《分子生物学》课程教学大纲.doc

1、1分子生物学课程教学大纲（理论学时：16 学时）使用教材： 医学分子生物学（供 8年制及 7年制临床医学等专业用）分子生物学是一门从分子水平研究生命现象、生命的本质、生命活动及其规律的科学。医学分子生物学是分子生物学的一个重要分支，是从分子水平研究人体在正常及疾病状态下生命活动及其规律的一门科学。它主要研究人体生物大分子和大分子体系的结构、功能、相互作用及其同疾病发生、发展的关系。作为一门课程，医学分子生物学涵盖了医学各专业学生必须学习的分子生物学基础知识，以及分子生物学在医学领域中形成的专门研究领域及相关知识。医学分子生物学既要较系统地了解分子生物学的基础理论知识和技术理论知识，同时也要了解

2、分子生物学在医学领域的应用和相关研究进展。本书共二十三章，包括 5 个方面内容。第二章至第十章介绍分子生物学基本知识，主要介绍基因和基因组的基本概念和基本特点，基因组核酸复制与损伤修复、基因表达和功能蛋白形成与降解、基因表达调控、细胞间通讯与信号转导的基本概念和基本理论，细胞增殖与凋亡的相关分子生物学机制。第十一章至第十三章介绍基因操作的基本知识，包括基因分析、基因功能研究和基因克隆与表达的相关基本知识和研究策略。第十四章至第十八章介绍疾病分子生物学机制，介绍了基因和基因组、2细胞间通讯和信号与人类健康和疾病之间关系。第十九章至第二十一章介绍分子生物学理论与技术在医学中应用，包括基因诊断和基因

3、治疗概念与相关研究。最后两章介绍分子生物学新兴研究领域、生物信息学在基因和蛋白质研究中的应用。本大纲正是从上述目的出发，在要求学生掌握分子生物学基本知识与基本技术，同时了解分子生物学在医学领域的应用与相关研究。使学生们在分子水平上研究人体在正常及疾病状态下生命活动及其规律，为从事临床医学打下深厚的基础。3绪 论一、目的要求了解分子生物学的定义、研究对象和研究内容；分子生物学发展简史；生物遗传物质的发现；现代分子生物学的建立和深入发展；分子生物学与相关学科的关系；分子生物学在医学和生物学中的应用。二、主要内容分子生物学则是从分子水平研究生命现象及其规律的一门新兴学科。它以核酸和蛋白质等生物大分子

4、的结构与功能为研究对象（一） 、分子生物学的研究内容分子生物学主要研究生物大分子的结构、功能、生物大分子之间的相互作用及其与疾病发生、发展的关系。研究内容主要包括以下三个方面。1.核酸分子生物学2.蛋白质分子生物学3.细胞信号转导（二） 、分子生物学发展简史1、生物遗传物质的发现2、现代分子生物学的建立3、现代分子生物学的深入发展（三） 、分子生物学与相关学科的关系由于生命本质的高度一致性，分子生物学已经对生物学和医学的各个领域产生了全面而深刻的影响，并逐步形成了一系列的分子学科。4可以使用同一套理论、同一套技术，来解释和研究不同的病理、生理现象，甚至治疗不同的疾病。1、分子生物学与生物化学2

5、、细胞生物学与分子生物学3、分子生物学与遗传学4、分子生物学与生物技术（四） 、分子生物学与医学未来分子生物学的发展和渗透从根本上改变了医学（包括临床和基础医学）各个学科的格局, 使医学各学科进入了一个更高的水平分子水平。1、分子生物学在医学和生物学中的应用2、分子生物学与基础医学3、分子生物学和病理学4、分子生物学和疾病诊断5、分子生物学和疾病治疗基因治疗技术的发展与整个医学科学的发展以及许多分子生物学新理论、新技术、新方法的应用密切相关。所谓基因治疗，就是用正常基因置换致病基因以纠正患者基因结构和功能异常的一种疾病治疗的方法。狭义的基因治疗是指目的基因导入靶细胞后与宿主细胞内的基因发生整合

