气消积;化痰除痞的功效。白术是菊科苍术属的一种植物,单叶、狭长,花紫色,头状花序,以根茎入药,能够补脾益气、燥湿利水。其含有 白术多糖 、挥发油 、氨基酸等多种有效成分3-7。白术多糖在一定的浓度范围内能单独激活或协同 ConA、PHA 促进正常小鼠淋巴细胞转化,并明显提高 IL-2分泌的水平。氢化可的松造成小鼠的免疫抑制,白术多糖对淋巴细胞的增殖功能有恢复的作用,并提高免疫抑制小鼠脾脏细胞体外培养的存活率,延长
11、淋巴细胞寿命,纠正 T细胞亚群分布紊乱状态,可使低下的 IL-2水平显著提高。1.2研究内容采用标准日粮进行饲喂。经母源抗体检测后,、四组于 10日龄首免鸡新城疫 C30-86冻干苗,每只鸡滴鼻点眼 2羽份,在 10日龄时按照日饲料量的 1%(组)、2%(组)饲喂复方中药枳术汤(ZZT) ,28 日龄二次免疫(剂量和方法同首次免疫) 。组为空白对照组,不免疫不给药,正常饲养。于 17、24、31、38、45 日龄时,早晨 8点喂料之前进行称重,然后每组分别随机抽取 7只鸡,心脏采血,静置两小时后,3000 转/分钟离心 10分钟分离血清待用,采集免疫器官并计算免疫器官指数。研究中草药复方对肉仔
12、鸡生产性能和免疫器官的影响。这对雏鸡的绿色养殖具有重大意义。2 材料与方法2.1 试验材料2.1.1 试验动物与试剂药品Comment S2: 删去多余空行,按标准排版。31日龄健康海兰灰雏公鸡,购自北京市峪口种鸡场;鸡新城疫 C30-86疫苗(杭州荐量生物工程有限公司,批号:121005) ;免疫因子 (河南森隆兽药有限公司,批号:20120821);鸡新城疫抗原(中国兽医药品监察所,批号:120313) ;一次性血凝板 APES(姜堰市新康医疗器械有限公司) ;IFN-、IL-2 试剂盒(均购自美国 RD公司) ;磷酸缓冲盐、枸橼酸钠、枸橼酸、乙醇、PBS 磷酸缓冲盐等均为国产分析纯试剂;
13、中草药枳实和白术购于河北省安国市中草药批发市场。2.1.2 主要仪器设备MDF-382E直立式超低温冰箱(SANYO Electric Biomedical) ;BCD-189型冰箱(青岛海尔股份有限公司) ;移液器(百得实验仪器有限公司) ;XSP-C型生物显微镜(重庆广电仪器有限公司) ;酶标仪 9602(北京普朗有限公司) ;AS200-5型电子天平(OHAUS) ;LDZ4-0.8型低速离心机(北京医用离心机厂) ;HPX-9162MBE数显电热培养箱(上海博讯实业有限公司) ;DHW-600恒温水浴锅(北京国华仪器厂) ;KQ-400DB型 KQ-400DB(昆山超声仪器有限公司)
14、;MILLI-QRG纯水处理器;YX-280D高压灭菌锅(江阴滨江医疗设备厂2.2 试验方法2.2.1 试验动物饲养与分组处理试验前 1周,将饲养工具与周围环境用高锰酸钾与甲醛进行熏蒸 5d,然后开窗通风。在雏鸡到之前将室内温度提高到 36,饲养连续三天后,将室内温度逐渐下降至室温;前 3天光照 24h,以后每天降一小时逐渐到日常光照;前十天室内湿度为 70%左右,饲喂十天后逐渐降至 60%;保证充足洁净饮水,采用标准日粮进行饲喂。将 175只 1日龄海蓝灰雏鸡随机分为 5组,每组 35只,7 个重复,采用标准日粮进行饲喂。经母源抗体检测后,、四组于 10日龄首免鸡新城疫 C30-86冻干苗,
15、每只鸡滴鼻点眼 2羽份,在 10日龄时按照日饲料量的 1%(组)、2%(组)饲喂复方中药枳术汤(ZZT) ,28 日龄二次免疫(剂量和方法同首次免疫) 。组为空白对照组,不免疫不给药,正常饲养。于 17、24、31、38、45 日龄时,早晨 8点喂料之前进行称重,然后每组分别随机抽取 7只鸡,心脏采血,静置两小时后,3000 转/分钟离心 10分钟分离血清待用,采集免疫器官并计算免疫器官指数。具体分组及用药见表 1。Comment S3: 删掉这一组,结果中没有这一组,把上一组作为枳术汤组,组别再重新编号一下。Comment S4: 去掉这一组,结果中涉及到这一组的也去掉。4表 1试验分组与用
