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微生物-培养方法.ppt

1、选修一 专题2,微生物的培养与应用,微生物的种类,非细胞:病毒;原核细胞:细菌、蓝藻、放线菌、支原体等。真核细胞:真菌、原生生物、藻类等。 细菌:大肠杆菌、乳酸菌等 真菌:酵母菌、霉菌; 原生生物:草履虫、变形虫等。,微生物的特点,体积小,面积大 吸收多,转化快 生长旺,繁殖快; 适应强,易变异; 分布广,种类多。,微生物的营养,培养基:碳源、氮源、水、无机盐等。适宜的环境条件:温度、pH、氧气等。自养型:无机碳源;异养型:有机碳源。,细菌,(1)结构:单细胞的原核生物,有球形,杆形,螺旋形。 基本结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、拟核。 特殊结构:荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞。 (3)繁殖: 二分裂。

2、,菌落,菌落: 单个细菌用肉眼是看不见的,当单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,便会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群落。 菌落是菌种鉴定的重要依据。不同种类的细菌菌落的大小,形状光泽度颜色硬度透明度都不同。,培养基的种类及应用,按物理状态不同划分,按化学组成不同划分:合成培养基/天然培养基,按用途不同划分,鉴别培养基,选择培养基,无菌技术,消毒:不能杀死芽孢和孢子。 煮沸、紫外线、化学药剂灭菌:能杀死芽孢和孢子。 高压蒸汽灭菌、灼烧、干热、过滤。,配制培养基,包器材,灭菌,菌种扩增,倒平板,接种,培养,观察记录,实验操作微生物的培养,配制培养基,LB培养基: 蛋白胨: 10g

3、 酵母粉: 5g NaCl: 10g 琼脂: 20g 将上述物质溶解后, 用蒸馏水定容至1000ml, 分装后及时灭菌。,包器材,灭 菌,高压蒸汽灭菌 : 通过加热使菌体内蛋白质凝固变性,从而达到杀菌目的。条件:压力100 kPa 温度121 时间15-30 min,菌种扩增,摇床震荡培养12h(于LB液体培养基中),本图来自十一学校,实验用具,LB固体培养基大肠杆菌菌液(LB液体培养基)培养皿接种环酒精棉酒精灯镊子、火柴、记号笔,接种前准备,用肥皂洗手并使用酒精消毒。顺序: 点燃酒精灯酒精棉擦拭双手酒精棉擦拭桌面,倒平板,接种、划线,灼烧接种环取菌液划线分离,烧至暗红,接种、划线,灼烧接种环

4、取菌液划线分离,菌液膜,接种、划线,灼烧接种环取菌液划线分离,接种、划线,划线分离,为什么通过划线分离可得到单菌落?,倒置后做好标记,写在培养皿侧面,划线分离,我们的实验结果,培养,为什么要倒置培养?,恒温37培养,配制菌悬液,1个99ml无菌水 2个9ml无菌水,得10-2, 10-3, 10-4的菌悬液,1g土壤,稀释菌悬液 (10-4),高浓度低浓度,换枪头,接种,取200ul菌悬液(10-4),涂布分离,低浓度高浓度,可不用换枪头,涂布分离,涂布前后三角刮刀需要灼烧吗?,37倒置培养,按浓度捆成一摞,恒温37培养,10-4 、 10-3,、 10-2,常见接种方法,平板划线法: 主要用于分离、纯化培养稀释涂布平扳法: 主要用于分离菌种并计数,

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