6、、成为宿主基因组的一部分，目的基因的表达产物起治疗疾病的作用。5广义的基因治疗则包括通过基因转移技术，使目的基因得到表达，封闭、剪切致病基因的 mRNA，或自杀基因产物催化药物前体转化为细胞毒性物质，杀死肿瘤细胞，从而达到治疗疾病的目的。三、学时安排1 学时第二章 基因与基因组一、目的要求：（一）掌握：基因的概念及结构特点；中心法则；基因转录调控相关序列；多顺反子，单顺反子；真核基因与原核基因的结构特点。基因组的概念；病毒、细菌及真核生物基因组的结构特征。（二）熟悉：基因突变的意义，基因组变异的生理和病理学意义。 （三）了解：基因的命名法，基因组学；人类基因组计划。二、主要内容基因是负责编码

7、RNA 或一条多肽链的 DNA 片段，包括编码序列、编码序列外的侧翼序列及插入序列。编码 RNA 或蛋白质的 DNA 序列称为结构基因。原核生物的结构基因是连续的，其 RNA 合成后不需要经过剪接加工。而大多数真核生物基因在编码区内有非编码的插入序列。基因中含有与转录有关调控序列。真核生物基因中调控序列一般称为顺式作用元件。大多数生物的遗传信息都是以特定的核苷酸排列顺序贮存在 DNA 分6子中。但在一些病毒中，RNA 作为遗传物质。多数生物信息按照从 DNA到 RNA 再到蛋白质的方向流。但是对 RNA 病毒是以 RNA 为模板，合成单链 DNA，然后再合成双链 DNA。mRNA 将 DNA

8、中信息传递给蛋白质。在 mRNA 编码区内每三个连续核苷酸，对应多肽链一个氨基酸，指导蛋白质合成。原核生物 mRNA 称多顺反子 mRNA，而真核生物 mRNA 称单顺反子 mRNA。基因突变在进化上具有重要意义，它是形成生物多样性主要因素之一。同时基因突变可以改变遗传信息，导致疾病。导致基因突变因素有自发、物理、化学因素等，基因突变可直接影响蛋白质一级结构和空间结构，导致疾病或对疾病易感。基因命名的基本原则是简明、独特、能够表达基因的特征或功能。基因符号的命名也应遵循独特、简短、仅含有大写拉丁字母或大写字母和阿拉伯数字、不应含有标点符号的基本原则。1重点内容：基因转录调控相关序列；多顺反子，

9、单顺反子；基因组的概念；病毒、细菌及真核生物基因组的结构特征。2难点内容：基因的结构特点，真核生物基因组的结构特征。三、学时安排5 学时第三章 基因表达与基因表达调控一、目的要求：7（一）掌握：遗传信息表达，转录，翻译，有意义链，转录模板链，开放阅读框，遗传密码等基本概念。基因表达，管家基因，组成性基因表达，诱导表达，阻遏表达，协调表达，表达调控，反式作用因子，表达组织特异性等基本概念；乳糖操纵子的结构及其调节机制。（二）熟悉：原核生物 RNA 和蛋白质的生物合成基本过程，真核生物RNA 和蛋白质合成特点；真核生物基因表达调控的各个水平，DNA 水平调控的不同方式，反式作用因子的主要特点和调节

10、方式，转录后调控的不同环节，翻译水平和翻译后水平调控的基本环节（三） 、了解：了解转录和翻译后的加工。反式作用因子结构域模式和反式作用因子的作用方式，基因表达的组织特异性和时相性。二、主要内容原核生物基因表达调控主要是在转录水平和翻译水平。转录水平的调控涉及启动子、S 因子、阻遏蛋白、正调控蛋白等多种因素，翻译水平的调控则涉及 SD 序列、mRNA 的稳定性及翻译产物的调控。真核生物基因表达调控环节较多，在 DNA 水平可通过染色体丢失、基因扩增、基因重排、DNA 甲基化以及染色质结构改变影响基因表达；在转录水平则主要通过反式作用因子的作用调控转录因子与 TATA 盒的结合、RNA 聚合酶与转