16、药Table 1 Animal treatment in different groups组别 n 给药浓度 给药方式 给药时间 免疫情况(ZZT)低剂量组 35 1% 拌料 Day 10-45 C30-86冻干苗(ZZT)高剂量组 35 2% 拌料 Day 10-45 C30-86冻干苗免疫对照组 35 C30-86冻干苗“免疫因子”组 35 按说明投药 拌料 Day 10-45 C30-86冻干苗空白对照组 35 2.2.2 生长性能在每个试验时间点早晨 8点喂料之前进行称重,记录每天耗料量。计算平均日增重和料肉比。平均日增重(末重初重)/天数;料肉比日耗料量/日增重;2.2.3 免疫器官
17、指数的测定将各组雏鸡早晨 8点开始空腹称重;采集对应的脾脏、法氏囊和胸腺,用滤纸吸去表面水分,然后用分析天平称重、一一记录。根据所称重量计算免疫器官指数。免疫器官指数=免疫器官重 mg/体重 g2.2.4 血清 ND抗体水平检测 4 单位抗原的配制在一次性 96孔微量血凝板上标号,第一排 1-11孔依次向每孔加入 PBS液 25L,第12孔加 50L,二三排重复上述操作。再向每排的第 1孔加入 25L 按标签稀释后的鸡新城疫抗原,吹吸混合均匀,吸 25L 至第 2孔,吹吸混合均匀,依次同上向后倍比稀释至第 11孔,弃去 25L。然后每排的第 1-11孔加入 PBS液 25L,最后每孔加入 1%
18、的鸡红细胞悬液 25L,第 1-11孔为试验组,第 12孔为红细胞对照孔。将 96孔板置于微量振荡器上震动混匀,室温静置 40分钟,观察结果。结果判定,96 孔板倾斜 45,和对照孔进行比较。倾斜后底部红细胞完全不流动为被新城疫抗原完全凝集,底部红血球呈线性流淌表明红细胞未被或不完全凝集。以 100%凝集的抗原最大稀释倍数为该抗原血凝价,即一个凝集单位,从该孔的抗原稀释倍数除以 4的稀释倍数,则作为该抗原的 4单位抗原。检测血清抗体时对抗原进行二标用以检测抗原配比比例正确。 样品的检测在一次性 96孔微量血凝板上,每排 1-11孔依次向每孔加入 PBS液 25L,第 12孔加 50L,再向每排
19、的第 1孔加入 25L 待测血清,吹吸混合均匀,依次同上向后倍比稀释至第 10孔,然后向第 1-11孔每孔加入 25L 4 单位抗原,在微量振荡器上振荡混匀,Comment S5: 阿拉伯数字标号,下面写上英文表头。Comment S6: 将这些字母都设为上标,下同。5室温静置 30分钟,向每孔加入 1%的鸡红细胞悬液 25L,振荡混匀,室温静置 40分钟,观察。11 孔为抗原对照孔,12 孔为红细胞对照孔,结果以出现完全凝集的抗原最大稀释度为该抗原的血凝滴度孔。2.2.5 IFN- 含量的测定将冷藏室的鸡 干扰素(IFN-)ELISA 检测试剂盒取出,置于室温(25)平衡20分钟。然后将平衡
20、后的酶标板,按照说明要求依次向标准品孔加入不同浓度的标准品50L。样本孔加待测血清样本 10L 后,加入样本稀释液 40L,空白孔不加液体。然后将标准品孔和样本孔中每孔加入检测抗体(酶标记)100L,封膜后置于恒温箱温育60分钟。用洗涤液洗涤 5次,拍干后每孔加入底物溶液 A、底物溶液 B各 50L,37避光温育 15分钟,然后每孔加入终止液 50L。在酶标仪 450nm波长处检测 OD值。根据标准品制作标准曲线,依据样品的 OD值,在标准曲线上查找对应的浓度。2.2.6 IL-2含量的测定将冷藏室的鸡白介素(IL-2)ELISA 检测试剂盒取出,置于室温(25)平衡 20分钟。然后将平衡后的