11、录因子-DNA 复合物的结合以及转录起始复合物的形成；在转录后水平主要通过 RNA 修饰、剪接及 mRNA 运输的控制来影8响基因表达；影响翻译水平的因素有影响翻译起始的阴遏蛋白、5AUG、5端非编码区的长度等，另外还存在小分子反义 RNA 对翻译调控。翻译后蛋白质修饰和定位也是表达调控的重要环节。同时近年提出的有关基因表达的统一理论惭被认识。从而形成一个完整的调控网络。1、重点内容：原核生物转录水平的调控机制；真核生物转录水平的调控机制；真核生物转录后水平的调控机制。2、难点内容：原核生物转录水平的调控机制。三、 学时安排4 学时第四章 基因分析的基本策略一、目的要求（一）掌握：Southe

12、rn 杂交和 PCR 等技术原理及在分析基因拷贝数的应用；Northern blot 和 RT-PCR 技术原理及在基因转录水平变化分析中的应用；（二）熟悉：Western blot 原理及在特定基因产物-蛋白质分析中的应用。（三）了解：DNA 序列测定的原理及其主要应用；RNA 酶保护试验原理9及应用；原位杂交技术；DNA 微阵列技术原理； 流式细胞术的应用；免疫组化方法的应用。二、主要内容基因分析是一种策略性很强的工作，有许多技术可以用于基因分析，正确选择实验技术方法和基因分析切入点是进行基因分析首先要考虑的问题。根据信息中心法则，DNA 是遗传信息的携带者，RNA 是基因的转录产物，蛋白

13、质是结构基因的最终产物，因此，分析基因可从DNA、RNA、蛋白质水平上进行。同时研究者善于将各种技术有机结合起来，根据研究目的筛选适当技术方法，也可先制定研究策略，再进行实验技术路线设计。1、重点内容：Southern 杂交和 PCR 等技术原理及应用；Northern blot 和 RT-PCR 技术原理及应用 Western blot 原理及应用。2、难点内容：RNA 酶保护试验原理及应用。三、学时安排3 学时第五章基因功能分析的基本策略一、目的要求（一）掌握：转基因模型研究基因的功能原理、基因敲除技术原理、利用基因沉默技术对基因功能进行分析的原理（二）了解；三种实验技术的操作过程及注意事

14、项二、主要内容10基因功能分析可以在 DNA、RNA 和蛋白质水平上采用不同的技术和模型来实现。模式生物是研究基因功能不可缺少的工具，转基因小鼠和基因敲除技术是目前研究特定基因功能最常用的动物模型，转染细胞是利用转基因技术建立的细胞模型。RNA 干涉技术能够实现在 RNA 水平上暂时关闭特定基因的方法。各种方法都具有各自的特点及局限性，研究者可根据不同目的筛选最合适方法与模型，实现对特定基因功能的研究目的。1、重点内容：转基因技术、基因敲除技术及 RNA 干涉技术原理2、难点内容：转基因技术、基因敲除技术及 RNA 干涉技术各自优点及局限性三、学时安排3 学时第六章 基因工程与体外表达一、目的要求：（一） 、掌握：常用克隆载体；基因克隆的基本过程；外源基因在大肠杆菌和哺乳动物细胞中表达的原理和方法。（二） 、熟悉：限制性核酸内切酶和其他常用工具酶的概念和特点；定点诱变技术原理。（三） 、了解：昆虫表达系统；酵母表达系统。二、主要内容：基因工程指在体外对 DNA 分子按照既定的目的与方案进行剪切和重