21、酶标板,按照说明要求依次向标准品孔加入不同浓度的标准品50L。样本孔加待测血清样本 10L 后,加入样本稀释液 40L,空白孔不加液体。然后将标准品孔和样本孔中每孔加入检测抗体(酶标记)100L,封膜后置于恒温箱温育60分钟。用洗涤液洗涤 5次,拍干后每孔加入底物溶液 A、底物溶液 B各 50L,37避光温育 15分钟,然后每孔加入终止液 50L。在酶标仪 450nm波长处检测 OD值。根据标准品制作标准曲线,依据样品的 OD值,在标准曲线上查找对应的浓度。2.3统计学处理通过 spass 17.0 软件进行处理,使用统计学进行单变量方差 (one-way ANOVA) 分析,数据以平均数标准
22、差(XS)表示,差异极显著设为 P0.01,显著性水平设为 P0.05)6从表一可以看出从表 1可以看出:14 日龄时,枳术汤组与阴性对照组、枳术汤组与阳性对照组、阴性对照组与阳性对照组之间均存在显著差异;24 日龄、31 日龄和 38日龄时,阴性对照组与阳性对照组之间无显著差异,枳术汤组与阴性对照组、枳术汤组与阳性对照组存在有明显的差异;45 日龄时,枳术汤组、阴性对照组和阳性对照组之间均无明显差异。此外枳术汤组对雏公鸡 HI-HA新城疫抗体的影响最大。表二 枳术汤对雏公鸡 INF-r的影响17d 24d 31d 38d 45d枳术汤组 7.831.40a 6.771.11a 6.820.7
23、4a 7.282.11a 8.401.76a阴性对照组 5.182.06b 4.211.75b 6.000.35b 3.750.78b 5.561.43b阳性对照组 8.632.69a 5.321.00ab 5.940.88b 3.201.50b 6.411.50b注:同行数据肩注小写字母完全不同表示差异显著,含相同字母表示差异不显著。从表二可以看出:17 日龄时,枳术汤组与阳性对照组、阳性对照组与阴性对照组之间均存在着显著的差异,而枳术汤组与阳性对照组之间无显著差异;24 日龄时,枳术汤组、阴性对照组及阳性对照组间存在着显著的差异;在 31日龄、38 日龄、45 日龄时,阴性对照组与阳性对照
24、组之间无显著的差异,而枳术汤组与阴性对照组、枳术汤组与阳性对照组之间有显著的差异。从 24日龄到 45日龄,枳术汤组随着日龄的增加对雏公鸡INF-r的影响而逐步增加。并且枳术汤组对雏公鸡 INF-r的影响最大。表三 枳术汤对雏公鸡 IL-2的影响17d 24d 31d 38d 45d枳术汤组 10.304.46a 9.794.43a 30.4713.16a 27.606.96a 35.0816.28a阴性对照组 3.031.69b 1.863.27b 15.608.46b 18.494.74b 19.194.38b阳性对照组 5.453.54b 4.742.83b 20.484.22ab 21
25、.595.98ab 15.675.67b注:同行数据肩注小写字母完全不同表示差异显著,含相同字母表示差异不显著。从表三可以看出:17 日龄、24 日龄时,阴性对照组和阳性对照组之间无显著的差异,阴性对照组与枳术汤组、阳性对照组与枳术汤组之间存在着显著的差异;31 日龄、38 日龄时,枳术汤组、阴性对照组、阳性对照组三者之间均存在着明显的差异;45 日龄时,阴性对照组与阳性对照组之间无明显差异,而阴性对照组与枳术汤组、阳性对照组与枳术汤组间均存在着明显的差异。并且枳术汤组对雏公鸡 IL-2的影响相对与阴性对照组和阳性对照组影响最大。说明枳术汤明显影响 IL-2分泌的水平。7表四 枳术汤对雏公鸡胸
26、腺指数的影响17d 24d 31d 38d 45d枳术汤组 4.360.83a 5.220.86a 5.560.33a 5.450.58a 6.010.47a阴性对照组 5.260.70a 4.970.71a 4.470.60b 5.090.34b 5.480.48b阳性对照组 4.941.03a 4.800.72a 4.940.76b 4.810.35b 4.940.69b注:同行数据肩注小写字母完全不同表示差异显著,含相同字母表示差异不显著。从表四可以看出,17 日龄和 24 日龄时,枳术汤组、阴性对照组和阳性对照组三者间均无显著差异;31 日龄、38 日龄、45 日龄时,阴性对照组与阳性
27、对照组之间无明显差异,而阴性对照组与枳术汤组,阳性对照组与枳术汤组均存在着明显差异。且 17 日龄时,枳术汤组对雏公鸡胸腺指数的影响最小;从 24 日龄后,枳术汤组队雏公鸡胸腺指数的影响最明显。表五 枳术汤对雏公鸡法氏囊指数的影响17d 24d 31d 38d 45d枳术汤组 6.961.28b 7.711.80a 8.390.92a 8.570.26a 8.350.74a阴性对照组 7.240.99b 7.481.46a 7.681.10ab 6.911.34b 8.101.28ab阳性对照组 7.201.43a 6.450.29a 7.480.78b 7.160.76b 7.581.33b
28、注:同行数据肩注小写字母完全不同表示差异显著,含相同字母表示差异不显著。从表五可以看出:17 日龄时,枳术汤组与阴性对照组之间无显著的差异,而枳术汤组与阴性对照组、枳术汤组与阳性对照组之间均存在着显著地差异;24 日龄时,枳术汤组、阴性对照组、阳性对照组三者之间无显著差异;31 日龄时,枳术汤组、阴性对照组、阳性对照组之间均存在着显著差异;38 日龄时,阴性对照组与阳性对照组之间无明显差异,枳术汤组与阴性对照组、枳术汤组与阳性对照组间存在着显著的差异;45 日龄时,枳术汤组、阴性对照组与阳性对照组三者间均存在着显著的差异。17 日龄到 38 日龄期间,枳术汤对雏公鸡法氏囊的影响随着日龄的增加而
29、逐渐增加。45 日龄后有轻微的下降。说明了,枳术汤在法氏囊退化前对法氏囊指数存在着一定的影响力。表六 枳术汤对雏公鸡脾指数的影响17d 24d 31d 38d 45d枳术汤组 1.530.20a 1.990.19a 2.620.35a 2.400.29a 2.380.18a阴性对照组 1.610.28a 2.220.38a 2.120.36a 2.190.31a 1.990.57a阳性对照组 1.460.33a 1.900.18a 2.330.34a 2.000.45a 2.170.41a注:同行数据肩注小写字母完全不同表示差异显著,含相同字母表示差异不显著。Comment S8: 这段需重写
30、,参考相关的一篇文章,材料和结果换成你的,修改一下。8从表六可以看出:17 日龄、24 日龄、31 日龄、38 日龄、45 日龄时,枳术汤组、阴性对照组、阳性对照组三者间均无显著的差异。说明枳术汤对雏公鸡的脾指数无显著影响。表七 枳术汤对雏公鸡肠道 IgA的影响十二指肠 回肠 P结枳术汤组 51.174.65a 33.782.05a 32.151.85a阴性对照组 20.481.18c 18.891.74b 21.161.96c4.21阳性对照组 46.371.83b 33.181.43a 30.602.97a枳术汤组 62.742.12a 38.581.40a 38.243.07a阴性对照组
31、 23.401.72c 21.522.11c 20.691.58c5.5阳性对照组 41.372.13b 29.081.28b 24.002.65b枳术汤组 64.902.46a 42.642.21a 46.132.92a阴性对照组 23.531.64c 22.111.95c 22.102.27c5.19阳性对照组 35.632.90b 25.831.65b 28.027.76b注:同行数据肩注小写字母完全不同表示差异显著,含相同字母表示差异不显著。从表七可以看出:4 月 21日,试验对雏公鸡十二指肠 IgA的影响:枳术汤组、阴性对照组、阳性对照组三者之间均无明显差异;试验对雏公鸡回场 IgA
32、的影响:枳术汤组与阳性对照组间无显著的差异,阴性对照组与枳术汤组、阳性对照组与枳术汤组之间存在着显著的差异;试验对雏公鸡淋巴结 IgA的影响:枳术汤组和阳性对照组间不存在显著的差异,而阴性对照组与阳性对照组、阴性对照组与枳术汤组间均存在着明显的差异。5月 5日,试验对雏公鸡十二指肠 IgA的影响:枳术汤组、阴性对照组、阳性对照组三者之间均无明显差异;试验对雏公鸡回场 IgA的影响:枳术汤组、阴性对照组、阳性对照组三者之间均无明显差异;试验对雏公鸡淋巴结 IgA的影响:枳术汤组、阴性对照组、阳性对照组三者之间均无明显差异。5 月 19日,试验对雏公鸡十二指肠 IgA的影响:枳术汤组、阴性对照组、
33、阳性对照组三者之间均无明显差异;试验对雏公鸡回场 IgA的影响:枳术汤组、阴性对照组、阳性对照组三者之间均无明显差异;试验对雏公鸡淋巴结IgA的影响:枳术汤组、阴性对照组、阳性对照组三者之间均无明显差异。此外枳术汤十二指肠 IgA、回肠 IgA以及 P结 IgA的影响相对于阴性对照组与阳性对照组影响最大,并且随着日龄的增加枳术汤对十二指肠 IgA、回肠 IgA以及 P结 IgA的影响也不断增加。说明枳术汤可以提高雏公鸡肠道 IgA的水平。4 讨论9枳术汤对雏公鸡免疫器官指数的影响胸腺、脾脏和法氏囊是禽类的主要免疫器官,参与机体的体液免疫和细胞免疫,其发育状态及机能的强弱决定着机体的免疫水平。刘
34、振湘等认为白术多糖可以促进湘黄鸡免疫器官的生长发育,特别是 1-14 日龄阶段8。枳术汤对雏公鸡血清 IL-2 的影响IL-2 即白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2) ,又名 T 细胞生长因子(T cell growth factor,TCRF)。主要由活化的 CD4+Th1 细胞产生的具有广泛生物活性的细胞因子。可促进 Th0 和 CTL 的增殖,故为调控免疫应答的重要因子,也参与抗体反应、造血和肿瘤监视。文贵辉等认为白术多糖能够在一定程度的提高樱桃谷鸭的生长性能,促进淋巴细胞增殖,提高血清 IL-2 和 IL-6 的浓度。本实验中枳术汤组对雏公鸡 IL-2 的影响最大9,
35、与上述基本相似。5 结论本试验用海兰灰雏公鸡为试验对象,通过测定并分析比较生长性能、血清 ND 抗体水平、免疫器官指数等指标,结果显示,随着用药时间的增加,提高腔上囊、脾和胸腺等免疫器官指数。证实该中药复方可促进雏鸡细胞免疫水平,增强其非特异性免疫功能,并促进免疫器官的发育10参考文献:1 张君涛,王建华.中草药饲料添加剂开发与应用J.畜禽业,2003,2:4042.2 FDA. Center of Veterinary Medicine: Freedom of information summary, NADA 046-592, bacitracin methylene disalicyla
36、te food and drug administrationM. Washington D. C., 1999.3 董岩 ,辛炳炜白术化学成分研究新进展 J山东 医药 工业 ,2003 ,23 (3 ) :324 池玉梅白术多糖的分离纯化和化学结构研究 J中药 材 ,200 1 ,24 (9 ) :647 5 黄海英,白术活性成分的提取、纯化及功能性研究 D 南昌大学 ,2 0 0 6 6 陈文 ,何鸽飞 ,姜曼花等近 1O 年白术的研究进展 J时珍国 医国药 ,2007 ,18(2) :3387 陈代文.饲料添加剂学(第 2 版)M.北京:中国农业出版社,2003.78.8 白术多糖对樱桃谷鸭生长性能及免疫机能的影响.湖南农业大学,2006.9 白术粗多糖对湘黄鸡免疫指数的影响.湖南环境生物职业技术学院, 饲料研究 2012年01期.8 杨凤.动物营养学(第 2 版)M.北京:中国农业出版社,1999.910.9. 中草药饲料添加剂对 AA 鸡生产性能、肌肉品质及血清生化指标的影响 .
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